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INCORPORACIÓN DE b CICLODEXTRINA MODIFICADA CON CLORURO CIANÚRICO A CELULOSA MODIFICADA CELOFÁN

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INCORPORACIÓN DE b CICLODEXTRINA MODIFICADA CON CLORURO CIANÚRICO A CELULOSA MODIFICADA CELOFÁN Powered By Docstoc
					INCORPORACIÓN DE CICLODEXTRINA MODIFICADA CON CLORURO CIANÚRICO A CELULOSA MODIFICADA (CELOFÁN)

WENDY CAROLINA RUIZ MELÉNDEZ YONY ANDRÉS BENITEZ RESTREPO

UNIVERSIDAD PONTIFICIA BOLIVARIANA ESCUELA DE INGENIERÍAS FACULTAD DE INGENIERÍA QUÍMICA MEDELLÍN 2007

1

INCORPORACIÓN DE CICLODEXTRINA MODIFICADA CON CLORURO CIANÚRICO A CELULOSA MODIFICADA (CELOFÁN)

WENDY CAROLINA RUIZ MELÉNDEZ YONY ANDRÉS BENITEZ RESTREPO

Trabajo de grado para optar al título de Ingeniero Químico

Director DAVID ESTEBAN SUÁREZ GÓMEZ Ingeniero Químico Mg. Sc

UNIVERSIDAD PONTIFICIA BOLIVARIANA ESCUELA DE INGENIERÍAS FACULTAD DE INGENIERÍA QUÍMICA MEDELLÍN 2007

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Nota de aceptación: __________________________________ __________________________________ __________________________________ __________________________________ __________________________________ __________________________________

__________________________________ Firma del presidente del jurado

__________________________________ Firma del jurado

__________________________________ Firma del jurado

Medellín, 2 de Mayo de 2007

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DEDICATORIA

A mis padres por ser la fortaleza de mi vida, a mis hermanas Alessandra y Paola que aunque estén lejos siempre estaremos unidas, a Cesar que siempre ha estado a mi lado en momentos difíciles y a Dios por permitirme ser quien soy ahora. A mis padres y amigos (G7) quienes han estado a mi lado apoyándome y a Dios quien me da la fortaleza para enfrentar todos los obstáculos que me pone la vida y las ganas para despertarme cada día y ver que las cosas pueden ser mejor.

4

AGRADECIMIENTOS

A David Suárez, Ingeniero Químico, Mg. Sc, Director de Tesis, por su gran ayuda y seguimiento para la realización de este proyecto de grado. A Wacker Chemie GmbgH, por la donación de las ciclodextrinas A Proes Ltda, por la donación del bloqueador UV A Diana Vanegas, Ingeniera Química, por su colaboración en el Laboratorio de Análisis Instrumental A Cesar López por su inmensa colaboración A Grupo de Investigación de Pulpa y Papel

5

CONTENIDO

pág.

INTRODUCCIÓN

14

1. CICLODEXTRINAS

15

1.1 HISTORIA

16

1.2 PROCEDENCIA

18

1.2.1 Almidón

18

1.2.2 Degradación del almidón

19

1.3 CICLODEXTRINAS NATIVAS

19

1.4 CICLODEXTRINAS MODIFICADAS 1.4.1 Monoclorotriazinil - - ciclodextrina

21

22

1.5 APLICACIONES

23

1.5.1 Alimentos

23

1.5.2 Farmacia y medicina

24

6

1.5.3 Cosméticos y cuidado personal

25

1.5.4 Pulpa y papel

25

1.5.5 Productos y procesos químicos

26

1.6 COMPLEJOS DE INCLUSIÓN

26

1.6.1 Estequiometría de los complejos de Inclusión

28

1.6.2 Métodos para la detección de la formación de complejos de inclusión

29

2. BLOQUEADORES UV

35

2.1 TIPOS DE BLOQUEADORES

35

2.2 INCIDENCIA DE LAS CICLODEXTRINAS EN LOS AGENTES DE BLOQUEO UV 2.3 OCTILMETOXICINAMATO

37

39

3. CELOFÁN

41

3.1 HISTORIA

41

3.2 PROCEDENCIA

42

3.3 USOS Y PROPIEDADES

43

7

4. MATERIALES Y MÉTODOS

46

4.1 REACTIVOS

46

4.2 PROCEDIMIENTOS 4.2.1 Modificación de celofán con CAVASOL ® W7 MCT

47 47

4.2.2 Formación de complejos en solución con ciclodextrinas

48

4.2. 3 Impregnación de celofán con OMC

48

4.3 MÉTODOS DE EVALUACIÓN 4.3.1 Espectrofotometría UV – VIS

49

49

5. RESULTADOS Y ANÁLISIS

50

5.1 Modificación de celofán con CAVASOL ® W7 MCT

50

5.2 OPTIMIZACIÓN DE PARAMETROS

53

5.3 FORMACIÓN DE COMPLEJOS CON CICLODEXTRINAS

63

5.4 CICLODEXTRINAS FIJAS AL CELOFÁN

66

6. CONCLUSIONES

70

BIBLIOGRAFÍA 8

72

LISTA DE TABLAS

pág.

Tabla 1. Volumen de la cavidad de las ciclodextrinas Tabla 2. Formación de complejos 1:1 entre ciclodextrinas y otros compuestos Tabla 3. Aplicaciones de las ciclodextrinas en alimentos Tabla 4. Aplicaciones de las ciclodextrinas en Farmacia y Medicina Tabla 5. Aplicaciones de las ciclodextrinas en Cosméticos y cuidado Personal Tabla 6. Categorías de Protección solar Tabla 7. Propiedades del Octilmetoxicinamato Tabla 8. Pruebas características del celofán Tabla 9. Datos de picos con su respectiva longitud de onda del espectro UV-VIS del celofán Tabla 10. Datos de picos con su respectiva longitud de onda del espectro UV-VIS del celofán modificado Tabla 11. Datos de picos con su respectiva longitud de onda del espectro UV-VIS del celofán modificado con [ ]CD :5% y trxn: 5 min Tabla 12. Datos de picos con su respectiva longitud de onda del espectro UV-VIS del celofán modificado con [ ]CD :5% y trxn: 10min Tabla 13. Datos de picos con su respectiva longitud de onda del espectro UV-VIS del celofán modificado con [ ]CD :10% y trxn: 5 min Tabla 14. Datos de picos con su respectiva longitud de onda del espectro UV-VIS del celofán modificado con [ ]CD :10% y trxn: 10 min

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21 23 25

25 37 39 44

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Tabla 15. Datos de picos con su respectiva longitud de onda del espectro UV-VIS del celofán modificado con [ ]CD :15% y trxn: 5 min Tabla 16. Datos de picos con su respectiva longitud de onda del espectro UV-VIS del celofán modificado con [ ]CD :15% y trxn: 10min Tabla 17. Datos de picos con su respectiva longitud de onda del espectro UV-VIS del OMC Tabla 18. Datos de picos con su respectiva longitud de onda del espectro UV-VIS del complejo CAVAMAX / OMC Tabla 19. Datos de picos con su respectiva longitud de onda del espectro UV-VIS del complejo CAVASOL / OMC Tabla 20. Datos de picos con su respectiva longitud de onda del espectro UV-VIS del celofán sin modificar en solución de OMC Tabla 21. Datos de picos con su respectiva longitud de onda del espectro UV-VIS del celofán modificado en solución de OMC

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LISTA DE FIGURAS

pág.

Figura 1. Representación de una ciclodextrina, indicando las regiones hidrofóbica (cavidad) e hidrofílica (exterior) Figura 2. Estructura de la amilosa (n>1000) Figura 3. Estructura de la amilopectina Figura 4. -Ciclodextrina Figura 5. -Ciclodextrina Figura 6. -Ciclodextrina Figura 7. Dimensiones moleculares de las ciclodextrinas Figura 8. Estructura Química de -CD-W7 MCT Figura 9. Formación de un complejo de inclusión 1:1 entre -CD y benceno en medio acuoso. Figura 10. Estructura de la celulosa Figura 11. Proceso de la viscosa Figura 12. Esquema de reacción de CAVASOL ® W7 MCT con fibras que poseen grupos Hidroxilos Figura 13. Esquema de un complejo de inclusión anfitrión- huésped injertado en la superficie del celofán Figura 14. Espectrofotómetro Shimadzu Figura 15. Espectro de absorción UV-VIS del celofán. Figura 16. Espectro UV-VIS del celofán modificado con [ ] CD: 5%, trxn: 5 min, tsec: 5 min, Tsec: 110°C y [ ] NaOH: 2% 11

15

18 19 20 20 20 21 22

28 42 42

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48 49 52

54

Figura 17. Espectro UV-VIS del celofán modificado con [ ] CD: 5%, trxn: 10 min, tsec: 5 min, Tsec: 110°C y [ ] NaOH: 2% Figura 18. Espectro UV-VIS del celofán modificado con [ ] CD: 10%, trxn: 5 min, tsec: 5 min, Tsec: 110°C y [ ] NaOH: 2% Figura 19. Espectro UV-VIS del celofán modificado con [ ] CD: 10%, trxn: 10 min, tsec: 5 min, Tsec: 110°C y [ ] NaOH: 2% Figura 20. Espectro UV-VIS del celofán modificado con [ ] CD: 15%, trxn: 5 min, tsec: 5 min, Tsec: 110°C y [ ] NaOH: 2% Figura 21. Espectro UV-VIS del celofán modificado con [ ] CD: 15%, trxn: 10 min, tsec: 5 min, Tsec: 110°C y [ ] NaOH: 2% Figura 22. Espectro UV-VIS de: Celofán sin modificar; Celofán modificado [ ]CD :5% y trxn: 5min; Celofán modificado [ ]CD: 5% y trxn: 10min; Celofán modificado [ ]CD :10% y trxn: 5min; Celofán modificado [ ]CD :10% y trxn: 10min; Celofán modificado [ ]CD :15% y trxn: 5min; Celofán modificado [ ]CD :15% y trxn : 10min Figura 23. Espectro UV-VIS del octilmetoxicinamato Figura 24. Espectro UV-VIS del complejo CAVAMAX / OMC Figura 25. Espectro UV-VIS del complejo CAVASOL / OMC Figura 26. Espectro UV-VIS del celofán sin modificar en solución de OMC. Figura 27. Espectro UV-VIS del celofán modificado en solución de OMC

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RESUMEN

En el presente trabajo se busca modificar químicamente la superficie del celofán (celulosa regenerada) utilizando ciclodextrinas. Las ciclodextrinas son moléculas en forma de anillo, conformado por entre seis y ocho unidades de glucosa, unidas con enlaces -(1→4). El interior del anillo es hidrofóbico y en él pueden acomodarse perfectamente moléculas en el rango de tamaños entre el benceno y el antraceno. En contraste, el exterior de las ciclodextrinas es hidrofílico, lo que les da cierta solubilidad en solventes polares como el agua. Se utilizarán ciclodextrinas nativas (sin modificar) y modificadas, las cuales se fijan a la superficie del celofán por medio de moléculas de Cloruro cianúrico, que funcionan como puentes, permitiendo la formación de enlaces covalentes con las ciclodextrinas por una parte, y con la superficie del celofán por otra.

Este procedimiento permitirá utilizar las cavidades de las ciclodextrinas como agente de encapsulamiento molecular, lo cual dotará de nuevas propiedades al celofán, sobre todo al abrir la posibilidad de incorporar de manera estable compuestos que por su naturaleza no son afines a los grupos OH de la celulosa, como bloqueadores UV.

Palabras Clave: Ciclodextrinas, Celofán, Encapsulamiento molecular

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INTRODUCCIÓN

En los últimos años se ha hecho común la incorporación de una familia de compuestos macrocíclicos, las ciclodextrinas, durante el proceso de fabricación de una amplia variedad de productos, como detergentes, medicamentos, cosméticos, etc. Estos compuestos son productos de la degradación del almidón con la enzima glucosiltransferasa y debido a su forma de cono truncado, tienen la capacidad de formar complejos de inclusión que modifican las propiedades de la molécula encapsulada, ya sea estabilizándola, haciéndola más soluble o reactiva.

La posibilidad de incorporar estas moléculas a fibras celulósicas, por medio de enlaces químicos no ha sido ampliamente estudiada y promete resultados interesantes, que ameritan una exploración mas profunda. Es muy atrayente la posibilidad de incorporar las mismas a las superficies celulósicas y obtener grandes ventajas de estas. Como fijando complejos ciclodextrina-agente de bloqueo UV, mejorando así la capacidad de retención de dichos agentes en la superficie celulósica.

