PROGRAMA NACIONAL DE CONTROL DE CALIDAD DE CARGA VIRAL by vtz98353

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									PROGRAMA NACIONAL DE CONTROL
 DE CALIDAD DE CARGA VIRAL DEL
             VIH-1
         Versión Anual

          7ª EDICIÓN




                Madrid, Septiembre 2005.
                       7ª edición. Programa Nacional de Control de Calidad de Carga Viral del VIH-1
                                                                                     Versión Anual
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COORDINACIÓN DEL PROGRAMA:

Centro Nacional de Epidemiología (ISCIII)/ Secretaría del Plan Nacional sobre el
Sida.

Dres. Isabel Noguer, Rubén Solano
Tlfno. 91-387.78.02; fax 91-387.78.16


LABORATORIO DE REFERENCIA:

Servicio de Diagnóstico y Referencia de Retrovirus y Papilomavirus del
Centro Nacional de Microbiología (ISCIII).

Dres. Alfredo García Sáiz, Marta Ortiz Rivera, Lourdes Muñoz Juárez.
Becaria del proyecto, Montserrat Torres Hortal
Tlfno. 91-5097965; fax 91-5097948


COLABORA: Sociedad Española de Enfermedades Infecciosas y Microbiología Clínica
(SEIMC).




Publicación disponible en Internet:
http://cne.isciii.es




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INTRODUCCIÓN

La introducción de la terapia antirretroviral de alta eficacia ha tenido un impacto
importante en la evolución de la carga viral en los pacientes tratados, alcanzándose
reducciones importantes en la viremia en sangre. Como consecuencia, la demanda de
mayor sensibilidad en las técnicas de detección de carga viral se ha convertido en una
necesidad para el manejo clínico diario1.

El Centro Nacional de Epidemiología (CNE) y el Centro Nacional de Microbiología
(CNM) del Instituto de Salud Carlos III (ISCIII), la Secretaría del Plan Nacional sobre el
Sida (SPNS) y la Sociedad Española de Enfermedades Infecciosas y Microbiología
Clínica (SEIMC), han colaborado en el desarrollo del “Programa Nacional de Control
de Calidad de Carga Viral”, de periodicidad anual, objeto de este informe en su
séptima edición relativa al año 2005.

En la actualidad existen varios métodos aprobados por el Ministerio de Sanidad y
Consumo y comercializados para cuantificar la carga viral plasmática, Amplicor HIV1
Monitor versión estándar (ST), Amplicor HIV1 Monitor versión ultrasensible (US) y
COBAS Taqman HIV1 test de Roche Diagnostics, HIV Nuclisens EasyQ system de
Organon Teknika, Versant bDNA 3.0 de Bayer Diagnostics y LCX HIV RNA
ultrasensible de Abbott Diagnostics, que permiten detectar hasta 400 y 50 copias de
RNA/ml de plasma, según el método.

El programa de control de calidad de carga viral se basa en la comparación entre los
resultados de carga viral obtenidos por los laboratorios participantes, respecto al
número de copias de RNA/ml del VIH-1 contenidas en diferentes estándares
previamente preparados por el Laboratorio de Retrovirus y Papilomavirus del CNM,
que actúa como laboratorio de referencia. Con este proyecto se pretende analizar en
el conjunto de laboratorios participantes por un lado la validez y homogeneidad en las
determinaciones y por otro la capacidad de reproducir determinaciones ante muestras
idénticas. Por tanto, se pretende recoger cuantos avances se produzcan en las
técnicas de medición de carga viral para que, de una forma voluntaria y periódica, los
laboratorios participantes puedan evaluar el grado de excelencia de sus
determinaciones.

En 1997 se inició un programa piloto que fue ofrecido a los laboratorios dependientes
del INSALUD, participando en esta primera fase 17 laboratorios. En la segunda edición
del programa, en 1998, participaron 63 laboratorios; en la tercera de 1999, 83
laboratorios; en la cuarta de 2000, 81 laboratorios; en la quinta de 2002, 85
laboratorios; en la sexta edición de 2003, 55 laboratorios; y finalmente, en la séptima
edición de 2005 han participado 58 laboratorios.

