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2 - CHROMATOGRAPHIE D'ECHANGE D'IONS

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2 - CHROMATOGRAPHIE D'ECHANGE D'IONS Powered By Docstoc
					                                           Principales méthodes chromatographiques classiques
                                                                          (Tableau simplifié)


                   ADSORPTION                 PARTAGE            ECHANGE D'IONS               EXCLUSUIN -            INTERACTIONS                   INTERACTIONS
                                                                                               DIFFUSION             HYDROPHOBES                   BIOSPECIFIQUES
Type            Liaisons               Solubilité des                                   Pas d’interactions :      Liaisons hydrophobes           Liaisons bio spécifiques
                                                               Liaisons ioniques entre
d’interaction   électrostatiques entre solutés dans la                                  diffusion plus ou         entre le support et les        existant entre un ligand
                                                               la phase stationnaire et
                groupements polaires phase stationnaire                                 moins grande dans         solutés                        et une protéine
                                                                      les solutés
                                                                                        une matrice poreuse
Phase           Solide                     Phase normale       Supports solides         Supports sous forme de    Support solide (billes d'aga   Support solide (billes
stationnaire    Gel de silice, alumine,    Phase liquide       minéraux ou              billes de gel poreux      rose) sur lequel sont fixés    d'aga rose) sur lequel sont
                verre, carbonate de        polaire             organiques naturels      Naturels :                des groupements                fixés des ligands :
                calcium                                                                 SEPHADEXTM,               hydrophobes en C6, C8,         colorants
                ------------------------                       Synthétiques
                                       -------------------------                        SEPHAROSETM               C16, C18 ou phényle            coenzymes ou analogues
                Hydroxyapatite et      Phase inverse           (« résines »)            Synthétiques
                phosphate tricalcique  (« Reverse Phase »)                              SEPHACRYLTM, ………
                                       Phase liquide peu
                                       polaire
Phase mobile    Solvants organiques    Phase normale             Tampon de pH et de        Tampon approprié ou    Tampon salin (forte µ)         Solution tampon de pH et
                polaires               Solvants organiques µ fixés (faible µ)              eau ….                                                de force ionique
                                       moins polaire                                                                                             déterminés
                Gradient de            -------------------------
                phosphate              Phase inverse
                                       liquide plus polaire
Elution         Gradient de polarité                             Gradient croissant de µ   Tampon approprié ou    Gradient décroissant de        Gradient de pH et/ou de
                croissante de solvants                           Changement de pH          eau …. ; isocratique   force ionique,                 force ionique
                organiques                                       (discontinu)
Application     Molécules organiques Molécules                   Molécules chargées        Molécules de même      Protéines                      Protéines ou ligands
                de MM inférieure à     organiques de MM Applicable aux                     forme et de taille
                1000 g/mol             inférieure à 1000         protéines                 variable (protéines
                                       g/mol                                               globulaires, par
                                                                                           exemple).

				
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