Acquis-non acquis CCF BioAc U53-v02

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Acquis-non acquis CCF BioAc U53-v02 Powered By Docstoc
					Unité : U53 BCM                                                                                 CCF BTS bioanalyses et contrôles

Propositions réalisées par les groupes de réflexion pour la BCM réunis en février 2008 et mars 2009 à Ambérieu

En rouge sont mentionnés les indicateurs qui nécessitent d'être découpés pour être plus détaillés.
En bleu est mentionnée une proposition du nombre maximal de points à accorder à chaque indicateur pour limiter les différences
de notations entre les centres et les examinateurs.

(BPM = Bonnes Pratiques de Manipulation)

     Compétence terminale                              Indicateur                                                     Evaluation : acquis ou non acquis ?
        élémentaire




                                                                                                                                                                                                              Nbre de points au
                                                                                                                                                                                                              maximum (1 à 3 )
                                        repère




N°       Intitulé (éventuellement                Intitulé (éventuellement          Critères de réussite permettant de dire que la compétence est acquise : on     un ou plusieurs exemples peuvent être
                                                                                   vise à aller à l'essentiel. Le cas échéant on peut préciser quelles sont les   donnés s'ils permettent de donner un
         abrégé)                                 abrégé)
                                                                                   erreurs majeures se soldant par "non acquis" ou inversement les erreurs        éclairage supplémentaire sur les critères
                                                                                                                                                                  de réussite, ce n'est pas forcément une
                                                                                   dites "mineures" pouvant être acceptées.
                                                                                                                                                                  obligation


 C131 Identifier et/ou quantifier   a            préparation convenable des        Préparation tampon : pH-mètre (calibrage, rinçage - séchage) ou calcul ou
         par des techniques                      milieux, matériels, réactifs et   qualité gel (pesée, dissolution, coulage sans bulles ni grumeaux) ou
         d'immunoprécipitation et                supports des techniques           préparation cuve électrophorèse ou mise en place échantillon cuve                                                                2
         d'immunoagglutination

                                    b            préparation de l'échantillon      Geste (homogénéisation) et calcul dilution
                                                 conforme aux contraintes
                                                                                                                                                                                                                    2
                                                 techniques

                                    c1           conception et réalisation des Composition témoin
                                                 témoins de validation
                                                                                                                                                                                                                    1


                                    c2           conception et réalisation de      Tableau de gamme de dilution (valeurs numériques justes)
                                                 la gamme d'étalonnage                                                                                                                                              3

                                    d            réalisation correcte de la        Mancini, ouchterlony : qualité puits, annotations, lieu dépôt échantillons,
                                                 manipulation                      respect gabarit, pas de débordements au dépôt, ou Electrophorèse:
                                                                                   annotations, lieu dépôt échantillons, respect gabarit, mise en place dans la                                                     3
                                                                                   cuve




                                                                                                              Page 1
                                  e    lectures, mesures, calculs et     Exploitation quantitative (mancini, laurell): axes (respect abscisses,
                                       /ou tracés corrects               ordonnées) validation tracé, annotation graphe (titre, fonction) ou
                                                                         Exploitation qualitative (mancini, ouchterlony, électrophorèse): mesure ou                                             3
                                                                         lecture corrects
                                  f1   qualité des résultats
                                                                         Qualitatif : aspect des arcs, fusées ou cercles p/r au groupe ou quantitatif: L'exactitude de l'essai est déterminée
                                                                         un témoin valide, un essai exact, une gamme exploitable (p/r aux résultats par le correcteur en fonction des           2
                                                                         du groupe)                                                                    résultats du groupe.