MATERIAL Y MÉTODOS

1.- Procedimientos para la preparación de los estándares de RNA.



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El virus seleccionado para la preparación de los estándares (diluciones de virus en
plasma a una concentración determinada) fue obtenido de los linfocitos de sangre
periférica de un niño de 11 años sintomático, con criterios de sida, con 22 linfocitos
CD4/ml (aislado nº 302/91, laboratorio de retrovirus del CNM). El virus se obtuvo
mediante cocultivo con linfocitos de sangre periférica (PBMCs) humanos, y ha sido
caracterizado como fenotipo sincitial y genotipo B. Se replicó en PBMCs humanos y el
sobrenadante del cultivo se clarificó mediante centrifugación y se almacenó a –70ºC.

Los paneles de estándares se han construido a partir de la dilución del virus 302/91 en
plasma humano procedente de donante sano (sangre anticoagulada con citrato y
centrifugada a 1.200 g durante 20 minutos). El plasma utilizado ha sido controlado
para detectar la presencia de infección por retrovirus (VIH 1 y 2, HTLV-I y II),
Hepatitis B y Hepatitis C, habiendo sido negativos todos los controles. En la tabla 1 se
presentan los valores de los componentes del panel utilizado.

                  Tabla 1. Estándares elaborados por el Laboratorio de Retrovirus
                  del CNM (cuantificación mediante Amplicor HIV Monitor US)

                    PANEL           Copias/ml                     log10
                  AAS7              NEGATIVO
                  ABS7                6.025                       3.78
                  ACS7                6.309                       3.80
                  ADS7                 812                        2.90
                  AES7                 123                        2.09
                  AFS7               50.623                       4.70

2.- Composición del panel.

Cada panel está compuesto por seis muestras codificadas, cinco de ellas conteniendo
una cantidad conocida de copias de RNA/ml y una con plasma humano negativo para
el VIH-1. Tras la preparación de los paneles, todas las muestras quedaron en el CNM
envasadas en criotubos a –70ºC hasta su envío a los laboratorios.

3.- Laboratorios participantes.

La participación en este programa es voluntaria. A cada laboratorio participante se le
asigna un código para todas las fases del estudio, que es el único identificador del
laboratorio operante en el proceso de envío de determinaciones, explotación y
análisis de resultados.
En el Anexo I, figuran los laboratorios que se inscribieron en el actual programa de
control de calidad, subdivididos en aquellos que enviaron resultados y los que no lo
hicieron.

Con el fin de facilitar la comunicación de los resultados por parte de cada laboratorio,
se ha diseñado una página web (https://cnm-resultados.isciii.es), gestionada por el
Laboratorio de Retrovirus y Papilomavirus del CNM, donde los laboratorios
participantes han introducido sus resultados, utilizando el código asignado para cada
uno de ellos.


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4.- Criterios de evaluación.

El estándar marcado como AAS7, es un verdadero control negativo que se ha
preparado con plasma humano libre de infección y se analiza de forma cualitativa,
considerando correctos los resultados que se dan por debajo de sus límites de
detección. Este estándar se ha introducido como control de especificidad.

El estándar AES7, es una dilución límite del virus (123 copias/ml), ya en la edición
pasada se valoró de manera semicuantitativa. Para la técnica Amplicor ST se
consideraron como óptimos los resultados cualitativos,“positivo o negativo”, y valores
cuantitativos para el resto de las técnicas (Amplicor US, COBAS Taqman, Nuclisens,
Versant bDNA y LCX HIV RNA). Asimismo, los resultados positivos para la técnica
Amplicor ST se han considerado falsos positivos en este estándar. El resto de los
estándares se analizan de forma cuantitativa. Los resultados se expresan en
logaritmos en base 10 (log10), asumiendo que las diferencias de los log10 del número
de copias responden a una distribución normal.