La aplicación de tales sistemas en el área de la celulosa y papel puede resultar en interesantes productos tales como los blanqueadores ópticos que son usados para aumentar la blancura final de plásticos y papeles industriales, el uso de polímeros termo-reactivos quienes fijan la estereoselectividad del papel y por ultimo, la inclusión de bloqueadores UV a el celofán que en éste caso es el objeto de nuestro estudio.

Los bloqueadores UV son notablemente utilizados en el campo cosmético para protección solar de la piel pero aún no se ha comprobado la existencia de éste en celulosa modificada (celofán) y las posibles aplicaciones que ésta membrana pueda tener en un futuro con ésta característica protectora. El celofán posee características como semipermeabilidad a la humedad y transparencia y si le adicionamos otra como la protección UV, se le podría dar un nuevo aire a su uso como material alternativo para cubrir alimentos y como película protectora en general.

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1. CICLODEXTRINAS

Las ciclodextrinas son macromoléculas formadas por distinto número de residuos de D (+) glucopiranosa unidos mediante enlaces (1-4). Las más utilizadas son las ,  y  -CD que contienen 6, 7 y 8 moléculas de glucopiranosa respectivamente. Tienen aspecto de cono truncado debido a la disposición espacial característica de los distintos grupos funcionales de las unidades de glucosa. Como consecuencia de ésta conformación, todos los grupos hidroxilo secundarios (correspondientes a los átomos de carbono C2 y C3 de las unidades de glucosa) se encuentran situados en uno de los bordes de la cavidad mientras que los hidroxilos primarios se encuentran en el otro extremo de la cavidad. La rotación de estos grupos –OH reduce el tamaño efectivo de la cavidad, haciendo que ésta posea un aspecto tronco-cónico más abierto hacia el lado de los hidroxilos secundarios, tal como se muestra en la figura 1.

Figura 1. Representación de una ciclodextrina, indicando las regiones hidrofóbica (cavidad) e hidrofílica (exterior)

Fuente: CONTRERAS, Héctor Jesús. Ciclodextrinas: naturaleza, propiedades y aplicaciones. México: s.n, 2000. p.14.

Esta disposición proporciona al interior de la cavidad un carácter apolar, mientras que los bordes del tronco de cono son polares debido a la presencia de los grupos –OH, lo que hace que estos compuestos sean muy hidrosolubles. La característica común de las ciclodextrinas es su capacidad de formar complejos de inclusión tanto en estado sólido como en solución1.
1

MUÑOZ, S; DEL CASTILLO, B y MARTÍN, M.A. Las ciclodextrinas: características y aplicaciones de la formación de complejos de inclusión. En: Ars Pharmaceutica. Vol 36, No. 2 (1995); p. 189

15

La idea de que una molécula pueda ¨envolver¨ a otra formando un nuevo compuesto (aducto, complejo de inclusión) no fue aceptada hasta que se demostró, mediante difracción de rayos X, la formación de un complejo de inclusión entre la -ciclodextrina y el yodo. Los huéspedes de carácter hidrofóbico se alojaran al interior de la cavidad a causa de las interacciones hidrofóbicas de tipo Van der Waals. Sin embargo también pueden establecerse interacciones con huéspedes polares gracias a la formación de puentes de hidrógeno con los –OH de los hidroxilos primarios.

1.1 HISTORIA

En 1891, Villiers publicó que de la digestión de 1 kilogramo de almidón con Bacillus amylobacter (que probablemente no era un cultivo puro), se podía aislar unos 3 gramos de una sustancia cristalina y determinó que su composición era (C6H10O5).3H2O. Villiers nombró a este producto ¨celulosina¨, debido a su supuesta similaridad con la celulosa, sobre todo en la relativa estabilidad para la hidrólisis ácida y porque no mostraba propiedades reductoras. Incluso en ese tiempo, él observó que se habían formado dos tipos diferentes de ¨celulosinas¨.

Entre los años 1903 y 1911, Schardinger estudiaba ciertas bacterias que sobrevivían al proceso de cocción y se creía eran responsables de ciertos casos de envenenamiento con alimentos. Observó que en la digestión de almidón con tales microorganismos se formaban pequeñas cantidades de dos productos cristalinos diferentes, que parecían ser idénticas a las celulosinas de Villiers; Schardinger continúo el estudio de estas dextrinas cristalizadas, con la esperanza de que arrojarían algo de luz sobre la síntesis y degradación del almidón. Tuvo éxito en aislar una bacteria, a la que le dio el nombre de Bacillus macerans, por su capacidad de macerar vegetales con alto contenido de almidón. Posteriormente, Schardinger identificó otra celulosina que se formaba de manera natural, y clasificó a los tres tipos conocidos como ,  y , siendo el primero en hacer una descripción detallada de la preparación y aislamiento de estos compuestos. Los datos reportados por Villiers para su primer tipo de celulosina concordaban con el tipo  descrito por Schardinger. Por lo anterior, los nuevos compuestos se conocieron por muchos años con el nombre de dextrinas de Schardinger.

En los experimentos de Schardinger el principal producto cristalino fue la llamada -dextrina, y el método mas simple para distinguir entre las dextrinas  y  fue la reacción con yodo. Schardinger observó que estas dextrinas cristalinas formaban aductos característicos con yodo en una solución yodo-yoduro, y reporto que del 25 al 30% del almidón podría convertirse en dextrinas cristalinas (con una gran 16

cantidad adicional de dextrinas amorfas). El complejo -dextrina / yodo en capas delgadas es azul cuando está húmedo y gris verdoso cuando está seco, mientras que el complejo -dextrina / yodo es parduzco (café rojizo) esté húmedo o seco. Puede decirse que Schardinger estableció los fundamentos de la química de estas dextrinas2.

Entre 1911 y 1935, Pringsheim en Alemania fue el investigador líder en el área, demostrando que estos azucares forman complejos de inclusión estables con varios compuestos en solución acuosa3.

En 1935, Freudenberg, Cramer y Plieninger inscriben la primera patente relativa a ciclodextrinas, la cual no es utilizada de forma importante hasta inicios de los sesenta, cuando se desarrollaron métodos de preparación a escala piloto de ciclodextrinas nativas4.

Para mediados de la década de los 70, las ciclodextrinas nativas ya habían sido estructural y químicamente caracterizadas y muchos más complejos habían sido estudiados. A partir de esta década también, los investigadores comienzan a sintetizar y probar ciclodextrinas modificadas con el fin de resolver problemas de toxicidad y solubilidad en agua.

En 1981, Joseph Pitha, estudia la mejora en la solubilidad de vitaminas insolubles mediante la modificación de ciclodextrinas nativas con grupos alquilo5.

De la década de los 80 en adelante las ciclodextrinas han sido modificadas con una amplia variedad de grupos, y gran cantidad de artículos técnicos y patentes referidos a la formación de complejos con ciclodextrinas modificadas han sido publicados principalmente en Estados Unidos, Hungría, Alemania y Francia.

2

CONTRERAS, Héctor Jesús. Ciclodextrinas: naturaleza, propiedades y aplicaciones. México: s.n, 2000. p. 8. GIACOMOZZI, Dante E. Estudio del encapsulamiento molecular de blanqueadores ópticos en ciclodextrina nativa y su derivado monoclorotriazinil -ciclodextrina y de su incorporación a fibras celulósicas. Guadalajara, 2002. p. 6.
3 4

Ibid., p. 6. Ibid., p. 6.

5

17

1.2 PROCEDENCIA

1.2.1 Almidón Almidón es el nombre común de un carbohidrato complejo, inodoro e insípido, en forma de grano o polvo, que se encuentra en vegetales como maíz, papa, trigo, centeno, arroz, lenteja y chícharo. Los gránulos son virtualmente insolubles en agua fría y alcohol, pero se hinchan dramáticamente en agua caliente. Cuando la mezcla hierve por algún tiempo, del 15 al 25% del almidón se solubiliza en forma coloidal que al enfriarse se vuelve gelatinosa (¨retrodegradación¨). Esta porción se denomina ¨ almidón soluble ¨ y consiste básicamente de amilosa. El material restante (75 a 85%), es amilopectina, y permanece insoluble aun después de largos periodos de ebullición.

La amilosa es un polímero lineal de la glucosa con enlace glucosídico 1-4, con mas de 1000 unidades enlazadas cabeza-cola. La diferencia entre ésta y la celulosa estriba en la estereoquímica del enlace, ya que la amilosa tiene enlaces , mientras que los de la celulosa son . Esta sutil diferencia origina desigualdades físicas y químicas notables: el enlace  de la amilosa tuerce la cadena de polímero formando hélices de 6 a 8 unidades por vuelta, lo que aumenta los puentes de hidrógeno con el agua y, en consecuencia, la solubilidad [2]. Su estructura se muestra en la Figura 2.

Figura 2. Estructura de la amilosa (n>1000)

Fuente: CONTRERAS, Héctor Jesús. Ciclodextrinas: naturaleza, propiedades y aplicaciones. México: s.n, 2000. p.4.

A diferencia de la amilosa, la amilopectina es ramificada, ver Figura 3. En promedio, cada 20 o 25 unidades de glucosa hay una cadena lateral que se une con un enlace (1-6). Esto constituye una estructura ramificada, que como la amilosa, contiene solo un extremo reductor, esto es, un grupo OH anomérico libre.

18

Figura 3. Estructura de la amilopectina

Fuente: CONTRERAS, Héctor Jesús. Ciclodextrinas: propiedades y aplicaciones. México: s.n, 2000. p.5.

naturaleza,

1.2.2 Degradación del Almidón Al degradar parcialmente estos polímeros de glucosa, con enzimas (o con ácidos, calor o radiación ionizante), y en presencia de agua, se obtienen cadenas de menor longitud denominadas dextrinas. Las dextrinas son carbohidratos solubles, amorfos e higroscópicos. Se componen de una larga serie de cadenas de maltooligomeros, ya sean lineales o ramificadas, y pueden seguir reaccionando formando moléculas aun mas simples, para finalmente obtener maltotriosa, maltosa y glucosa6. El proceso de la degradación del almidón se puede describir de la siguiente manera:

Almidón  Dextrinas  Maltosa  Glu cosa
Si se degrada el almidón con la enzima glucosiltransferasa, el producto primario reacciona generando una molécula cíclica, la ciclodextrina.

1.3 CICLODEXTRINAS NATIVAS

Las ciclodextrinas nativas son productos directos de la degradación del almidón con la enzima glucosiltransferasa. Se pueden tener ciclodextrinas nativas de 6, 7, 8 y hasta nueve unidades de glucopiranosa en el anillo, sin embargo las más comunes son las 3 primeras (,  y  ciclodextrina, mostradas en las Figuras 4, 5 y

6

CONTRERAS, Héctor Jesús. Op.cit., p. 7.

19

6 respectivamente). En la Figura 7 se muestran sus dimensiones y en la Tabla 1 el volumen de su cavidad. En el caso de la -ciclodextrina con nueve unidades de glucopiranosa, se tiene que, si bien su mayor diámetro de cavidad es una ventaja, su estructura tiende a colapsarse, por lo cual es muy difícil que este tipo de ciclodextrinas formen complejos de inclusión7.

Figura 4. -Ciclodextrina

Figura 5. -Ciclodextrina

Figura 6. -Ciclodextrina

Fuente: CONTRERAS, Héctor Jesús. Ciclodextrinas: naturaleza, propiedades y aplicaciones. México: s.n, 2000. p.13.

SUÁREZ, David E. Formación y estudio de copolímeros de -Ciclodextrina-Epiclorhidrina e incorporación de estos a materiales lignocelulósicos. Guadalajara, 2002. p. 14.
7

20

Figura 7. Dimensiones moleculares de las ciclodextrinas

Fuente: CONTRERAS, Héctor Jesús. Encapsulamiento molecular de sustancias hidrofóbicas en derivados de amilasa y ciclodextrinas. México: s.n, 2000. p.6.

Tabla 1. Volumen de la cavidad de las ciclodextrinas

Fuente: CONTRERAS, Héctor Jesús. Encapsulamiento molecular de sustancias hidrofóbicas en derivados de amilasa y ciclodextrinas. México: s.n, 2000. p.6.

De acuerdo al diámetro de cavidad, las ciclodextrinas nativas pueden formar complejos 1:1 con las siguientes sustancias8: Tabla 2. Formación de complejos 1:1 entre ciclodextrinas y otros compuestos Tipo de ciclodextrina -ciclodextrina Compuesto Huésped  Metano  Etano  Propano     Ciclohexano Naftaleno Mentol Fenolftaleína

-Ciclodextrina

8

SUÁREZ, Op. cit.., p. 20.