                                  f2    pertinence de l'exploitation Pertinence de l'exploitation : validation témoin, conclusion p/r norme ou
                                       des résultats (cette séparation problème posé
                                       permet d'éviter d'utiliser la
                                                                                                                                                                                                2
                                       compétence C24)



C132   Identifier et/ou quantifier a   préparation convenable des        identification du matériel.                                                    identification de la plaque elisa,
       par des techniques utilisant    milieux, matériels, réactifs et                                                                                  respect du plan de plaque.
       des anticorps marqués           supports des techniques                                                                                                                                  1
       ELISA COMPETITIVE
                                  b    préparation de l'échantillon      calcul des volumes permettant de réaliser la dilution demandée de
                                       conforme aux contraintes          l'échantillon et réalisation correcte de la dilution.
                                       techniques                                                                                                                                               2


                                  c1   conception et réalisation des donner la composition des cupules témoins et leur rôle, vérifier que les
                                       témoins de validation         témoins soient faits et que les résultats soient corrects
                                                                                                                                                                                                2


                                  c2   conception et réalisation de      donner un tableau présentant les volumes permettant de réaliser la gamme
                                       la gamme d'étalonnage             et les calculs l'expliquant, vérifier les volumes de l'ensemble des tubes de
                                                                         gamme, observer la réalisation d'une dilution (pipetage, homogénéisation)                                              3


                                  d    réalisation raisonnée et          respect des temps d'incubation et/ou pas de demande de réactifs
                                       minutieuse de chacune des         supplémentaires , T°C d'incubation
                                       étapes de la manipulation                                                                                                                                3


                                  e    lectures, mesures, calculs et     réglage de l'appareil, ou calculs (%Inhibition, Log…), ou tracé                le tracé est le critère le plus
                                       /ou tracés corrects                                                                                              important: position et choix des        3
                                                                                                                                                        points, respect de y=f(x)
                                  f1   qualité des résultats             tous les témoins corrects et gamme correcte, au moins 1 de 2 essais            les essais peuvent être notés que si
                                                                         corrects.                                                                      l'ensemble des résultats du groupe      3
                                                                                                                                                        sont corrects.




                                                                                                       Page 2
                                        f2    pertinence de l'exploitation validation des témoins et conclusion par rapport à l'énoncé
                                             des résultats (cette séparation
                                             permet d'éviter d'utiliser la
                                             compétence C24)                                                                                                                                       2



C133 Purifier par des techniques a           Préparation convenable des        Respect des consignes de préparation de la colonne, des différentes
        utilisant des anticorps fixés        matériels, réactifs et supports   solutions d'élutions, réglage d'une pompe.                                                                          2
                                             des techniques
                                        b    Préparation de l'échantillon      Réalisation correcte d'une dilution de l'échantillon et autres étapes
                                             conforme aux contraintes          préliminaires indispensables au bon fonctionnement de la manipulation                                               2
                                             techniques                        (filtration, mise au bon pH…),
                                        c    Réalisation raisonnée et          Respect de la chronologie et durée des étapes, des volumes d'élutions, des
                                             minutieuse de chacune des         volumes des fractions à récupérer et leur numérotation, pas de mise à sec de
                                             étapes de la manipulation         la colonne, pas de demande de réactifs supplémentaires.                                                             3


                                        d    Vérification de l'efficacité de   Etude du rapport (quantité de matière recherchée, activité)/quantité totale    Cf C131 ou C132, bonnes pratiques
                                             la purification                   de molécules, avant et après la purification                                   de manipulation du
                                                                                                                                                              spectrophotomètre ou tout autre      2
                                                                                                                                                              techniques de dosages spécifiques.


C141 Conduire des opérations            a    Préparation des réactifs et de    Réalisation correcte d'une dilution (suspension bactérienne par exple),
        d’extraction d’ADN ou                l'échantillon conforme aux        préparation correcte d'une colonne et des réactifs.
        d’ARN                                contraintes techniques                                                                                                                                2


                                        b    Organisation spatio-temporelle Respect : temps d'incubation, vitesse centrifugation, T°C du protocole.
                                             et réalisation de la           Récupération de la bonne fraction à chaque étape. Manipulation correcte du
                                             manipulation et des contrôles spectrophotomètre.                                                                                                      3
                                             de pureté correctes


                                        c    Obtention d’extraits de pureté Pureté de l'échantillon du candidat dans l'intervalle des essais du laboratoire Etude A260nm/A280nm
                                             suffisante                     et/ou moyenne des essais candidats.                                                                                    1