Los resultados se han valorado en función de dos parámetros:

4.1. Análisis de la variabilidad interlaboratorio:
Se analiza la posición de las determinaciones respecto al intervalo (±0,2 log10 y ±0.3
log10) del promedio de resultados para cada estándar y por técnica. El valor
considerado de referencia para cada una de las técnicas, fue el promedio de los
obtenidos por todos los laboratorios que la emplearon. Sumando y restando 0,2 y 0,3
al valor de referencia, se establecen los límites para cada uno de los estándares.
Como en anteriores versiones, esta medida establece la validez del resultado
obtenido.

4.2. Análisis de la variabilidad intralaboratorio (estándares ABS7 y ACS7):
Se analiza la capacidad de un laboratorio para reproducir el mismo resultado ante una
misma muestra. Se ha calculado el coeficiente de variación (CV) mediante el cociente
entre la desviación estándar (D.E.) y la media de las determinaciones para los
controles ABS7 y ACS7 en cada laboratorio. Los valores más altos reflejan una mayor
dispersión en las determinaciones y en consecuencia menor capacidad para reproducir
determinaciones sobre la misma muestra.


RESULTADOS

En esta séptima edición se enviaron los paneles a 82 laboratorios, que previamente
solicitaron su participación, y se han recibido resultados de 58 (70,7%). Las técnicas
empleadas fueron las ya descritas.

1.- Análisis de la variabilidad interlaboratorio.




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En las tablas 2, 3, 4, 5, 6 y 7 se agrupan los resultados individualizados de cada
laboratorio, identificado con su código, por técnica empleada. Se han marcado en
amarillo aquellos resultados que se encontraron dentro del intervalo ±0,2 log10 del
promedio de cada determinación y en verde aquellos que entrarían en el intervalo
±0,3. El porcentaje de resultados dentro de ±0,2 log10 (amarillo) y de ±0,3 log10
(amarillo + verde) refleja la validez de la determinación realizada.

Se han observado cuatro falsos positivos en laboratorios que usaron Amplicor ST, en
el control AES7, teniendo en cuenta que la técnica no tendría capacidad de detectar
carga viral en ese control. También se detectó un falso positivo para el control AAS7
(verdadero negativo) en un laboratorio de los que usaron Versant bDNA 3.0.

El porcentaje de resultados dentro del intervalo de ±0,2 osciló entre un 65% de los
laboratorios que usaron Amplicor ST y el 95% de los que usaron Versant bDNA 3.0.

Al aplicar el intervalo de ±0,3 log el rango de laboratorios fluctuó entre 78% con
Amplicor ST y 95% de los que usaron Versant bDNA 3.0.

En la tabla 8, se muestra el promedio de los resultados obtenidos con el panel y su
desviación estándar, para el conjunto de todos los laboratorios participantes, también
se puede observar que, los mayores intervalos en las determinaciones por cada
estándar son en el ADS7 (0,79) y el AFS7 (0,62) con Amplicor ST y en el AES7 (0,66)
con Amplicor US.

El limitado número de laboratorios que participaron con técnicas Nuclisens (sólo dos)
y LCX HIV RNA (sólo uno), ha impedido su análisis estadístico.

En el gráfico 1 se recogen los porcentajes de los laboratorios que se encuentran
dentro de los márgenes ±0,2 log10 y ±0,3 log10, para los diferentes estándares del
panel, en función del método utilizado (están excluidos los métodos Nuclisens y LCX).




                                                                                                     5
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 Tabla 2. Resultados en log10 y análisis de concordancia en los intervalos ±0,2 y ±0,3 log10, de
 los laboratorios que utilizan Amplicor HIV Monitor ST.