21

-Ciclodextrina

  

Vitamina A Vitamina E Vitamina K3

1.4 CICLODEXTRINAS MODIFICADAS

Este tipo de ciclodextrinas son producidas generalmente a nivel de laboratorio y a muy pequeña escala. Se caracterizan por ser modificaciones químicas o enzimáticas de ciclodextrinas nativas, en las cuales se agrega una molécula que actúa como “extensión”, mediante una reacción con uno o más de los grupos hidroxilo en la parte superior o inferior de la molécula de ciclodextrina. El objeto de la modificación es otorgar a las ciclodextrinas nativas ciertas propiedades como mayor solubilidad y/o toxicidad.

Las ciclodextrinas modificadas pueden ser divididas en tres categorías dependiendo de sus grupos funcionales: hidrofílicas, hidrofóbicas y derivados ionizables. Los derivados hidrofílicos poseen una alta solubilidad en agua, mayor que la ciclodextrina nativa original y se obtienen por adición de un grupo hidrofílico como molécula por extensión. Debido a su baja toxicidad, han ganado terreno durante los últimos años en comparación con las ciclodextrinas nativas. Los derivados hidrofóbicos son usados principalmente en el campo de la liberación gradual de compuestos solubles en agua y péptidos. Los derivados aniónicos son utilizados para la formulación de complejos de inclusión de liberación controlada de moléculas poco solubles en agua. 1.4.1 Monoclorotriazinil - - ciclodextrina (-CD-W7 MCT) Este derivado de ciclodextrina fue desarrollado a mediados de la década de los noventa por la empresa alemana Wacker Chemie, con el fin de obtener una ciclodextrina capaz de unirse covalentemente a materiales lignocelulósicos mediante la reacción con los grupos hidroxilo presentes en este tipo de materiales, la cual mantuviera su capacidad de formación de complejos de inclusión con moléculas huésped. Con este fin se sustituyó uno de los cloros del cloruro cianúrico por un alcóxido (NaO), para hacer más reactivo el grupo que actúa como extensión de la -ciclodextrina. Luego, este grupo triazina altamente reactivo se fijó a la - ciclodextrina nativa (grado de sustitución 0.4), conformando la monoclorotriazinil--ciclodextrina, derivado de ciclodextrina capaz de formar un enlace covalente con los hidroxilos de las fibras en textiles o papel9,10. Su nombre
9

GIACOMOZZI, Op. cit., p. 13.

22

comercial es CAVASOL® W7 MCT y su estructura es mostrada en la siguiente figura: Figura 8. Estructura Química de -CD-W7 MCT

Fuente: CONTRERAS, Héctor Jesús. Ciclodextrinas: naturaleza, propiedades y aplicaciones. México: s.n, 2000. p.75.

1.5 APLICACIONES

Mediante la formación de complejos de inclusión, las ciclodextrinas pueden estabilizar, solubilizar, retener y liberar de manera controlada una gran variedad de compuestos, entre los que se incluyen gases, parafinas, alcoholes, ácidos carboxílicos, colorantes aromáticos, derivados del benceno y muchos otros. La formación de este complejo de inclusión, sin embargo, depende del tamaño, forma, y posición del sustituyente, así como de la hidrofobicidad de las moléculas huésped.

Entre las áreas más comunes de aplicación de las ciclodextrinas, se tienen:

1.5.1 Alimentos Los saborizantes, por lo general, son sustancias volátiles que se deterioran rápidamente. Con las CDs se puede aumentar la solubilidad de los saborizantes, con lo que se requiere una cantidad menor para obtener la misma respuesta que el sabor no complejado, además de encapsularlo y liberarlo de manera controlada. La mayoría de ellos (por ejemplo, los terpenoides y derivados de fenilpropano) forman complejos estables con las CDs, que en estado seco pueden durar largos

10

MOLDENHAUER, J.P. 1999. p. 5

Textile finishing with MCT-- cyclodextrin.

Wacker-Chemie, GmbH,

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periodos de tiempo a temperatura ambiente. También se usan las CDs para eliminar sabores, olores y componentes indeseados11,12 . Tabla 3. Aplicaciones de las ciclodextrinas en alimentos

Fuente: CONTRERAS, Héctor Jesús. Ciclodextrinas: naturaleza, propiedades y aplicaciones. México: s.n, 2000. p.56.

Con el uso del encapsulamiento molecular, los sabores como el mentol, tendrán una vida de aparador más larga, no solamente por la reducción en la volatilidad: si el mentol se compleja con ciclodextrina, no sublimará y no recristalizará en las paredes y la tapa de la botella donde se envasa. Las ciclodextrinas se utilizaron primero en Japón, donde se añadieron a la goma de mascar, caramelos y bebidas, para ayudar a liberar su sabor y, en el área del aseo personal, a reducir el mal olor bucal. Algunos compuestos, como por ejemplo muchas vitaminas, se destruyen con el calor. Los complejos con ciclodextrina pueden soportar esas energías destructoras. Esto significa que se necesita aplicar menos material, ya que habrá menos pérdidas durante el procesamiento térmico o cocimiento.

1.5.2 Farmacia y Medicina Los productos farmacéuticos constituyen la mayor parte del mercado de ciclodextrinas, un mercado pequeño pero lucrativo en los Estados Unidos y Europa. El uso farmacéutico mas común de las ciclodextrinas es aumentar la solubilidad, estabilidad y la biodisponibilidad de las moléculas de medicamento. De esta manera, las medicinas hidrofóbicas que son insolubles en el cuerpo humano altamente acuoso, se vuelven más solubles o estables cuando se añaden

11 12

CONTRERAS, Op. cit., p. 56.

HERNANDEZ, M.A. Ciclodextrinas: propiedades y usos en farmacia. En: Revista Salud Pública y Nutrición. Vol. 11 (2006); p. 1.

24

ciclodextrinas, por lo que pueden administrarse introduciéndolas dentro de éstas cápsulas moleculares. Entre los compuestos estudiados se encuentran: Piroxicam (antiinflamatorio)13 , clotrimazol 1%14 , ácido glicolico, utilizado para el tratamiento de pieles envejecidas15 , ácido nalidixico y ácido oxolinico, utilizados para combatir enfermedades bacterianas en las vías urinarias, piel y tracto respiratorio16, Penicilina V , Diclofenaco , Vitamina K3, entre otras. Tabla 4. Aplicaciones de las ciclodextrinas en Farmacia y Medicina

Fuente: CONTRERAS, Héctor Jesús. México: s.n, 2000. p.58.

Ciclodextrinas: naturaleza, propiedades y

aplicaciones.

1.5.3 Cosméticos y cuidado personal En las industrias de cosméticos y aseo personal, las ciclodextrinas se han usado ampliamente para la estabilización de fragancias o para la eliminación de
13

BASAN, H. et al. Quantitative determination of piroxicam in a new formulation (piroxicam -cyclodextrin) by derivative UV spectrophotometric method and HPLC. En: Journal of Pharmaceutical and Medical Analysis. Vol.26 (2001); p. 173.
14

BILENSOY, E et al. Mucoadhesive, Thermosensitive, Prolonged-Release Vaginal Gel for Clotrimazole: -- cyclodextrin complex. En: AAPS PharmScitec. Vol. 7, No. 2 (2006); p. 5.
15

DÍEZ, O y HERRÁEZ, M. Importancia de los sistemas de liberación prolongada en los preparados dermofarmacéuticos. [En línea]. Valencia: s.n,s.f.<http://portalfarma.com/pfarma/taxonomia/general/gp000023.nsf/voDocumentos/0A00ADE3 22E0A6A4C1256F2E005CFAE0/$File/20%20oct%20Nuevas%20orientaciones%20en%20e%20%20Octa.doc> [Consulta: Enero de 2007]
16

LEYVA, E et al. Estudio de los complejos de inclusión de ácido nalidíxico y ácido oxolínico con ciclodextrinas. En: Revista de la Sociedad Química de México. Vol. 48 ( 2004); p. 349-351

25

contaminaciones microbiológicas y agentes indeseados. También se han empleado en formulaciones para evitar el mal aliento, lociones, cremas, geles para combatir el acne y cremas antisolares. Un ejemplo de éstas es la incorporación de oxibenzona a la hidroxipropil--ciclodextrina la cual permite la formación de un reservorio sobre la superficie de la piel lo que incrementa la eficacia del filtro solar17.

Tabla 5. Aplicaciones de las ciclodextrinas en Cosméticos y cuidado personal

Fuente: CONTRERAS, Héctor Jesús. México: s.n, 2000. p.59.

Ciclodextrinas: naturaleza, propiedades y

aplicaciones.

1.5.4 Pulpa y Papel Utilizando el principio del encapsulamiento molecular, es posible atrapar partículas hidrofóbicas de tinta y eliminarlas de la pulpa con un simple lavado, por lo que las CDs podrían convertirse en materiales importantes para la etapa del destintado. En éste campo se ha intentado fijar Ciclodextrina modificada con cloruro cianúrico a las fibras de celulosa18, inclusión de complejos Blanqueadores ópticosCiclodextrinas19, y de polímeros termo-reactivos para modificar la estereoselectividad del papel20.

17

FELTON, L.A; WILEY, C.J and GODWIN, D.A. Influence of hydroxypropyl-beta-cyclodextrin on the transdermal permeation and skin accumulation of oxybenzone. En: Drug Development and Industrial Pharmacy. Vol. 28, No. 9 (2002); p. 1117-1124 18 CONTRERAS, Héctor Jesús et al. Modificación superficial de fibras celulósicas con derivados de ciclodextrina. [En línea]. Guadalajara: s.n,2001.<http://dmcyp.cucei.udg.mx/hecont/ciclodextrinas/AMIDIQ%202001.PDF> [Consulta: Octubre de 2006]
19

GIACOMOZZI, Op. cit., p. 13 SUÁREZ, Op. cit.., p. 122.

20

26

1.5.5 Productos y procesos químicos Las ciclodextrinas tienen un uso creciente en el desarrollo de diversos productos de la industria fotográfica y de impresión, industria de polímeros, adhesivos, textiles, fibras y papel, colorantes, detergentes. Por ejemplo, en la producción de papeles fotosensibles, en los cuales se aplica un recubrimiento basado en polímeros de ciclodextrina o en papeles en los cuales la ciclodextrina actúa como estabilizador de los colorantes. En el caso de la industria del plástico, polímeros de ciclodextrina –NCO son usados como agentes de entrecruzamiento21. 1.6 COMPLEJOS DE INCLUSIÓN

Los complejos de inclusión poseen la estructura característica de un aducto, en la cual uno de los compuestos incorpora y aloja espacialmente a otras moléculas. Estas moléculas huéspedes ocupan la cavidad sin afectar a la estructura de las moléculas que las incluyen. En la mayoría de los casos el tamaño y la forma de la cavidad no se modifican con la formación del complejo de inclusión, salvo una ligera deformación. Aunque las moléculas huésped no se modifican químicamente en un sentido estricto, tras la formación del complejo de inclusión, muchas de las propiedades físicas dependen fundamentalmente de las características de las moléculas que las incluyen22.

La formación de complejos con ciclodextrinas tiene como finalidad lograr la mejora de la solubilidad y de las características organolépticas de numerosos principios activos, así como la de facilitar la absorción y liberación de los mismos. Se ha demostrado que los complejos con ciclodextrinas en disolución son química y fotoquímicamente más estables que los correspondientes compuestos no incluidos23,24 .
21

Ibid., p. 22.

22

MUÑOZ, S. Formación de los complejos de Inclusión entre retinoides y ciclodextrinas: características, propiedades y ventajas analíticas. Madrid, 1994, 466 p.
23

LEÓN, A. et al. Complejos de inclusión de harmano con hidroxipropil-β-ciclodextrina: aspectos metodológicos relativos a su caracterización analítica. En: An. R. Acad. Nac. Farm. Vol. 70, No. 3 (2004); p. 681-693
24

PRAKASH, B. et al. Caracterización fisicoquímica de los complejos de hidroxietil-β-ciclodextrina y β-ciclodextrina de rifampicina. En: Ars Pharmaceutica. Vol.47. No. 1(2006); p. 37-59

27

En una solución acuosa, la cavidad de la ciclodextrina, levemente apolar es ocupada por moléculas de agua las cuales están desfavorecidas energéticamente (interacciones polar-apolar), y por lo tanto, pueden ser fácilmente desplazadas y sustituidas por moléculas “huésped” más adecuadas. La ciclodextrina disuelta es la molécula “anfitrión”, y la fuerza impulsora para la formación del complejo es la sustitución de moléculas de agua con alta entalpía que se encuentran al interior de la cavidad.