                                        d    Manipulations dans des        Respect des BPM concernant la source d'ADN (bactéries, cellules            Désinfection microbienne du
                                             conditions respectant la      eucaryotes). Respect des BPM concernant l'utilisation phénol, chloroforme. matériel. Utilisation hotte chimique,
                                             protection de l’environnement                                                                            gants, poubelle spécifique phénol…           2
                                             et du manipulateur


C142 Réaliser des techniques            a    Préparation et aliquotage des     Réalisation correcte d'un mix, dilution d'un réactif, ADN ajouté en dernier,
        d’amplification génique              réactifs et de l'échantillon      manipulation dans la glace, mélange des réactifs suivi d'une
        (PCR)                                conformes au protocole            microcentrifugation, principe de la marche en avant (éviter contamination                                           2
                                                                               avec ADN cible)




                                                                                                          Page 3
       (PCR)


                                   b    Enchaînement adéquat des        Programmation et utilisation correcte du thermocycleur, bonne position du      Dans utilisation correcte du
                                        opérations, réglage cohérent du tube sur la plaque si gradient de température, tube bien fermé.                thermocycleur respect des consignes
                                        thermocycleur et réalisation                                                                                   concernant le couvercle
                                        minutieuse de chacune des                                                                                                                            3
                                        étapes de la manipulation


                                   c    Obtention de produits            Résultats conformes à ceux attendus et témoin négatif correct
                                        d’amplification non                                                                                                                                  1
                                        contaminés
                                   d    Manipulations dans des        Utilisation du PSM, cônes à filtre
                                        conditions respectant la
                                        protection de l’environnement                                                                                                                        1
                                        et du manipulateur


C143   Analyser et/ou quantifier   a1   Préparation convenable des       Préparation correcte des extraits à analyser : si coupure avec des enzymes
       et/ou des fragments              supports, matériels, témoins.    de restriction : pipetages corrects, choix correct du tampon de coupure,
       nucléotidiques par des                                            mélange, centrifugation, respect du temps et température d'incubation,
       techniques                                                        utilisation de matériel sans DNAse, maintien des enzymes de restriction
       électrophorétiques                                                dans la glace. Dans tous les cas : addition tampon de charge (volumes                                               2
                                                                         corrects), mélange, centrifugation



                                   a2   Préparation convenable des       Préparation du gel : utilisable ou non. Positionnement du gel dans la cuve
                                        supports, matériels, témoins.    : correct ou non, préparation d'une dilution du tampon d'électrophorèse                                             3

                                   b    Réalisation raisonnée et         branchement de la cuve au générateur : correct ou non, qualité des dépôts :
                                        minutieuse de chacune des        résultats corrects après coloration, programmation du générateur :
                                        étapes de la manipulation        respect des consignes de voltage et temps migration, sécurité électrique et
                                        intégrant les contraintes de     chimique : port de gants si BET dans gel.                                                                           3
                                        sécurité électrique, chimique,
                                        biologique


                                   c    Mise en place d'un système       Manipulation correcte du BET : gants, poubelle spécifique
                                        approprié d'élimination des                                                                                                                          1
                                        déchets
                                   d    Exploitation pertinente des       Analyse des témoins, évaluation de la taille des fragments nucléotidiques : 2 points si analyse de fragments de
                                        gels obtenus à l'issue d'une      courbe, logiciel informatique. Si cartographie de restriction : logique de  PCR ; 3 points si cartographie de
                                        analyse critique de la qualité et l'analyse                                                                   restriction                            3
                                        de la cohérence des résultats