      CODIGO                                    PANEL                                 % de           % de
        Lab                                                                       concordancia   concordancia
                        AAS7     ABS7      ACS7      ADS7     AES7      AFS7         (±0,2)         (±0,3)

         11              N        4,10      4,00     3,18       P        5,06         17             33
         14              N        3,67      3,70     3,29       N        4,71         83             83
         19              N        3,50      3,78     2,77       N        4,81         83             100
         25              N        4,07      4,03     3,31       N        4,97         33             67
         32              N        3,50      3,56     2,77       N        4,53         67             100
         35              N        3,72      3,70     3,37       N        4,93         67             83
         45              N        4,00      3,61     2,59       N        4,79         67             100
         53              N        3,46      3,48     2,70       N        4,62         67             83
         55              N        3,63      3,83     2,93       N        4,95         83             83
         56              N        3,65      3,83     3,16       N        4,55         83             83
         62              N        3,73      4,00     3,18       N        4,74         67             83
         70              N        3,86      3,75     3,18       P        5,16         50             50
         74              N        3,64      3,67     2,98       P        4,69         83             83
         80              N        3,77      4,31     0,00       N        2,42         50             50
         85              N        3,99      3,73     2,80       P        4,77         67             83
         95              N        4,01      3,47     2,91       N        4,61         67             83

     Promedio                     3,77      3,78     2,82                4,64         65             78

En intervalo 0,2 (%)   16(100)   8 (50)    9 (56)    7 (44)   12 (75)   10 (63)

En intervalo 0,3 (%)   16(100)   14 (88)   14 (88)   8 (50)   12 (75)   11 (69)


  P = positivo (valor cualitativo)
  N = negativo (valor no detectable por la técnica)




                                                                                                                  6
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 Tabla 3. Resultados en log10 y análisis de concordancia en los intervalos ±0,2 y ±0,3 log10, de los
 laboratorios que utilizan Amplicor HIV Monitor US.

                                                                                        % de           % de
      CODIGO                                     PANEL
                                                                                    concordancia   concordancia
        Lab
                        AAS7      ABS7      ACS7       ADS7     AES7      AFS7         (±0,2)         (±0,3)

         15               N        4,25      4,29      3,53      2,09      5,03         50             50
         18               N        3,72      3,67      3,06      2,16      4,63         67             100
         20               N        3,93      4,00      3,39      2,04      5,02         83             100
         23               N        4,20      4,13      2,97      2,45      5,00         50             67
         26               N        3,82      3,99      3,23      2,56      4,95         83             83
         27               N        4,09      3,93      3,37      2,36      5,00         67             100
         33               N        3,81      3,99      3,15      2,31      4,88         83             100
         37               N        4,11      3,99      3,44      2,61      5,00         50             67
         40               N        3,76      3,53      2,94      2,23      4,64         67             83
         42               N        4,05      3,80      3,10      2,36      4,99         83             100
         43               N        3,93      4,00      3,22      2,52      4,95         83             83
         44               N        3,52      3,63      2,94      0,00      4,68         50             67
         48               N        4,21      4,34      3,24      2,67      5,03         50             50
         49               N        3,95      4,04      3,15      2,29      5,03         100            100
         50               N        3,73      3,62      2,88      2,09      4,70         67             100
         51               N        4,05      4,26      3,49      2,53      4,97         50             50
         60               N        3,79      3,78      2,96      2,20      4,68         100            100
         63               N        3,62      3,64      2,93      1,73      4,62         33             83
         72               N        3,57      3,62      3,06      1,99      4,78         67             83
         75               N        4,03      4,06      3,49      2,31      5,10         50             83
         78               N        3,79      3,62      2,86      1,76      4,54         33             67
         79               N        4,16      4,10      3,31      2,41      4,97         50             83
         83               N        3,34      3,20      2,28      0,00      4,27         17             17
         86               N        3,90      4,15      3,00      2,48      4,91         67             83
         87               N        3,93      4,04      3,05      2,17      4,92         100            100
         90               N        3,93      3,84      3,11      2,13      4,80         100            100

     Promedio                      3,89      3,89      3,12      2,09      4,85         65             81

En intervalo 0,2 (%)   26 (100)   17 (65)   12 (46)   17 (65)   10 (39)   20 (77)

En intervalo 0,3 (%)   26 (100)   20 (77)   21 (81)   21 (81)   14 (54)   24 (92)


  N = negativo (valor no detectable por la técnica)




                                                                                                                   7
                                   7ª edición. Programa Nacional de Control de Calidad de Carga Viral del VIH-1
                                                                                                 Versión Anual
                                                                                              Septiembre 2005




 Tabla 4. Resultados en log10 y análisis de aceptabilidad en los intervalos ±0,2 y ±0,3 log10, de los
 laboratorios que utilizan Cobas Taqman.