Las consecuencias inmediatas de la interacción entre un huésped poco soluble y la ciclodextrina en solución acuosa, son las siguientes:  La concentración del huésped en la fase disuelta se incrementa significativamente, mientras la concentración de ciclodextrina disuelta disminuye.  Las propiedades espectrales del huésped se ven alteradas.  La reactividad de la molécula acomplejada es modificada.  La difusión y volatilidad del huésped se reducen fuertemente.  El huésped inicialmente hidrofóbico, acomplejado se vuelve hidrofílico.

Y en el estado sólido: 

La sustancia acomplejada es molecularmente dispersa en una matriz de carbohidrato, formando un polvo microcristalino o amorfo.  La sustancia acomplejada es protegida de cualquier tipo de reacción, excepto por aquellas con los hidroxilos de la ciclodextrina o reacciones catalizadas por estos.  El complejo es hidrofílico, fácilmente humectable y soluble. 1.6.1 Estequiometría de los complejos de Inclusión25 La estequiometría de los complejos de inclusión depende de muchos factores, entre ellos:    Tipo de ciclodextrina Forma y tamaño de la molécula huésped Carácter hidrofílico / hidrofóbico de la molécula huésped

25

SUÁREZ, Op. cit.., p. 23.,.

28

En base a estos criterios, se puede decir que existen complejos de inclusión de los siguientes tipos:  Complejos de estequiometría 1:1: Es el caso más común de formación de complejos de inclusión. Están formados por una molécula huésped y una molécula anfitrión. Dentro de este tipo de complejos tenemos los complejos fenolftaleína / -ciclodextrina. Figura 9: Formación de un complejo de inclusión 1:1 entre -CD y benceno en medio acuoso (las circunferencias representan moléculas de agua).

 Complejos de estequiometría 1:2: En este tipo de complejos tenemos dos moléculas de ciclodextrina encapsulando una molécula huésped. Este tipo de complejos se obtiene cuando la molécula huésped es lineal, o posee 2 sitios activos para el encapsulamiento (moléculas simétricas).  Complejos de orden superior: Es el caso de moléculas huésped lineales, o con mas de un sitio activo capaz de entrar en la cavidad de las ciclodextrinas.

Mientras más larga es la molécula huésped, más ciclodextrinas pueden formar el complejo de inclusión, encontrándose complejos de orden superior con arreglos de ciclodextrinas tipo canal y caja.

Los complejos de inclusión formados pueden ser separados como sustancias cristalinas. Después de disolverlos, se establece un equilibrio entre las especies asociadas y disociadas, lo cual es expresado como una constante de estabilidad Ka. La asociación de la ciclodextrina (CD) y el huésped (D), y la disociación del complejo (CDD) es gobernado por un equilibrio termodinámico. 29

K1:1 CD + D Donde: K1:1 = CDD [CDD] [CD][D]

Es importante destacar que en muchos casos se requiere de un co-solvente para la formación del complejo de inclusión. Los alcoholes de pequeño tamaño son frecuentemente usados como cosolventes para disolver un huésped de pobre solubilidad en agua. Estos co-solventes son posteriormente retirados, junto con el agua, por evaporación o secado por congelación. Los productos sólo contienen trazas de alcohol.

1.6.2 Métodos para la detección de la formación de complejos de inclusión Como se ha dicho anteriormente, la capacidad de formar complejos de inclusión, ya sea en estado sólido o en solución, es la principal característica de las ciclodextrinas. La formación de los complejos de inclusión puede detectarse de modos muy diversos gracias a las modificaciones que se producen en las propiedades de la molécula huésped.  Métodos de detección de complejos sólidos  Difractometría de Rayos X Constituye la metodología mas apropiada para realizar el análisis de la estructura cristalina del complejo. Esta técnica no es útil en análisis de rutina debido a las dificultades que suele tener la preparación de la muestra y la infraestructura necesaria para realizar el análisis.  Resonancia Magnética Nuclear La espectroscopia de RMN aplicada a sólidos, es una técnica valiosa que permite el estudio de las propiedades dinámicas de los complejos de inclusión en estado sólido, a diferencia de la difractometría de rayos X que suministra información de las propiedades estáticas. En los espectros protónicos se busca algún desplazamiento en los picos de los hidrógenos (3) y (5) de la ciclodextrina26 y es
26

LEYVA, E. et al. Estudio de RMN de los complejos de fenoles halogenados con ciclodextrinas. En: Educación Química. Vol. 13, No. 2 (2002); p. 82-84

30

posible determinar si existe inclusión parcial o total de la molécula huésped en la ciclodextrina de acuerdo a si existe desplazamiento químico en ambos protones (inclusión total) o solo en H(3) ó H(5) (inclusión parcial).  Espectroscopia de Absorción Infrarroja En el espectro de absorción IR se pueden apreciar desplazamientos de aproximadamente 40 cm-1 en las bandas de absorción de las moléculas huésped tras la formación del complejo de inclusión27.

Se busca las bandas OH características de las ciclodextrinas, las cuales de existir el complejo, se verían desplazadas o su intensidad alterada. Sin embargo, el método puede tener el inconveniente de superposición de señales de la molécula huésped28.  Métodos Térmicos Cuando se produce la inclusión, el punto de fusión o ebullición de las moléculas huésped se desplaza a temperaturas mas elevadas, pudiendo desaparecer o bien quedar enmascarado en torno a la temperatura de descomposición de las ciclodextrinas. Los métodos térmicos más utilizados son: el estudio por calorimetría diferencial de sólidos (DSC), por análisis térmico diferencial (DTA), por termogravimetría (TG) y por termogravimetría diferencial (DTG).  Métodos de detección de complejos en solución  Métodos de difusión La formación de complejos con ciclodextrinas puede verificarse claramente mediante el empleo de una membrana de diálisis semipermeable, que permita la difusión selectiva a uno y otro lado de dicha membrana. Lo que se observa es un incremento notable en la concentración de sustrato en el lado donde se encuentra la solución de ciclodextrina, indicando la formación del complejo ya que el equilibrio de difusión es mas favorable al paso de la molécula que tiende a incluirse en la cavidad de la CD.
27

MUÑOZ, Op. cit., p. 101. GIACOMOZZI, Op. cit., p. 20.

28

31

 Métodos Cinéticos Las ciclodextrinas modifican la constante de velocidad de reacción. Si se representa el proceso de inclusión y de reacción con el siguiente esquema:

Sustrato  CD  Sustrato  CD  Pr oductos  CD
El incremento o el descenso de la velocidad de reacción, será indicativo de la formación del complejo de inclusión. Aplicando una metodología análoga a la de Michaelis- Menten, puede asimismo calcularse la constante de formación del complejo Ka.  Métodos Instrumentales Con el rápido y creciente desarrollo que las técnicas instrumentales han experimentado en los últimos años, éstas constituyen las metodologías mas utilizadas para la detección de los complejos de inclusión así como en el cálculo de las constantes de asociación de los mismos.  Espectroscopia de Absorción UV-VIS Es una de las técnicas instrumentales más utilizadas en la detección de complejos de inclusión con ciclodextrinas. Su utilidad reside en el hecho de que es una técnica versátil y de muy sencillo manejo, así como proporciona datos de gran fiabilidad en el calculo de las constantes de asociación de complejos con ciclodextrina.

Si existe formación de un complejo de inclusión estable con ciclodextrinas, se puede producir uno o más de los siguientes cambios:  Desplazamiento del máximo de absorbancia con respecto al compuesto puro, hacia una mayor longitud de onda (rojo), conocido como desplazamiento batocrómico  Desplazamiento del máximo de absorbancia con respecto al compuesto puro, hacia una menor longitud de onda (azul), conocido como desplazamiento hipsocrómico.  Aumento de la intensidad de absorción, conocido como efecto hipercrómico  Disminución de la intensidad de absorción, conocido como efecto hipocrómico. 32

El desplazamiento del máximo de absorción para el complejo, puede ser explicado por el apantallamiento de los electrones excitables y por los cromóforos en la cavidad de la ciclodextrina. Cuando el desplazamiento puede ser correlacionado con la concentración de ciclodextrina, incluso puede calcularse la estabilidad del complejo con la ecuación de Benesi-Hildebrand. 1 F F [CD] [Crf] K : : : : 1 1 [CD][Crf] K 1 [Crf]

=

+

cambio en la fluorescencia Concentración de ciclodextrina en solución. Concentración de agente cromóforo. Constante de asociación del complejo.

Uno de los inconvenientes de esta técnica es que comúnmente ocurre un aumento en el ancho de las bandas y corrimiento batocrómico de las señales.  Espectroscopia de Luminiscencia Es una técnica de gran utilidad debido fundamentalmente a su extrema sensibilidad, característica que la hace apropiada para estudiar el cambio conformacional que se producen en las moléculas al pasar del estado fundamental al excitado, así como para profundizar en la geometría de los complejos de inclusión.

La detección del complejo puede establecerse en función de los cambios espectrales observados tanto en el espectro de excitación como en el de emisión, en la mejora o incremento de la intensidad de luminiscencia, el rendimiento cuántico, así como las modificaciones cuantitativas acaecidas en los procesos de amortiguación de fluorescencia y transferencia de energía29.  Dicroísmo Circular Cuando una molécula huésped aquiral se incluye en la cavidad de la ciclodextrina, se puede apreciar un efecto Cotton inducido en las proximidades de los máximos de absorción como consecuencia del fenómeno de inclusión. El signo de la
29

MUÑOZ, Op. cit., p. 112.

33

actividad rotatoria o lo que es lo mismo el efecto Cotton inducido, depende de la relación espacial entre el centro de simetría y el cromóforo perturbado. La intensidad del efecto depende sin embargo de la rigidez del complejo formado.  Resonancia Magnética Nuclear protónica (H-RMN) Entre los métodos espectroscópicos, RMN es considerado el que provee de más información útil relativa a la geometría, forma de inclusión y características dinámicas (asociación-disociación) de los complejos. La técnica RMN detecta cambios en el desplazamiento químico y la constante de acoplamiento, tanto de anfitrión como huésped. Se presenta un indicio de la inclusión de compuestos en la cavidad de la ciclodextrina si se observa un deslazamiento químico en la señal de los hidrógenos H(3) y H(5) de las ciclodextrinas, en presencia de numerosos sustratos30.

Al igual que la RMN aplicada a sólidos, se puede determinar también la manera en que se encuentra el huésped alojado en la cavidad de la ciclodextrina si solo la señal H(3) sufre un desplazamiento en presencia de un sustrato, aquí se tiene una penetración parcial, mientras que si se presenta desplazamiento en la señal del H(5), es una penetración profunda de la molécula huésped en la cavidad .  Cromatografía Han sido ampliamente usadas en columnas cromatográficas debido a su capacidad de encapsular compuestos y separar mezclas racémicas y orientado principalmente a cromatografía de gases y a cromatografía liquida de alta presión (HPLC). Los complejos de inclusión se establecen al alterar los tiempos de retención, así cuando en cromatografía liquida se añaden ciclodextrinas a la fase móvil, estos tiempos se acortan dependiendo del valor de la constante de asociación del complejo.

30

Ibid., p. 123.

34

2. BLOQUEADORES UV

Los bloqueadores UV son sustancias químicas que al ser aplicadas evitan que los rayos ultravioleta penetren en la piel, reflejándola o absorbiéndola. Estos rayos UV se clasifican en tres tipos:



Rayos UVC (200 nm a 290 nm): son más cortos y más poderosos que todos los UV. La UVC es más probable que cause cáncer si llega a la piel. Afortunadamente, la mayoría de estos rayos son absorbidos por la capa de ozono en la atmósfera. Rayos UVB (290 nm a 320 nm): son menos dañinos que UVC, pero mayor cantidad de ellos llegan a la superficie de la tierra. Es la causa más común de quemaduras y cáncer de piel. Rayos UVA (320 nm a 400 nm): son los menos poderosos de los rayos ultravioleta, pero están presentes todo el año y pueden penetrar las nubes y las ventanas.





Son clasificados como “drogas” por la Food and Drug Administration (FDA) en los Estados Unidos y existen en varias presentaciones como: cremas, geles, lociones y aerosoles60.

2.1 TIPOS DE BLOQUEADORES

Existen dos tipos de protectores solares: orgánicos e inorgánicos (llamados también físicos).