                                                                                                   Page 4
 C144   Analyser et/ou identifier   a   Préparation convenable des       Réalisation correcte d'une dilution d'une solution, positionnement dans le
        des séquences nucléiques        réactifs et des supports         bon sens des membranes; possibilité d'utilisation cuve électrotransfert,                                               2
        par des techniques                                               montage pour transfert semi humide...
        d’hybridation moléculaire
                                    b   Préparation de l'échantillon     Réalisation et identification correctes des dépôts sur membrane, on peut       Pour les dépôts: réplique réalisée en
                                        conforme aux contraintes         aussi avoir un gel d'agarose pour le transfert, dénaturation de l'ADN cible,   douceur sans repositionnement de la
                                        techniques                                                                                                      membrane, ou blots sous forme de        1
                                                                                                                                                        dépôts fins concentrés


                                    c   Réalisation raisonnée et      Respects des temps et des températures d'incubation, faible consommation
                                        minutieuse de la manipulation des réactifs coûteux, bonne utilisation du matériel permettant la révélation                                              3
                                                                      du signal final.
                                    d   Lecture correcte des résultats   Distinction du bruit de fond , évaluation correcte des résultats par
                                                                         comparaison avec la lecture par l'examinateur.                                                                         2

                                    e   Exactitude des résultats et     Validation de la manipulation après exploitation des témoins en premier,
                                        pertinence de leur exploitation exactitude des résultats en comparaison avec les résultats du groupe,                                                   3
                                                                        exploitation cohérente.
                                    f   Manipulations dans des        Bonnes pratiques de manipulation d'échantillons microbiens et biologiques,
                                        conditions respectant la      bonne gestion des déchets chimiques.
                                        protection de l’environnement                                                                                                                           1
                                        et du manipulateur


C151    Préparer les réactifs,      a   calcul et exécution correcte     Calcul juste et justifié, BPM de la balance, bonne gestion du produit          niveau plan, tare, portes fermées,
        milieux de culture et           d'une pesée                      (ouverture réduite du flacon, pas de poudre réintroduite dans le flacon,       nettoyage balance,...                   2
        matériels nécessaires aux                                        dessiccateur….), cf biochimie
        cultures cellulaires        b   calcul d'un volume et            Calcul juste et justifié, BPM des pipettes et récipients de mesure.            Evaluation soit de (b) soit de (e)
                                        exécution correcte du                                                                                                                                   2
                                        prélèvement
                                    c   exécution correcte d'une         Si nécessaire, agitation, chauffage non dénaturant. La solution utilisée par
                                        dissolution                      la suite doit être parfaitement limpide.                                                                               1

                                    d   exactitude de l'ajustage                                                                                                                                1
                                    e   exécution correcte d'une         Volumes corrects, BPM de la pipette                                            Redondant avec (b) donc, soit
                                        dilution                                                                                                        évaluation de (b) soit de (e).          2

                                    f   étiquetage correcte des          nom du milieu, date fabrication, (pictogramme de sécurité si habitude du       Utilisation de cet indicateur pour
                                        préparations réalisées           laboratoire), N°de manipulation ou initiales du préparateur.                   l'annotation des plaques de cultures
                                                                                                                                                                                                2
                                                                                                                                                        cellulaires multipuits.

                                    g   vérification de la qualité des   Vérification date limite d'utilisation, vérification visuelle du produit ou de Exemple: pipette avec emballage
                                        réactifs, des milieux et des     la solution, vérification des pH, vérification de l'intégrité des emballages du perforé à changer.                     2
                                        matériels préparés               matériel stérile.
                                    h   respect du temps imparti         avec + 20% toléré.
                                                                                                                                                                                                1