                                                PANEL                             Porcentaje de   Porcentaje de
      CODIGO
        Lab                                                                       concordancia    concordancia
                       AAS7      ABS7      ACS7       ADS7     AES7     AFS7         (±0,2)          (±0,3)

         12              N        3,54      3,65      3,04     2,09      4,78         100             100
         17              N        3,73      3,66      3,01     2,18      4,82         100             100
         41              N        3,93      4,01      3,18     2,56      4,98          67              83
         54              N        3,68      3,72      3,06     1,79      4,96          83              83
         59              N        3,78      3,82      3,08     2,11      5,10          83             100
         92              N        3,78      3,83      3,13     2,33      4,64          83             100

     Promedio                     3,74      3,78      3,08     2,18      4,88          86              94

En intervalo 0,2 (%)   6 (100)   6 (100)   5 (83)    6 (100)   4 (67)   4 (67)

En intervalo 0,3 (%)   6 (100)   6 (100)   6 (100)   6 (100)   4 (67)   6 (100)


  N = negativo (valor no detectable por la técnica)

 Tabla 5. Resultados en log10 y análisis de concordancia en los intervalos ±0,2 y ±0,3 log10, de los
 laboratorios que utilizan Versant bDNA 3.0.

                                                PANEL                                 % de            % de
      CODIGO
        Lab                                                                       concordancia    concordancia
                       AAS7      ABS7      ACS7       ADS7     AES7     AFS7         (±0,2)          (±0,3)

         13              N        3,71      3,63      3,00     1,98      4,63         100             100
         22              N        3,69      3,70      3,03     1,70      4,53          83              83
         47              N        3,74      3,73      2,94     2,21      4,64         100             100
         57              N        3,80      3,68      2,97     2,34      4,67         100             100
         89              N        3,77      3,76      3,03     2,34      4,68         100             100
         93              N        3,79      3,73      3,09     2,28      4,82         100             100
         94             2,53      3,81      3,82      3,09     2,22      4,73          83              83

     Promedio                     3,76      3,72      3,02     2,15      4,67          95              95

En intervalo 0,2 (%)   6 (86)    7 (100)   7 (100)   7 (100)   6 (86)   7 (100)

En intervalo 0,3 (%)   6 (86)    7 (100)   7 (100)   7 (100)   6 (86)   7 (100)

  N = negativo (valor no detectable por la técnica)


 Tabla 6. Resultados en log10 de los dos laboratorios que utilizan Nuclisens EasyQ system.



                                                PANEL
      CODIGO
        Lab
                       AAS7      ABS7      ACS7       ADS7     AES7     AFS7
         38              N        4,28      4,30      3,08     2,41      4,71
         82              N        4,11      3,90      2,92     2,04      5,18
  N = negativo (valor no detectable por la técnica)


                                                                                                                  8
                                 7ª edición. Programa Nacional de Control de Calidad de Carga Viral del VIH-1
                                                                                               Versión Anual
                                                                                            Septiembre 2005




Tabla 7. Resultados en log10 del laboratorio que utilizan LCX HIV RNA US.



      CODIGO                                   PANEL
        Lab
                       AAS7     ABS7      ACS7     ADS7       AES7    AFS7
        24              N       3,94      3,97     3,23       2,32    4,90


  N = negativo (valor no detectable por la técnica)

  Tabla 8. Análisis de resultados para cada estándar y técnica; promedio, dispersión (D.E.) y
  porcentaje de laboratorios en los márgenes de ±0,2 log y ±0,3 log.