Los protectores o bloqueadores solares orgánicos han sido los principales productos disponibles comercialmente por muchos años. El término orgánico significa que estos protectores están compuestos, entre otras cosas, de carbono e hidrógeno. Son compuestos sintéticos formados por moléculas relativamente complejas que son absorbidas en la piel en diferente grado61. Los ingredientes que se encuentran en los bloqueadores solares incluyen:

60
61

WELSH, O. El sol y sus efectos contra la piel. En: Ciencia UANL. Vol. 11, No. 1 (1999); p. 12. Ibid., p. 13.

35

Protectores de los rayos UVB 

PABA (260-313 nm): El ácido paramino benzóico fue inicialmente el más empleado pero debido a que con cierta frecuencia producía reacciones alérgicas, su empleo ha disminuido considerablemente. Cinamattos (280-320 nm): son los más usados en la actualidad. Poseen un amplio espectro, buena cosmética y sustantividad. Se suelen combinar con otros filtros solares. Salicilatos (280-320 nm): Absorbentes UVB más débiles. Se utilizan para incrementar la potencia de otros absorbentes UVB. Octocrileno: Relacionado químicamente con los cinamatos. fotoestable lo cual refuerza ésta propiedad en otros productos. Es



 

Protectores de los rayos UVA  

Benzofenonas: Entre ellas se encuentran la dioxibenzona (260-355 nm), sulisobenzona (260-360 nm) y oxibenzona (270-360 nm). Avobenzonas (320-400 nm): A éste tipo pertenece el Parsol 1789, el único que absorbe todos los UVA.



Derivados alcanforados: El nombre comercial es Mexoryl SX.



Absorbente UVA amplio de eficacia similar a la avobenzona.

Los bloqueadores físicos (inorgánicos) son partículas sólidas del protector solar. Los dos más utilizados son el oxido de zinc (ZnO) y el dióxido de Titanio (TiO2), que son opacos a los UV y transparentes a la luz visible. Lo ideal es la combinación de ambas sustancias pues se complementan en su efecto fotoprotector ya que el ZnO absorbe la radiación UV hasta los 380 nm mientras que el TiO2 absorbe predominantemente UVB y dispersa UVA en menor grado62.

62

CAMACHO, F. Antiguos y nuevos conceptos de la fotoprotección. En: Revista Internacional de Dermatología y Dermocosmética Clínica. Vol. 4, No. 7 (2001); p. 441-448

36

Aunque se conocen desde hace tiempo, no han prosperado hasta muy recientemente porque producían color blanco en la piel, que ha sido superado con el uso de partículas micronizadas transparentes.

Los bloqueadores solares son categorizados por la cantidad de protección que provean de la UVB, medida conocida como el "Factor de Protección Solar" o FPS. Los que tienen un índice mayor de FPS proveen mayor protección del sol. Es mejor usar protectores que ofrezcan un FPS mínimo de 1563. En 1999 la FDA desarrolló una propuesta de categorías de protección (ver Tabla 5). Tabla 6. Categorías de Protección solar
Categorías de protección solar FDA 1999 FPS De 2 a 12 De 12 a 30 De 30 en adelante Protección Mínima Moderada Alta

Fuente: VITALE, M.A. Fotoprotección: conceptos básicos y actualización. En: Revista Peruana de Dermatología. Vol. 12, No. 2 (2002); p. 3.

El establecimiento de categorías de protección continuará en revisión hasta que pueda categorizarse una amplia protección, que involucre las radiaciones UVB y UVA64.

2.2 INCIDENCIA DE LAS CICLODEXTRINAS EN LOS AGENTES DE BLOQUEO UV

En los últimos tiempos, debido al aumento de cáncer de piel ha surgido la necesidad de formular sistemas de protección eficaces frente a las radiaciones solares con el fin de minimizar los efectos negativos de las mismas. Un problema asociado al uso de filtros solares como fotoprotectores, es su penetración en la piel generando la degradación tóxica de productos y provocando irritación. Por lo tanto, hay una necesidad para desarrollar nuevos sistemas los cuales permitan alcanzar la penetración reducida de los productos
63

Disponible en Internet: <http://fromyourdoctor.com/resources/files/Content/Derm/Handouts/proteccionsolar.pdf>
64

VITALE, M.A. Fotoprotección: conceptos básicos y actualización. En: Revista Peruana de Dermatología. Vol. 12, No. 2 (2002); p. 1-8

37

químicos en la piel. Esto podría minimizarse usando ciclodextrinas como medio de inclusión.

Las ciclodextrinas, a pesar de disponer de una envoltura de naturaleza hidrofílica la cual debería dificultar normalmente su paso a través de la piel, son capaces de atravesar la piel en cantidades apreciables. Vollmer y colaboradores demuestran la penetración de hidroxipropil--ciclodextrina y su localización en cantidades importantes a nivel del estrato córneo. Así, esta ciclodextrina parece dispersarse tanto en las zonas lipofílicas del estrato córneo como en las hidrofílicas de la epidermis65. Otro estudio investigado fue el efecto de la hidroxipropil--ciclodextrina (HP- CD) en la penetración in vitro en la piel del agente protector butylmethoxydibenzoylmethane (BM-DBM)66 el cual se ha demostrado que experimenta una fotodegradación marcada y produce radicales libres bajo la irradiación solar UV y, como una consecuencia, inflige en el daño al ADN al contacto con los tejidos vivos de la piel (la epidermis y la dermis) después de la penetración percutanea. Se demostró que el complejo BM-DBM / HP- -CD conduce a la retención reducida en la epidermis de el agente protector y éste contacto limitado del filtro UV con el tejido viable de la piel, reduce al mínimo los efectos tóxicos que éste trae consigo.

De igual forma muchos complejos de ciclodextrinas con agentes protectores UV han sido usados para aumentar la solubilidad y fotoestabilidad de éstos67,68.El complejo ácido retinoico/ --ciclodextrina incorporado a una crema base o hidrogel mejora su eficacia y tolerabilidad en el tratamiento del acné si lo comparamos con el vehículo control.

65

DÍEZ, O y HERRÁEZ, M. Op. cit., p. 3.

66

SIMEONI, S; SCALIA, S and BENSON, H.A. Influence of cyclodextrins on in vitro human skin absorption of the sunscreen, butyl-methoxydibenzoylmethane. En: International Journal of Pharmaceutical. Vol. 280, No. 1 (2004); p. 163-171
67

CHISVERT, A; PASCUAL, M.C. and SALVADOR, A. Determination of the UV filters worldwide authorised in sunscreens by high-performance liquid chromatography. Use of cyclodextrins as mobile phase modifier. En: Journal of Chromatography. Vol. 921 (2001); p. 207-215
68

SCALIA, S. et al. Comparative studies of the influence of cyclodextrins on the stability of the sunscreen agent, 2-ethylhexyl-p-methoxycinnamate. En: Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis. Vol. 30 (2002); p. 1181-1189

38

2.3 OCTILMETOXICINAMATO

El octilmetoxicinamato (OMC) es un filtro solar de origen orgánico que tiene un máximo de absorción en el rango UVB cubriendo también parte del UVA; tiene compatibilidad con la mayoría de ingredientes cosméticos, no fototóxico, no sensibilizante y actúa contra los efectos indeseados de las radiaciones solares. Fue desarrollado en los años 1950 y ha sido uno de los protectores solares más extensamente usado durante décadas69. En la literatura puede aparecer de varias formas: 2-Etilexil-4-metoxicinamato, Escalol 557, Parsol MCX o Parsol MOX y entre sus aplicaciones más importantes se encuentran: protectores solares, cosméticos, protectores labiales, cremas hidratantes entre otras. En la Tabla 6 se muestran su estructura química y alguna de sus propiedades.

La Comisión de las Comunidades Europeas SCCNFP repasó la seguridad del octilmetoxicinamato en 1993 (SPC/1037/93, S28). Se concluyó que el compuesto tiene una toxicidad baja, no es irritante ni tampoco responsable de dermatitis en los hombres.

Tabla 7. Propiedades del Octilmetoxicinamato
Octilmetoxicinamato

Nombre Químico Formula Química Masa Molecular Número CAS Densidad Punto de Fusión Punto de Ebullición Estado Físico

2-Etilexil-4metoxicinamato C18H26O3 290.40 g/mol [5466-77-3] 1.01 g/cm3 -25 °C 198-200 °C Líquido claro

69

JIMENEZ, M et al. Influence of encapsulation on the in vitro percutaneous absorption of octyl methoxycinnamate. En: International Journal of Pharmaceutical. Vol. 272 (2004); p. 45-55

39

Solubilidad en agua

Insoluble

NFPA

Fuente: Disponible en Internet: http://fromyourdoctor.com/resources/files/Content/Derm/Handouts/proteccio nsolar.pdf. [Consulta: Septiembre 12 de 2006]

El OMC ha sido objeto de varias investigaciones debido a su efecto de protección solar. Una nueva tecnología basada en las nanocápsulas (NC) se utilizó para encapsular éste agente protector y prolongar su liberación70 así como para determinar cuanta cantidad del filtro permanece en las capas de piel del cerdo71. Otra investigación importante fue la incorporación del OMC en una fibra artificial procedente de la pulpa de madera (Tencel) modificada con Monoclorotriazinil - - ciclodextrina (-CDMCT). Se demostró que la retención del protector solar en la tela modificada fue más alta que la inmodificada prolongando el efecto protector permitido por la tela72.

70

CHAVEZ, F et al. Liberación de sustancias lipofílicas a partir de nanocápsulas poliméricas. En: Journal of the Mexican Chemical Society. Vol. 46, No. 4 (2004); p. 349-356

71

JIMENEZ, Op. cit., p.46.

72

SCALIA, S. et al. Incorporation of the sunscreen agent, octyl methoxycinnamate in a cellulosic fabric grafted with -cyclodextrin. En: International Journal of Pharmaceutical. Vol. 308 (Nov. 2006); p. 155-159

40

3. CELOFÁN

Celofán es una palabra compuesta, cel es una abreviación francesa de “celulosa” y fan una palabra griega proveniente de “diaphanous” que significa diáfano, transparente73. Es un polímero natural derivado de la celulosa, que tiene el aspecto de una película fina, transparente, flexible y resistente a esfuerzos de tracción, pero muy fácil de cortar. Otras de sus cualidades son que es biodegradable y que no resiste bien la humedad, ya que tiende a absorberla.

3.1 HISTORIA

Fue inventado por el ingeniero textil suizo Jacques E. Brandenberger en 1908 cuando al ver que se derramaba vino sobre el mantel de la mesa de un restaurante, quiso producir un recubrimiento transparente para la tela que lo hiciera impermeable. Experimentando, encontró una forma de aplicar la viscosa líquida a la tela, pero la combinación resultó demasiado rígida como para usarse. Sin embargo la película transparente se separaba fácilmente de su respaldo de tela, por lo que abandonó su idea original atraído por las posibilidades del nuevo material.

La compañía de golosinas Whitman de los Estados Unidos comenzó a utilizar el celofán para envolver golosinas en 1912. Fueron los mayores consumidores de celofán importado de Francia hasta cerca de 1924, cuando DuPont construyó la primera planta norteamericana de Celofán. El crecimiento principal para el celofán comenzó durante finales de los años 1930 y después de la segunda Guerra Mundial cuando entró en moda las compras de autoservicio y muchos paquetes requirieron transparencia ya que la gente quiso ver lo que compraba74.

En 1935 se estableció British Cellophane Ltd, una empresa conjunta entre La Cellophane SA y Courtaulds, comenzando a operar una fábrica para la manufactura de celofán en Bridgwater en 1937.
73

ORTIZ, M; OLIVARES, A and SANCHEZ, V. Cellophane film as half wave retarder of wide spectrum. En: Optical Materials. Vol. 17 (2001); p. 395-400
74

TAYLOR, T. The Use and Identification of Plastic Packaging Films for Conservation. [Online]. s.I.: s.n, 1985. < http://aic.stanford.edu/sg/bpg/annual/v04/bp04-12.html> [Consulta: Noviembre 1 de 2006]

41

3.2 PROCEDENCIA

La celulosa, constituyente estructural de las fibras en el reino vegetal, es uno de los principales productos del proceso de fotosíntesis, durante el cual se produce también el almidón, reserva energética de fácil conversión. Es un homopolisacárido rígido, insoluble, que contiene desde varios cientos hasta varios miles de unidades de glucosa.

La celulosa tiene una estructura lineal o fibrosa, en la que se establecen múltiples puentes de hidrógeno entre los grupos hidroxilo de distintas cadenas yuxtapuestas de glucosa, haciéndolas impenetrables al agua, lo que hace que sea insoluble en agua, y originando fibras compactas que constituyen la pared celular de las células vegetales46.