                                                                                                    Page 5
C152 Obtenir une culture             a    bonne maîtrise de la gestuelle     Manipulations en conditions d'asepsie.( cf a3 du C154)                           Les techniques utilisées sont très
        primaire d'origine animale        spécifique aux manipulations                                                                                        différentes en fonction de l'origine
        ou végétale                       de cultures                                                                                                         animale ou végétale du prélèvement,    3
                                     b    exécution correcte du              Rapide, en conditions d'asepsie, non traumatisante pour l'explant                de l'origine de l'organe donneur des
                                          prélèvement                                                                                                         cellules. S'adapter aux habitudes du   2
                                     c    réalisation convenable des         Respect du protocole                                                             laboratoire.
                                          traitements à appliquer                                                                                                                                    2
                                     d    ensemencement du milieu de         Respect de l'orientation (végétaux), nombre de cellules vivantes (animales
                                          culture                            Cf C153 c et d)).                                                                                                       3
C153 Etudier et quantifier un        a    Bonne maîtrise de la gestuelle Bonnes pratiques de manipulation sous PSM respectées (désinfection plan              On tolère une faute mineure. On
        effet cytotoxique                 spécifique aux manipulations de travail en début et fin de manipulation, du matériel, lavage des mains,             tolère que les mains soient en
        Attention C153 et C155            de cultures cellulaires        pas de bijou, manches relevées ( variable selon centres), bonne organisation         situation de contamination mineure 2
        ont le même titre mais ne                                        du plan de travail en zones distinctes, mains jamais en situation de risque          fois.                                  3
        concernent pas les mêmes                                         de contamination de l'échantillon, tubes débouchés à l'avance (bouchon
        manipulations. C153                                              retourné), élimination correcte des déchets, gestion raisonnée du matériel
        concerne un                                                      pour respecter l'asepsie.
        dénombrement avec ou              Maîtrise technique des             Dilution correcte (calcul et réalisation) de la suspension cellulaire, mise en
                                  b
        sans colorant vital lors          différentes étapes préalables      hématimètre correcte (en une fois, pas de bulle, remplissage correct),
        d'un repiquage par                au dénombrement                    homogénéisation systématique de la suspension cellulaire avant son                                                      2
        exemple. Le terme effet                                              utilisation.
        cytotoxique n'est pas
        approprié ici.            c       Examen microscopique               Réglage correct du microscope (luminosité, contraste, netteté);
                                          qualitatif de la suspension        modification correcte de la dilution effectuée en fonction de la possibilité
                                          cellulaire et réactions adaptées   de compter ou non les cellules avec l'hématimétre utilisé. Répartition                                                  1
                                          au résultat                        homogène des cellules sur le quadrillage.

                                     d1   Détermination exacte du            Comptage correct des cellules totales dans un volume donné par rapport au        Volume compté variable en f( de la
                                          nombre total de cellules .         comptage de l'examinateur. Règles de comptage correctes (comptage > au           Ccellulaire de l'échantillon). Même
                                                                             nombre minimal significatif, répartition représentative de la surface de         partie du volume compté par le
                                                                             l'hématimètre, nombre total exact par rapport au comptage de l'examinateur       candidat et l'examinateur. Règles de   3
                                                                             à +/- 10%). Si d1 et d2 sont évalués le nombre total de points max ne            comptage indiquées précisément sur
                                                                             doit pas dépasser 4 points.                                                      la copie laissées à côté du
                                                                                                                                                              microscope.
                                     d2   Détermination exacte de la      Comptage correct des cellules viables et mortes dans un volume donné par            Même partie du volume compté par
                                          proportion de cellules viables. rapport au comptage de l'examinateur, à +/- 10% maximum. Si d1 et d2                le candidat et l'examinateur. Règles
                                                                          sont évalués le nombre total de points max ne doit pas dépasser 4                   de comptage indiquées précisément      2
                                                                          points.                                                                             sur la copie laissées à côté du
                                                                                                                                                              microscope.
                                     e    Calcul exact et réalisation de     Calcul de la concentration cellulaire juste (de cellules totales et/ou de        Autres calculs possibles: calcul
                                          l'ajustage                         cellules vivantes). Calcul correct du volume de suspension cellulaire à          correct du nombre de cellules par
                                                                             utiliser. Dilution de la suspension cellulaire (volumes) correcte.               volume de suspension cellulaire…       2