        TÉCNICA         Panel      Promedio            D.E.      % en intervalo ±0,2   % en intervalo ±0,3

                        AAS7       (Negativo)                           100                   100
                         ABS7          3,77            0,21              50                    88
     Amplicor HIV1      ACS7           3,78            0,22              56                    88
      Monitor ST
                        ADS7           2,82*           0,79              44                    50
                         AES7          VC**                              75                    75
                         AFS7          4,64            0,62              63                    69
                        AAS7       (Negativo)                           100                   100
                         ABS7          3,89            0,23              65                    77
     Amplicor HIV1      ACS7           3,89            0,27              46                    81
      Monitor US
                        ADS7           3,12            0,26              65                    81
                         AES7          2,09            0,66              39                    54
                         AFS7          4,85            0,20              77                    92
                        AAS7       (Negativo)                           100                   100
                         ABS7          3,74            0,13             100                   100
   COBAS Tagman HIV1    ACS7           3,78            0,14              83                   100
          Test
                        ADS7           3,08            0,06             100                   100
                         AES7          2,18            0,26              67                    67
                         AFS7          4,88            0,16              67                   100
                        AAS7      (Negativo)***                          86                    86
                         ABS7          3,76            0,05             100                   100
                        ACS7           3,72            0,06             100                   100
    Versant bDNA3.0
                        ADS7           3,02            0,06             100                   100
                         AES7          2,15            0,24              86                    86
                         AFS7          4,67            0,09             100                   100


        (*) Se detecta un falso negativo.
        (**) VC= valor cualitativo. Se detectan 4 falsos positivos
        (***) Se detecta un falso positivo.




                                                                                                                9
                                      7ª edición. Programa Nacional de Control de Calidad de Carga Viral del VIH-1
                                                                                                    Versión Anual
                                                                                                 Septiembre 2005




Gráfico 1. Porcentaje de laboratorios dentro de los márgenes con los métodos utilizados.

para ±0,2 log10
        100   100   100                    100   100                     100               100   100                                       100
 100
                          86                                                                                          86
                                                                   83
                                                                                                       75                       77
  75                                  65                                              65                         67                  67
                                                                                                                           63
                                                       56
                               50
                                                              46
  50                                                                             44
                                                                                                            39



  25


   0
              AAS7                    ABS7                    ACS7                    ADS7                  AES7                AFS7

                                      Amplicor ST           Amplicor US          COBAS Taqman          Versant bDNA


para ±0,3 log10
        100   100   100                    100   100               100   100               100   100                                 100   100
 100                                                                                                                            92
                          86   88                      88                                                             86
                                                              81                      81
                                      77                                                               75
  75                                                                                                             67        69


                                                                                                            54
                                                                                 50
  50


  25


   0
              AAS7                    ABS7                    ACS7                    ADS7                  AES7                AFS7

                                      Amplicor ST       Amplicor US            COBAS Taqman        Versant bDNA




2.- Análisis de la variabilidad intralaboratorio (estándares ABS7 y ACS7).

Los laboratorios que utilizaron las técnicas de Cobas Taqman y Versant bDNA 3.0
obtuvieron los coeficientes de variación más bajos para ambos estándares, mostrando
una mayor capacidad para reproducir resultados ante una muestra de igual
concentración (tabla 9).

 Tabla 9. Coeficiente de variación por técnica.

        Estándares
                                    Amplicor ST             Amplicor US          COBAS TaqMan          VERSANT bDNA
       ABS7 y ACS7
Promedio                               3,77                    3,89                    3,76                  3,74
Desviación estándar                    0,14                    0,08                    0,05                  0,03
Coef. de Variación                    3,57%                   2,08%                   1,21%                 0,82%


                                                                                                                                             10
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COMENTARIOS.

1.- Análisis de la variabilidad interlaboratorio.