Figura 10. Estructura de la celulosa

Fuente: CONTRERAS, Héctor Jesús. Ciclodextrinas: naturaleza, propiedades y aplicaciones. México: s.n, 2000. p.4.

Una de las formas más simples de celulosa usada industrialmente es la celulosa regenerada, en la cual la composición química del producto final es similar al de la celulosa original. La celulosa proveniente de fibras de madera o algodón se trata con hidróxido de sodio, y luego se mezcla con disulfuro de carbono para formar xantato de celulosa, el cual se disuelve luego en más hidróxido de sodio (ver figura 11). La viscosa resultante se extruye en un baño ácido o bien a través de una ranura para hacer lo que se conoce como celofán. El ácido vuelve a convertir la viscosa en celulosa.

46

Disponible en Internet: <http://es.wikipedia.org/wiki/Celof%C3%A1n>

42

Figura 11. Proceso de la viscosa

Fuente: Disponible en Internet: <http://es.wikipedia.org/wiki/Viscosa> [Consulta: Febrero 13 de 2007]

3.3 USOS Y PROPIEDADES

Se ha previsto por años que la celulosa es un material básico para la fabricación de cierto tipo de membranas. El celofán es usado para membranas de diálisis debido al hecho que es muy hidrófilo, pero no soluble en agua. Según esto, el celofán permite la difusión de iones y solutos de bajo peso molecular lo que es relacionado con la cristalinidad y la vinculación de hidrógeno intramolecular entre los grupos hidroxilo, y es la razón por la que membranas a base de celofán comúnmente son usadas en la hemodiálisis47.

Las membranas de celofán se utilizan como un método in vitro para simular la piel ya que es selectivo y a diferencia de membranas vivas, su selectividad no varía. El agua y otras pequeñas moléculas pueden pasar por una membrana de celofán, pero moléculas grandes son bloqueadas. De esta manera es utilizado en un esfuerzo de aclarar el mecanismo de la permeabilidad y solubilidad de algunas drogas como el acido azelaico y la hidrocortisona en soluciones acuosas de ciclodextrina a través de éstas membranas semipermeables48,49.Sin embargo el uso más cotidiano para el celofán en la industria, es para envolver regalos y alimentos.
47

VAQUEZ, M.I. et al. Effect of radiation and thermal treatment on structural and transport parameters for cellulose regenerated membranes. En: Applied Surface Science. Vol. 238 (2004); p. 415-422.
48

LOFTSSON, T; MASSON, M and SIGURDSSON, H. Cyclodextrins and drug permeability through. En: International Journal of Pharmaceutical. Vol. 232 (2002); p. 35-43
49

MANOSROI, J et al. Enhancement of the release of azelaic acid through the synthetic membranes by inclusion complex formation with hydroxypropyl- -cyclodextrin. En: International Journal of Pharmaceutical. Vol. 293 (2005); p. 235-240

43

Las compañías de alimentos pueden obtener el equilibrio adecuado entre pérdida de humedad y retención de ésta debido a que el celofán permite que la humedad atraviese la película de una manera controlada. Ya sea que el producto necesite que la humedad escape o sea retenida, las películas de celofán pueden diseñarse para satisfacer los requerimientos de empaque de productos específicos. Debido a que ésta es una película única, los proveedores pueden adaptar la permeabilidad de humedad a pedido del cliente de acuerdo a los requerimientos del producto. Por ejemplo, para un bizcocho relleno, la humedad debe escapar del paquete para prevenir la condensación y sofocación de la corteza. Con las galletas, por el contrario, se requiere una barrera bastante alta de humedad para mantenerlas crujientes50. Con el tiempo, el término "celofán" se ha generalizado, y se usa comúnmente para referirse a diversas películas plásticas, aún aquéllas que no están hechas en base a celulosa. Es por esto que es necesario conocer algunas características (ver Tabla 7) que tiene éste material que lo diferencian de los plásticos. Tabla 8. Pruebas características del celofán Celofán

Prueba de Calor

No sufrirá ninguna desviación debido a la normalización de calor, se hará frágil y se encogerá ligeramente debido a la pérdida de humedad. Su olor es parecido al de un periódico quemado

Prueba de Fuego (olor)

Prueba de Fuego (rata)

No se derrite, no gotea ni se forman pequeñas gotas de líquido; se quema como un papel y continúa ardiendo cuando se le retira el fuego.

50

Disponible en Internet: <http://www.bakingbusiness.com/refbook_results.asp?ArticleID=56192>

44

Prueba de Extensión Prueba de Rasgado

Difícil de estirar.

Fácil rasgarse.

Una propiedad importante del celofán es que es biodegradable y tarda en desintegrarse entre uno y tres años, a diferencia del plástico común, que tarda siglos en desaparecer. En general, las bolsas de celofán son aceptables por no dañar el medio ambiente; no son tóxicas y no contaminan los alimentos.

Muchas pruebas y estudios han sido hechos para evaluar la biodegradabilidad del celofán. Un gran número de estas pruebas han sido desarrolladas durante los últimos 15 años. La norma de biodegradabilidad mas reciente ha sido acordada entre 15 miembros de la Comunidad Europea, la EN 13432:2000 y ha sido desarrollada para apoyar los requerimientos de empaque de la European Directive 94/62/EC51.

Otros atributos del celofán incluyen excelente impresión y buena maquinabilidad. No es termoplástico, no puede ser sellado con calor, se reviste con cera de nitrocelulosa o cloruro de polivinilideno (PVDC) y se lamina adicionalmente con poliéster metalizado. La superficie sin recubrimiento absorbe fácilmente los líquidos. Pese a esta característica, retiene solventes de tinta más que el celofán con recubrimiento. Algunas tintas sangran y emigran a través del celofán. Esto precisa buena ventilación y fuerza del aire para secar la tinta. El celofán con recubrimiento de polímero tiene ambos lados idénticos para la impresión52.

51

ESTRADA, M. El uso del celofán en apoyo del medio ambiente. [En línea]. s.p.i. < http://www.empaqueperformance.com.mx/news_viewed.asp?did=587> [Consulta: Enero 10 de 2007]
52

BURGSTEIN, M. La tecnología en el empaque: industria trascendental. [En línea]. s.p.i. <http://www.gainespanol.com/articulos/tecnologia/index.cfm>[Consulta: 10 Enero de 2007]

45

4. MATERIALES Y MÉTODOS

4.1 REACTIVOS

Ciclodextrina 

CAVASOL® W7 MCT, ß-ciclodextrina modificada con triazina, aporte de la empresa Wacker Chemie GmbgH, Werk Burghausen, Germany (ver figura Nº 8) CAVAMAX® W7, ß-ciclodextrina nativa, aporte de la empresa Wacker Chemie GmbgH, Werk Burghausen, Germany (ver figura Nº 5).



Celofán

Agente Bloqueador UV 

Octilmetoxicinamato (Escalol 557), aportado por la empresa Proes Ltda, Medellín, Colombia (ver tabla Nº 6).

Cosolventes  

Metanol grado analítico Agua destilada

Otros  Hidróxido de Sodio

46

4.2 PROCEDIMIENTOS

4.2.1 Modificación de celofán con CAVASOL ® W7 MCT 

Disposición del celofán Se cortan láminas de celofán con las siguientes dimensiones: Ancho: 1 cm. Largo: 5 cm. 

Preparación de la solución de CAVASOL® W7 MCT Se cortan 12 laminas de celofán con las dimensiones antes dichas y se pesan 12.5, 25 y 37.5 gr de ciclodextrina para preparar tres soluciones al 5, 10 y 15% respectivamente en un balón volumétrico de 250ml a temperatura ambiente. Se depositan en tres beakers cantidades iguales de las soluciones de ciclodextrina a las distintas concentraciones, estas soluciones tienen un carácter ácido así que se prepara una solución de hidróxido de sodio al 2% y con esta solución se le ajusta el pH a 12 aproximadamente.



Tiempo de reacción A cada solución de ciclodextrina contenida en un beaker, se le incorporan 4 láminas de celofán de las cuales se dejan dos en la solución por 5 minutos y las otras dos por 10 minutos. Esto con el fin de ser empapadas y se pueda producir una modificación superficial.



Tiempo de secado Pasado el tiempo de reacción, se sacan las láminas de cada solución y se extienden en placas de vidrio las cuales se llevan a un horno con una temperatura de 110 ºC, por un periodo de 5 minutos. Posteriormente se retiran del beaker y se lavan completamente con agua destilada para asegurar que se retira el CAVASOL que no ha reaccionado.

47

Figura 12. Esquema de reacción de CAVASOL ® W7 MCT con fibras que poseen grupos Hidroxilos

Fuente: SCALIA, S et al. Incorporation of the sunscreen agent, octyl methoxycinnamate in a cellulosic fabric grafted with -cyclodextrin. En: International Journal of Pharmaceutical. Vol. 308 (Nov. 2006); p. 156.

Figura 13. Esquema de un complejo de inclusión anfitrión- huésped injertado en la superficie del celofán

Fuente: SCALIA, S et al. Incorporation of the sunscreen agent, octyl methoxycinnamate in a cellulosic fabric grafted with -cyclodextrin. En: International Journal of Pharmaceutical. Vol. 308 (Nov. 2006); p. 156.

4.2.2 Formación de complejos en solución con ciclodextrinas Se prepara una solución acuosa de ß-ciclodextrina nativa y ßciclodextrina modificada a temperatura ambiente. El compuesto huésped (OMC) se disuelve en una solución de metanol al 30% y una cantidad equimolar de este compuesto es adicionada a cada ciclodextrina. Se agita a temperatura ambiente por un periodo de 10 minutos. En algunos casos el tiempo necesario para la formación del complejo debe ser extendido.

Algunas veces puede lograrse un encapsulamiento molecular mas efectivo preparando una solución más concentrada de ß-ciclodextrina adicionando el huésped y agitando (el tiempo de agitación depende de cuán rápido se alcanza el equilibrio), a 40º C o 50º C, para luego enfriar lentamente a temperatura ambiente de 6-12 horas.

48

4.2.3 Impregnación de celofán con OMC Las muestras de celofán modificadas y sin modificar son tratadas con el bloqueador UV y se procede de la siguiente manera:

a. En una probeta se prepara una mezcla de agua-metanol en proporción (30/70, v/v) conteniendo el bloqueador UV al 2% v/v. El celofán sin modificar se empapa totalmente y de una manera uniforme en esta solución por un periodo de 24 horas aproximadamente. b. Se prepara de igual forma la solución anterior pero esta vez se empapa la lámina de celofán modificado y optimizado por un periodo de tiempo equivalente. c. Por ultimo en un matraz de 250 ml se toman 75 ml de metanol para una solución al 30% v/v. Pasadas las 24 horas, las láminas son retiradas de la mezcla de bloqueador UV y son lavadas con ésta solución de metanol para ser retirado el material que no ha sido absorbido por el celofán.

4.3 MÉTODOS DE EVALUACIÓN 4.3.1 Espectrofotometría UV – VIS Rango de Barrido: 200 – 400 nm Tipo de celda: cuarzo, dos lados transparentes Marca: Shimadzu Serie: UV – 1601 PC

Figura 14. Espectrofotómetro Shimadzu

Fuente: Disponible en Internet: <http://www.shimadzu.com/spectrofotomether> [Consulta: Abril 7 de 2007]

49

Para la determinación de los espectros de las láminas de celofán se procede de la siguiente forma: a. Como primera medida se realiza un espectro al celofán sin ningún tipo de modificación, en un rango de longitud de onda de 200 a 400 nanómetros, esto se hace tomando la lámina de celofán y poniéndola paralela al rayo. Luego se observa el espectro en la computadora y se recopilan los datos de absorbancia. b. Para esta parte se toman las láminas ya modificadas con soluciones de ciclodextrinas al 5, 10 y 15% y se miden a la misma longitud de onda. Se toman los datos de espectros por separado y de manera conjunta, lo cual es de gran uttilidad para poder saber cual de éstas láminas obtuvo la mejor modificación superficial. c. La solución de bloquedor UV es puesto en una celda de cuarzo para ver su espectro, tomar datos de absorbancia y así poder ser analizado. La medición al igual que las anteriores se hizo en un rango de 200-400 nm. d. La lámina modificada, optimizada y cubierta por la solución de bloquedor UV se pone en el espectofotómetro y se miden datos de absorbancia con su espectro respectivo.

