Sang capillaire sur papier buvard Intérêts dans le cadre by vow16147

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									Sang capillaire sur papier buvard :
   Intérêts dans le cadre d’une
   investigation d’épidémie de
 dengue au Paraguay, mars 2007
     Meynard J-B, Matheus S, Girod R, Pinanez G, Barbosa M,
   Feltes C, Carrillo M, Coluchi N, Dussart P, Morvan J, Deparis X



  XIIIe Actualités du Pharo, Marseille, 6 au 8 septembre 2007
                                          Introduction
•       Epidémie de dengue au Paraguay en janvier 2007
•       Renfort international en février 2007
           PAHO, Brésil, Argentine, Uruguay
•       Mars 2007 : plus de 18 000 cas dont plusieurs
        centaines de formes hémorragiques, 10 décès
•       Sérotype 3 circulant (laboratoire central d’Asunción)


                                                                          Demande d’un renfort
                                                                          à l’Institut Pasteur
                                                                                 à Paris




    Courbe épidémique du nombre de cas quotidiens de dengue au Paraguay
            Sources : données du ministère de la santé du Paraguay
                 Renfort de l’IP
Décision d’envoyer une équipe multidisciplinaire de l’IPG




                                 épidémiologiques

    3 types d’objectifs          virologiques

                                 entomologiques
    Un des objectifs d’investigation

Permettre de réaliser une étude virologique des souches
de dengue circulant au Paraguay au moment de cette
épidémie

•      Examens standards (RT-PCR, isolement et culture,
       test NS1, sérologies)
•      Séquençage

    Nécessité de rapatrier au laboratoire de virologie de
    l’IPG des souches de dengue du Paraguay, avec les
    moyens logistiques disponibles
              Matériel et méthodes
Décision de l’utilisation de papier buvard comme support
  des prélèvements sanguins (sang capillaire)

 Matheus S, Meynard J-B, Lacoste V, Morvan J, Deparis X. Use of capillary
   blood samples as new approach for dengue infection diagnosis. J Clin
   Microbiol 2007; 45:887-90.




  Etude pilote
pratiquée à l’IPG
en 2005 et 2006
Matériel et méthodes




          RT-PCR

                Détection NS1

                                IgM

          Conservation et transport
          à température ambiante !
             Matériel et méthodes
•   Demande aux autorités sanitaires du Paraguay de
    pouvoir réaliser des prélèvements sanguins (sang
    capillaire) à des cas confirmés ou suspects de dengue

•   Décision de travailler dans les structures hospitalières
    d’Asunción

•   Rencontre des autorités et des praticiens de chaque
    structure hospitalière

•   Information des patients et recueil du consentement
    ou du consentement d’un représentant légal
                      Résultats
•   Investigation réalisée entre le 3 et le 13 mars 2007

•   4 hôpitaux de la ville d’Asunción


                                            Prélèvements
                                               obtenus
                                             pour 44 cas
                                              suspects

                                             Conservation
                                              et transport
                                             sans chaîne
                                                du froid
                   Résultats
Global virological and serological results from the 44 capillary blood
samples absorbed onto filter papers from dengue suspected patients
                   Résultats
Global virological and serological results from the 44 capillary blood
samples absorbed onto filter papers from dengue suspected patients




                                                70,5% de cas positifs
                                                avec une ou plusieurs
                                                     techniques
                    Résultats
 Global virological and serological results from the 44 capillary blood
 samples absorbed onto filter papers from dengue suspected patients




Sérotype identifiable                            70,5% de cas positifs
   au-delà de J4                                 avec une ou plusieurs
  pour 4 patients                                     techniques
        Résultats
Confirmation du sérotype 3
22 / 44 (50,0%)
         Résultats
Confirmation du sérotype 3
22 / 44 (50,0%)


Identification d’un autre sérotype
circulant : le sérotype 2
2 / 44 (4,5%)
         Résultats
Confirmation du sérotype 3
22 / 44 (50,0%)


Identification d’un autre sérotype
circulant : le sérotype 2
2 / 44 (4,5%)

Séquençages en cours
                     Discussion
Intérêt de l’utilisation du papier buvard comme support de
    prélèvement

•   Pas de chaîne du froid nécessaire
•   Facilité du prélèvement (en particulier chez enfants)
•   Adapté pour rapatriement de prélèvements de zones
    reculées vers un laboratoire de référence
•   Permet la mise en œuvre de tous les tests de diagnostic
•   Permet l’identification de sérotypes au-delà de J4

         Outil d’investigation de choix, surtout dans des
                  conditions logistiques difficiles
        Conservation et transport
Transport
Pas considéré comme un prélèvement infectieux
Echantillons pas soumis à la réglementation IATA
    (International Air Transport Association)
Infectious Substances Shipping Guidelines 8th Edition

Indiquer sur colis
    « Not regulated dried blood spot on absorbent
      material – Non dangerous »

Conservation
2 mois à température ambiante pour dengue
Prado I, Rosario D, Bernardo L, Alvarez M, Rodriguez R, Vazquez S, and
    Guzman MG, 2005. PCR detection of dengue virus using dried whole
    blood spotted on filter paper. J Virol Methods 125:75-81.
        Intérêts pour le Paraguay

•   Meilleure connaissance des sérotypes circulants et de
    l’épidémiologie de la dengue au Paraguay

•   Collaboration avec l’IPG pour utilisation de cette
    nouvelle technique

•   Possibilité d’investigations dans des zones reculées
    du Paraguay pour lesquelles aucune analyse de
    laboratoire n’est actuellement réalisée
Sang capillaire sur papier buvard :
  Alternative pour le diagnostic
   d’infection par le virus de la
              dengue
      Matheus S, Meynard J-B, Lacoste V, Morvan J, Deparis X




  XIIIe Actualités du Pharo, Marseille, 6 au 8 septembre 2007

								
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