                                                                                                        Page 6
 C154 Entretenir et conserver une a1 Réalisation correcte des étapes Observation macroscopique et microscopique des boîtes avant trypsination Afin de ne repiquer que les boîtes au
              culture cellulaire         de repiquage: examen initial                                                                                        bon % de confluence, et ne pas         1
                                                                                                                                                             repiquer des boîtes contaminées.
                                    a2   Réalisation correcte des étapes Suivi efficacité trypsination par examen macro et/ou microscopique des
                                         de repiquage: trypsination      boîtes, respect du protocole (volumes et temps d'incubation), tapotement                                                   3
                                                                         des boîtes
                                    a3   Réalisation correcte des étapes Bonnes pratiques de manipulation sous PSM respectées (désinfection plan             On tolère une faute mineure. On
                                         de repiquage: asepsie           de travail en début et fin de manipulation, du matériel, lavage des mains,          tolère que les mains soient en
                                                                         pas de bijou, manches relevées ( variable selon centres), bonne organisation        situation de contamination mineure 2
                                                                         du plan de travail en zones distinctes, mains jamais en situation de risque         fois.                                  3
                                                                         de contamination de l'échantillon, tubes débouchés à l'avance (bouchon
                                                                         retourné), élimination correcte des déchets, gestion raisonnée du matériel
                                                                         pour respecter l'asepsie.

                                    b    respect du protocole de          Préparation correcte du milieu de conservation. Identification complète du La préparation des cellules pour
                                         préparation des cellules         tube de conservation (nom cellules, concentration cellulaire viable, date, conservation nécessite également les
                                         permettant leur conservation     nombre de repiquages, N° manipulation ou initiales). Respect du protocole étapes a1 à a4                                  2
                                                                          ( par exemple BPM de la centrifugeuse ).

 C155 Etudier et quantifier un      a1   Ensemencement correct de la      Réalisation correcte des dilutions de la molécule à tester. Bonne application Nombre de points max = 2 si déjà
         effet cytotoxique               microplaque: préparation et      des consignes de dilutions d'usage dans le centre.                            évalué en immunologie en BTS                3
         Attention C153 et C155          dilution de l'échantillon                                                                                      première année.
         ont le même titre et ne         Ensemencement correct de la Respect du nombre de cellules vivantes ensemencées. Homogénéisation
                                    a2
         concernent pas le même          microplaque: réalisation d'une préalable de la suspension cellulaire. Calculs des volumes et pipetages
         type d'études. C155                                                                                                                                                                        3
                                         suspension cellulaire adéquate corrects.
         concerne les études de
         cytotoxicité sur des
                                    a3   Ensemencement correct de la      Nature (+ ou -) / Rôles précis ( renseignements apportés sur les réactifs, les
         cultures cellulaires.
                                         microplaque: conception et       cellules ) / Composition détaillée correcte vérifiée à posteriori sur la copie /                                          2
                                         réalisation des témoins          Tous les résultats attendus corrects.
                                    a4   Ensemencement correct de la      Tous les puits correctement remplis par examen visuel général de la plaque Plan de plaque peut être évalué en
                                         microplaque: suivi du            ( Volume, couleur, trouble ).                                              C151 f                                         2
                                         protocole de répartition
                                    b1   Lecture raisonnée                BPM du lecteur de microplaques ou autres appareils de lecture, selon
                                                                          l'habitude du centre.                                                                                                     2

                                    b2   Exploitation des résultats       Validation des témoins en cohérence avec les résultats du candidat.
                                                                          Conclusion sur la valeur de la cytotoxicité.                                                                              2

                                    b3    Bonne détermination des         Résultats du candidat conformes aux cibles (expériences du laboratoire
                                         valeurs de l'effet cytotoxique   et/ou médianes des étudiants)                                                                                             2


Compétences transversales:C23 redondante avec C44, privilégier l'utilisation de C44. C24 à laisser aux collègues des autres matières ou pour BTS première année BCM.
C42 à utiliser.C52 peut être utilisée pour les tests Elisa, Laurell, Mancini, cytotoxicité, en biomoléculaire en exploitation semi-log des marqueurs de taille.
Répartition du nombre de points par épreuve: Rendre la somme des points égale à 20 avec si possible autant d'indicateurs à 3 points que d'indicateurs à 2 points et 1 point
soit par exemple 3x3 + 4x2 + 3x1 ou 3x3 + 3x2 + 5x1




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