50

5. RESULTADOS Y ANÁLISIS

5.1 Modificación de celofán con CAVASOL ® W7 MCT

En la figura 14 se muestra el espectro del celofán sin modificar. Se observa el pico característico en 305.4 nm y se nota que de 200 a 263 nm y de 340 a 400 nm la muestra sin tratar no presenta ninguna absorción.

Figura 15. Espectro de absorción UV-VIS del celofán.

Tabla 9. Datos de picos con su respectiva longitud de onda del espectro UV-VIS del celofán
PICO 1 2 3 4 LONGITUD DE ONDA (nm) 340,6 305,4 339,8 264

51

La celulosa y la ciclodextrina están compuestas de unidades de glucosa por lo que son indistinguibles una de la otra en UV-VIS. Al modificar el celofán con Monoclorotriazinil - - ciclodextrina (-CD-W7 MCT) se presenta un pequeño desplazamiento en el pico numero 2 de 304,4 nm y un máximo de absorción en 231,4 nm que no se observaba en la muestra sin modificar y corresponden a el anillo de triazina que es el que proporciona una evidencia clara en la modificación (ver figura 15).

Figura 15. Espectro UV-VIS del celofán modificado

Tabla 10.Datos de picos con su respectiva longitud de onda del espectro UV-VIS del celofán modificado
PICO 1 2 3 4 5 6 LONGITUD DE ONDA (nm) 340,6 304,4 231,4 339,8 277,4 224,4

52

5.2 OPTIMIZACIÓN DE PARAMETROS

Para la modificación superficial del celofán se tuvieron en cuenta cinco parámetros fundamentales: concentración de ciclodextrina, concentración de NaOH, tiempo de reacción, tiempo de secado y por ultimo temperatura de secado.

Las variables a optimizar para la modificación de la superficie del celofán fueron tiempo de reacción y concentración de ciclodextrina. Los parámetros restantes fueron tomados según lo estimado por Moldenhauer53 en su artículo, a excepción del tiempo de secado que no se optimizo debido a que el papel se degradaba en periodos superiores a 5 minutos. Basados en esto se procedió a medir con espectrofotometría UV-VIS en un rango de 200-400 nm y de ésta manera obtener el espectro cuyos picos arrojen la mejor modificación superficial.

Para decidir cuál muestra es la que presenta una mejor modificación primero se analizo el tiempo en que reacciona la ciclodextrina en la superficie del celofán, así que se observan los espectros a igual concentración de ciclodextrina pero diferente tiempo de reacción. Las muestras son tomadas a igual temperatura debido a que un T desplazaría la posición de  a longitudes de onda mayores y afectaría el resultado final. Las variables en rojo son las que se optimizaron y los resultados son presentados a continuación:

Concentración de Ciclodextrina (%) 5

Tiempo de Reacción(min) 5

Tiempo de secado(min) 5

Temperatura de secado(ºC) 110

Concentración de NaOH(%) 2

53

MOLDENHAUER, Op. cit., p. 4.

53

Figura 16. Espectro UV-VIS del celofán modificado. [ ] CD: 5%, trxn: 5 min, tsec: 5 min, Tsec: 110°C y [ ] NaOH: 2%

Tabla 11.Datos de picos con su respectiva longitud de onda del espectro UV-VIS del celofán modificado con [ ]CD :5% y trxn: 5 min.
PICO 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 LONGITUD DE ONDA (nm) 337 287,8 268,8 265,6 258,2 254,6 252 248,8 244,6 243,6 240 234,6 230,8 223,6 216,4 214,8 209,4 203,6 340,6 314

54

21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36

280,2 268 263,8 256,2 252,8 250,4 246,4 244,4 240,8 237,4 232,2 224,4 218,6 215,6 210,6 207,2

Concentración de Ciclodextrina (%) 5

Tiempo de Reacción(min) 10

Tiempo de secado(min) 5

Temperatura de secado(ºC) 110

Concentración de NaOH(%) 2

Figura 17. Espectro UV-VIS del celofán modificado. [ ] CD: 5%, trxn: 10 min, tsec: 5 min, Tsec: 110°C y [ ] NaOH: 2%

55

Tabla 12.Datos de picos con su respectiva longitud de onda del espectro UV-VIS del celofán modificado con [ ]CD :5% y trxn: 10min.
PICO 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 LONGITUD DE ONDA (nm) 340,6 288,8 283,2 257,8 254,4 233,8 213,4 209,4 207 202 392,4 373,4 365,8 339,8 279,2 256,4 253,6 233 211,2 208,6 205,4

Observando el pico número 2 (287,7 y 288,8 nm) en las figuras 16 y 17 respectivamente, se nota que hubo un mayor desplazamiento en el de la figura 17 que corresponde a 10 minutos de reacción.

Concentración de Ciclodextrina (%) 10

Tiempo de Reacción(min) 5

Tiempo de secado(min) 5

Temperatura de secado(ºC) 110

Concentración de NaOH(%) 2

56

Figura 18. Espectro UV-VIS del celofán modificado. [ ] CD: 10%, trxn: 5 min, tsec: 5 min, Tsec: 110°C y [ ] NaOH: 2%

Tabla 13. Datos de picos con su respectiva longitud de onda del espectro UV-VIS del celofán modificado con [ ]CD :10% y trxn: 5 min.
PICO 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 LONGITUD DE ONDA (nm) 398,2 381,4 361,2 349,6 333,2 286,4 266,8 258,2 241,4 233,6 225 222,4 219,8 216,2 213,8 209,2 207 203,2 386,6 370,8

57

21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35

355,4 341,2 329,6 278,2 266 256,2 253,8 240,6 230,2 224,2 220,6 219 214,6 211,2 207,8

36

205,2

Concentración de Ciclodextrina (%) 10

Tiempo de Reacción(min) 10

Tiempo de secado(min) 5

Temperatura de secado(ºC) 110

Concentración de NaOH(%) 2

Figura 19. Espectro UV-VIS del celofán modificado. [ ] CD: 10%, trxn: 10 min, tsec: 5 min, Tsec: 110°C y [ ] NaOH: 2%

58

Tabla 14.Datos de picos con su respectiva longitud de onda del espectro UV-VIS del celofán modificado con [ ]CD :10% y trxn: 10 min.
PICO 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 LONGITUD DE ONDA (nm) 364,2 340,6 289 270,2 267,2 258,2 249,4 245,6 242,8 240,4 233,6 230,8 225,4 223,2 219,4 216,8 203,6 374,6 356,2 339,6 277,4 269,2 265,2 253,8 248,6 243,8 241,6 239 226,2 224 220,2 218 205,4

En los picos 286,4 y 289 nm de las figuras 18 y 19 ocurre lo mismo y se obtiene mayor desplazamiento en la figura 19 que también corresponde a 10 minutos de reacción.

59

Concentración de Ciclodextrina (%) 15

Tiempo de Reacción(min) 5

Tiempo de secado(min) 5

Temperatura de secado(ºC) 110

Concentración de NaOH(%) 2

Figura 20. Espectro UV-VIS del celofán modificado. [ ] CD: 15%, trxn: 5 min, tsec: 5 min, Tsec: 110°C y [ ] NaOH: 2%

Tabla 15. Datos de picos con su respectiva longitud de onda del espectro UV-VIS del celofán modificado con [ ]CD :15% y trxn: 5 min.
PICO 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 LONGITUD DE ONDA (nm) 388 359,6 288 259,6 231 228,4 216,2 213 211 209,2 207,4 202,2 373 348 333

60

16 17 18 19 20 21 22 23 24 25

279 256,4 229,8 227,6 214,2 211,8 210,2 208,2 205,4 201,4

Concentración de Ciclodextrina (%) 15

Tiempo de Reacción(min) 10

Tiempo de secado(min) 5

Temperatura de secado(ºC) 110

Concentración de NaOH(%) 2

Figura 21. Espectro UV-VIS del celofán modificado. [ ] CD: 15%, trxn: 10 min, tsec: 5 min, Tsec: 110°C y [ ] NaOH: 2%

61

Tabla 16. Datos de picos con su respectiva longitud de onda del espectro UV-VIS del celofán modificado con [ ]CD :15% y trxn: 10min.
PICO 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 LONGITUD DE ONDA (nm) 372,6 345,2 288,2 259,8 254,6 232,4 215,6 209,2 207 201,6 396,8 386,4 360,2 336,2 279,8 257 253,8 231,6 211,8 207,8 205,4 200,8

Finalmente en el pico 3 (288 y 288,2 nm) de las figuras 20 y 21 respectivamente, se observa el mayor desplazamiento en el de la última figura, teniendo así el mismo resultado de las anteriores. Esto demuestra que el mejor tiempo de reacción son 10 minutos y es debido a que entre más tiempo tenga la ciclodextrina para reaccionar con la superficie del celofán se puede adherir en mayor proporción a éste logrando una mejor modificación.

En la figura 22 se muestra la superposición de todos los espectros a diferente concentración y tiempo de reacción de ciclodextrina. Se observa que si se aumenta la concentración de ciclodextrina a un 15%, el celofán no lo absorbe de igual manera en su superficie disminuyendo así el valor de absorbancia y se debe en gran parte a una saturación. Se tiene que la mejor modificación es obtenida con una concentración del 10% de ciclodextrina modificada (W7 MCT) con 10 minutos de reacción y estos parámetros son los óptimos para realizar los análisis siguientes.

62

Figura 22. Espectro UV-VIS de: ( ) Celofán sin modificar; ( ) Celofán modificado [ ]CD :5% y trxn: 5min;( )Celofán modificado [ ]CD :5% y trxn: 10min; ( )Celofán modificado [ ]CD :10% y trxn: 5min; ( )Celofán modificado [ ]CD :10% y trxn: 10min;( )Celofán modificado [ ]CD :15% y trxn: 5min; ( ) Celofán modificado [ ]CD :15% y trxn : 10min

5.3 FORMACIÓN DE COMPLEJOS CON CICLODEXTRINAS

Una de las formas más sencillas de detectar los complejos de inclusión con ciclodextrinas es observar la aparición de máximos de absorción o desplazamientos en los máximos ya existentes. Teniendo en cuenta la baja solubilidad del OMC en agua, se trabajó éste bloqueador en una solución de metanol al 2% la cual muestra picos en 238.4, 321.4 y 289 nm, siendo este ultimo el más característico, tal como se muestra en la figura 23.

63

Figura 23. Espectro UV-VIS del octilmetoxicinamato

Tabla 17.Datos de picos con su respectiva longitud de onda del espectro UV-VIS del OMC
PICOS 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 LONGITUD DE ONDA (nm) 321,4 289 238,4 213,6 211,4 209,2 206 323 314,4 264,2 231,8 212,8 209,4 208,4 203,8

En la figura 24 se muestra el espectro de absorción UV-VIS del complejo OMC/ CAVAMAX. Se observa la aparición de bandas de absorción acompañada de un ensanchamiento de banda en el pico 3 y un desplazamiento de el máximo de absorción de aproximadamente 49 nm con respecto a el de la solución de OMC, lo que evidencia una notoria formación del complejo.

64

Figura 24. Espectro UV-VIS del complejo CAVAMAX / OMC

Tabla 18.Datos de picos con su respectiva longitud de onda del espectro UV-VIS del complejo CAVAMAX / OMC
PICOS 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 LONGITUD DE ONDA (nm) 397,2 320,4 287,8 269 206,6 202 395,8 315,8 271 266,6 202,8

En la figura 25 se muestra el espectro de absorción UV-VIS del complejo OMC/ CAVASOL. A diferencia de la CD nativa, la -CD-W7 MCT tiene mayor solubilidad en agua (> 30%), estabilidad y al ser más hidrosoluble que la nativa su cavidad es más hidrófoba. Se observan un pico en 320,4 nm y un máximo en 287,8 nm que también son resultados de una formación de complejo.

65

Figura 25. Espectro UV-VIS del complejo CAVASOL / OMC

Tabla 19.Datos de picos con su respectiva longitud de onda del espectro UV-VIS del complejo CAVASOL / OMC
PICOS 1 2 3 4 5 6 7 8 9 LONGITUD DE ONDA (nm) 320,4 287,8 269,2 208,2 202,6 316,2 270,8 266,4 206,6

5.4 CICLODEXTRINAS FIJAS AL CELOFÁN

En el espectro UV-VIS de la muestra sin modificar se observan dos picos principales en 306,4 y 343,2 nm, pero no se observa el pico característico del bloqueador UV a 289 nm lo que indica que este bloqueador no se retiene en la película sin modificar, resultado que era de esperarse debido a que no existen

66

moléculas de cloruro cianúrico que actúen como puentes y de ésta forma puedan fijar el bloqueador a la superficie del celofán.