La variabilidad observada dentro de una misma técnica en las determinaciones para
un mismo estándar debe tenerse en consideración, ya que variaciones superiores a 0,5
log10 se estiman clínicamente relevantes de cara a las decisiones terapéuticas2, 3, 4.

En conjunto, el porcentaje de concordancia dentro del intervalo ±0,2 es diferente
según la técnica empleada (65% para los que utilizaron Amplicor ST y Amplicor US,
86% para Cobas Taqman y 95% para Versant bDNA), mejorando cuando el intervalo es
±0,3 salvo en los que utilizan Versant bDNA que se mantienen en el 95% (ver tablas 2,
3, 4 y 5).

El estándar AAS7 (verdadero negativo) ha sido utilizado como control de
especificidad, habiéndose obtenido buenos resultados por todos los usuarios de las
diferentes técnicas, salvo un falso positivo que se detectó en un usuario de Versant
bDNA (ver tabla 5).

Para el estándar AES7 (positivo débil; 123 cop/ml) se detectan 4 falsos positivos en
usuarios de Amplicor ST (límite de detección 500 cop/ml), los que utilizaron Amplicor
US tuvieron una concordancia de 39% en el intervalo ±0,2 y de 54% en el intervalo
±0,3; los usuarios de Cobas Taqman tuvieron un 67% en los dos intervalos y los de
Versant bDNA un 86% en ambos intervalos (ver tablas 2, 3, 4, 5 y 8). Comparado con
anteriores versiones del programa, los usuarios de Amplicor US siguen teniendo los
porcentajes de concordancia más baja para este estándar.

Con los estándares ADS7 (812 cop/ml) y AFS7 (50.623 cop/ml) se observa que los
porcentajes de correlación más bajos para el intervalo ±0,2 (44% y 63%,
respectivamente) se dan en los usuarios de Amplicor ST, mejorando muy poco en el
intervalo ±0,3 (50% y 69%, respectivamente); entre los usuarios de Amplicor US los
porcentajes de correlación son sensiblemente mejorados (65% y 77% para ±0,2; 81% y
92% para ±0,3); entre los usuarios de Cobas Taqman se alcanza el 100% en ambos
intervalos salvo para el estándar AFS7 en el intervalo ±0,2 (67%); y los usuarios de
Versant bDNA obtienen el 100% en todas las situaciones (ver tabla 8).

En el gráfico 1 se resumen todos los datos discutidos en relación al porcentaje de
correlación según la técnica utilizada y el intervalo aplicado.

En conjunto, los resultados dentro de los intervalos considerados óptimos, deberían
ser mejorados de cara a sucesivas ediciones, fundamentalmente, por los laboratorios
que utilizan Amplicor ST y en menor medida por los que utilizan Amplicor US.

La precisión en la manipulación y/o la calibración de los equipos5, así como la
concentración en los límites podrían ser las razones que pueden explicar las
diferencias detectadas.


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2.- Análisis de la variedad intralaboratorio.

Los estándares ABS7 y ACS7, que contienen igual número de copias, han permitido
valorar la correlación intralaboratorio, detectándose la peor correlación con los
usuarios de Amplicor ST (3,57%). Sin embargo, se ha observado una clara mejora en la
correlación obtenida para Amplicor US (2,08%), Cobas Taqman (1,21%) y Versant bDNA
(0,82%) respecto a la versión anterior del programa de calidad.


CONCLUSIONES

En comparación en la sexta versión, la variabilidad observada se mantiene alta, aún
empleando intervalos de ±0,3 log10.

El entrenamiento específico del personal de laboratorio y la observancia en el
cumplimiento de los protocolos para el manejo de las diferentes técnicas, debe
considerarse una prioridad.

Referencias


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3. Gerondelis P, RH Archer, C Palaniappan, RC Reichman et al. The P236L Delavirdine-
resistant human immunodeficiency virus tipe 1 mutant is replication defective and
demonstrates alterations in both RNA 5’-end and DNA 3’-end-directed Rnase H activities. J
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