Figura 26. Espectro UV-VIS del celofán sin modificar en solución de OMC.

Tabla 20.Datos de picos con su respectiva longitud de onda del espectro UV-VIS del celofán sin modificar en solución de OMC
PICO 1 2 3 4 LONGITUD DE ONDA (nm) 343,2 306,4 324,2 276

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Figura 27. Espectro UV-VIS del celofán modificado en solución de OMC.

Tabla 21.Datos de picos con su respectiva longitud de onda del espectro UV-VIS del celofán modificado en solución de OMC.
LONGITUD DE ONDA (nm) 340,6 293 228,8 339,8 275,4 227,4

PICO 1 2 3 4 5 6

La muestra modificada y tratada con OMC presenta una absorción significativa debajo de los 293 nm, con un máximo alrededor de 228,8 nm debido al cromóforo triazinil. A comparación de la muestra sin modificar el espectro UVVIS de ésta, muestra un desplazamiento batocrómico (al rojo) a 293nm en el pico principal del OMC . Este movimiento puede ser atribuido al cambio en el entorno químico aportado por el interior hidrofóbico de la ciclodextrina lo cual es una señal inconfundible del encapsulamiento del bloqueador UV a el celofán.

Se observa entonces que gracias a las moléculas de cloruro cianúrico aportadas por la ciclodextrina modificada se pueden formar tales complejos de

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inclusión debido a que estas son las que permiten la formación de enlaces covalentes con las ciclodextrina por una parte y con los grupos OH del celofán por otra. También se debe a el buen grado de sustitución de la -CD-W7 MCT que es de 0.4, es decir de 2 a 3 grupos reactivos por molécula lo que hace que ésta no se vuelva un polímero insoluble y asegure una buena fijación a la película de celulosa.

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6. CONCLUSIONES 

Se modificó químicamente la superficie del celofán con CAVASOL® W7 MCT con el procedimiento descrito y gracias a este derivado de ciclodextrina, se pudo dar a el celofán nuevas propiedades fundamentales como permitirle formar complejos con compuestos no afines a el como bloqueadores UV.



Se observó una modificación gracias al máximo de absorción de 231.4 nm y el desplazamiento del pico número 2 a 304.4 nm los cuales son atribuidos al anillo de triazina de la -CD-W7 MCT.



Se lograron optimizar ciertos parámetros como concentración de ciclodextrina: 10% y tiempo de reacción de ciclodextrina: 10 minutos. Estos factores fueron importantes ya que se obtuvo una buena modificación del celofán.



El celofán no pudo ser expuesto a tiempos de secado mayores a 5 minutos por presentar degradación, esto hace notar que la técnica más limitada fue la etapa del secado que no tuvo una optimización previa.



El limite de concentración de ciclodextrina para la modificación del celofán es de 10%, si se trabaja con un 15% la superficie de este no absorbe de igual manera la ciclodextrina y se presenta una disminución de absorbancia lo cual no es deseado.



La técnica instrumental empleada en este estudio (espectrofotometría de absorción UV-VIS) pone de manifiesto la existencia de complejos de inclusión entre el OMC y las distintas ciclodextrinas CAVASOL® W7 MCT y CAVAMAX, así como el complejo entre este bloqueador UV y el celofán.



Los complejos CAVAMAX / OMC y CAVASOL / OMC resultaron ser solubles en la solución de metanol al 70% v/v y tienen estequiometría 1:1



El celofán sin modificar no presentó retención alguna del bloqueador UV lo que verifica la importancia que tiene el uso de CAVASOL® W7 MCT

70

por sus moléculas de cloruro cianúrico que son las formadoras de puentes entre la celulosa y el agente bloqueador. 

La ciclodextrina fijada químicamente al Celofán nos ha permitido formar un complejo de inclusión con el bloqueador mejorando la retención del mismo en este material, con lo cual puede pensarse en el uso de esta película modificada para empaques de alimentos en los que se requiera una película transparente que además brinde protección UV.

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BIBLIOGRAFÍA

BASAN, H. et al. Quantitative determination of piroxicam in a new formulation (piroxicam -- cyclodextrin) by derivative UV spectrophotometric method and HPLC. En: Journal of Pharmaceutical and Medical Analysis. Vol.26 (2001); p. 171-178 BILENSOY, E et al. Mucoadhesive, Thermosensitive, Prolonged-Release Vaginal Gel for Clotrimazole: -- cyclodextrin complex. En: AAPS PharmScitec. Vol. 7, No. 2 (2006); p. 1-7 BURGSTEIN, M. La tecnología en el empaque: industria trascendental. [En línea]. s.p.i. <http://www.gainespanol.com/articulos/tecnologia/index.cfm> [Consulta: 10 Enero de 2007] CAMACHO, F. Antiguos y nuevos conceptos de la fotoprotección. En: Revista Internacional de Dermatología y Dermocosmética Clínica. Vol. 4, No. 7 (2001); p. 441-448 CHAVEZ, F et al. Liberación de sustancias lipofílicas a partir de nanocápsulas poliméricas. En: Journal of the Mexican Chemical Society. Vol. 46, No. 4 (2004); p. 349-356 CHISVERT, A; PASCUAL, M.C. and SALVADOR, A. Determination of the UV filters worldwide authorised in sunscreens by high-performance liquid chromatography. Use of cyclodextrins as mobile phase modifier. En: Journal of Chromatography. Vol. 921 (2001); p. 207-215 CONTRERAS, Héctor Jesús. Ciclodextrinas: naturaleza, propiedades y aplicaciones. México: s.n, 2000. 180p. ________ Encapsulamiento molecular de sustancias hidrofóbicas en derivados de amilasa y ciclodextrinas. México: s.n, 2000. p.6. ________ Modificación superficial de fibras celulósicas con derivados de ciclodextrina. [En línea]. Guadalajara: s.n,2001.<http://dmcyp.cucei.udg.mx/hecont/ciclodextrinas/AMIDIQ%202001.P DF> [Consulta: Octubre de 2006] DÍEZ, O y HERRÁEZ, M. Importancia de los sistemas de liberación prolongada en los preparados dermofarmacéuticos. [En línea]. Valencia: s.n,s.f.<http://portalfarma.com/pfarma/taxonomia/general/gp000023.nsf/voDocu mentos/0A00ADE322E0A6A4C1256F2E005CFAE0/$File/20%20oct%20Nueva s%20orientaciones%20en%20e%20-%20Octa.doc> [Consulta: Enero de 2007]

ESTRADA, M. El uso del celofán en apoyo del medio ambiente. [En línea]. s.p.i. <http://www.empaqueperformance.com.mx/news_viewed.asp?did=587> [Consulta: Enero 10 de 2007] FELTON, L.A; WILEY, C.J and GODWIN, D.A. Influence of hydroxypropylbeta-cyclodextrin on the transdermal permeation and skin accumulation of oxybenzone. En: Drug Development and Industrial Pharmacy. Vol. 28, No. 9 (2002); p. 1117-1124. GIACOMOZZI, Dante E. Estudio del encapsulamiento molecular de blanqueadores ópticos en -ciclodextrina nativa y su derivado monoclorotriazinil -ciclodextrina y de su incorporación a fibras celulósicas. Guadalajara, 2002, 121 p. Trabajo de grado (Maestro en Ciencia de Productos Forestales). Universidad de Guadalajara. Departamento de madera, celulosa y papel. HERNANDEZ, M.A. Ciclodextrinas: propiedades y usos en farmacia. Revista Salud Pública y Nutrición. Vol. 11 (2006); p. 1- 2 En:

JIMENEZ, M et al. Influence of encapsulation on the in vitro percutaneous absorption of octyl methoxycinnamate. En: International Journal of Pharmaceutical. Vol. 272 (2004); p. 45-55 LEYVA, E et al. Estudio de los complejos de inclusión de ácido nalidíxico y ácido oxolínico con ciclodextrinas. En: Revista de la Sociedad Química de México. Vol. 48 (2004); p. 349-351 ________ Estudio de RMN de los complejos de fenoles halogenados con ciclodextrinas. En: Educación Química. Vol. 13, No. 2 (2002); p. 82-84 LEÓN, A. et al. Complejos de inclusión de harmano con hidroxipropil-βciclodextrina: aspectos metodológicos relativos a su caracterización analítica. En: An. R. Acad. Nac. Farm. Vol. 70, No. 3 (2004); p. 681-693 LOFTSSON, T; MASSON, M and SIGURDSSON, H. Cyclodextrins and drug permeability through. En: International Journal of Pharmaceutical. Vol. 232 (2002); p. 35-43. MANOSROI, J et al. Enhancement of the release of azelaic acid through the synthetic membranes by inclusion complex formation with hydroxypropyl- cyclodextrin. En: International Journal of Pharmaceutical. Vol. 293 (2005); p. 235-240. MOLDENHAUER, J.P. Textile finishing with MCT-- cyclodextrin. WackerChemie, GmbH, 1999. 5 p.

73

MUÑOZ, S; DEL CASTILLO, B y MARTÍN, M.A. Las ciclodextrinas: características y aplicaciones de la formación de complejos de inclusión. En: Ars Pharmaceutica. Vol 36, No. 2 (1995); p. 187-198 MUÑOZ, S. Formación de los complejos de Inclusión entre retinoides y ciclodextrinas: características, propiedades y ventajas analíticas. Madrid, 1994, 466 p. Tesis Doctoral (Doctor en Farmacia). Universidad Complutense de Madrid. Facultad de Farmacia. ORTIZ, M; OLIVARES, A and SANCHEZ, V. Cellophane film as half wave retarder of wide spectrum. En: Optical Materials. Vol. 17 (2001); p. 395-400 PRAKASH, B. et al. Caracterización fisicoquímica de los complejos de hidroxietil-β-ciclodextrina y β-ciclodextrina de rifampicina. En: Ars Pharmaceutica. Vol.47. No. 1(2006); p. 37-59 SCALIA, S. et al. Comparative studies of the influence of cyclodextrins on the stability of the sunscreen agent, 2-ethylhexyl-p-methoxycinnamate. En: Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis. Vol. 30 (2002); p. 1181-1189 ________ Incorporation of the sunscreen agent, octyl methoxycinnamate in a cellulosic fabric grafted with -cyclodextrin. En: International Journal of Pharmaceutical. Vol. 308 (Nov. 2006); p. 155-159 SIMEONI, S; SCALIA, S and BENSON, H.A. Influence of cyclodextrins on in vitro human skin absorption of the sunscreen, butyl-methoxydibenzoylmethane. En: International Journal of Pharmaceutical. Vol. 280, No. 1 (2004); p. 163-171 SUÁREZ, David E. Formación y estudio de copolímeros de -CiclodextrinaEpiclorhidrina e incorporación de estos a materiales lignocelulósicos. Guadalajara, 2002, 122 p. Trabajo de grado (Maestro en Ciencia de Productos Forestales). Universidad de Guadalajara. Departamento de madera, celulosa y papel. TAYLOR, T. The Use and Identification of Plastic Packaging Films for Conservation. [Online]. s.I.: s.n, 1985. < http://aic.stanford.edu/sg/bpg/annual/v04/bp04-12.html> [Consulta: Noviembre 1 de 2006] VAQUEZ, M.I. et al. Effect of radiation and thermal treatment on structural and transport parameters for cellulose regenerated membranes. En: Applied Surface Science. Vol. 238 (2004); p. 415-422. VITALE, M.A. Fotoprotección: conceptos básicos y actualización. En: Revista Peruana de Dermatología. Vol. 12, No. 2 (2002); p. 1-8

74

WELSH, O. El sol y sus efectos contra la piel. En: Ciencia UANL. Vol. 11, No. 1 (1999); p. 12. Disponible en Internet: <http://es.wikipedia.org/wiki/Celulosa> [Consulta: Noviembre 5 de 2006]

Disponible en Internet: <http://fromyourdoctor.com/resources/files/Content/Derm/Handouts/proteccions olar.pdf> [Consulta: Septiembre 12 de 2006]

Disponible en Internet: <http://es.wikipedia.org/wiki/Viscosa> [Consulta: Febrero 13 de 2007]

Disponible en Internet: <http://www.bakingbusiness.com/refbook_results.asp?ArticleID=56192> [Consulta: Marzo 2 de 2007]

Disponible en Internet: <http://es.wikipedia.org/wiki/Celof%C3%A1n> [Consulta: Marzo 11 de 2007] Disponible en Internet: <http://www.shimadzu.com/spectrofotomether> [Consulta: Abril 7 de 2007]

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