M�todos de estudio de enfermedades �seas

							Métodos de estudio de
 enfermedades óseas
Algunas consideraciones
  sobre la Biopsia ósea

      Prof. Dr. Julio Carzoglio
  Cátedra de Anatomía Patológica
           Biopsia ósea
• Examen macroscópico
  – Sólo fragmentos aislados
    • Es necesario informar el sitio de origen
  – Cuando se toman de diferentes sitios
    el cirujano debe identificar
    procedencia de cada uno
• Piezas de resección ósea
    Mixoma




G.P.B., mujer, 27 años   Dr. Kertesz
            Biopsia ósea
• Piezas de resección ósea
  – Documentación RX y fotográfica
  – Corte con sierra a 3-5 mm
  – Mapeado de la lesión
• Fijación en formol al 10 %, si es posible
  tamponado (buffer)
  – Tiempo de fijación de 12 horas (adecuado
    para IHQ)
• Muestras pequeñas de hueso esponjoso:
  – Líquido de Bouin (fija y decalcifica
    suavemente)
        Mixoma




M.A., mujer, 46 años   Dra. S. Vázquez
          Recidiva de QQO




M.T.J., hombre, 25
años Dr. Acosta
Osteosarcoma   JC 03-4635
Tumor de células gigantes
          Biopsia ósea
• Decalcificación ósea
  – Sol de ácido nítrico al 5 %
  – Volumen de solución: 10-20 veces el
    volumen del tejido
  – El ácido es neutralizado por el Ca++
    por lo cual debe ser cambiado 2
    veces al día
  – Conviene utilizar agitador de tejidos
          Biopsia ósea
• Para obtener buena coloración
  – Lavar bien el ácido con agua corriente
• Con este método es imposible valorar la
  cantidad y cualidad de la mineralización
  ósea
• Para valorar la mineralización ósea se
  requiere inclusión en plástico
  (metil-metacrilato)
• Para M.E.: fijación en paraformaldehido
  o glutaraldehido
  – Decalcificación con EDTA
      Biopsia ósea
• Tinciones
• Colágeno:
  – se demuestra con tricrómico
   (técnica de Van Gieson o Masson)
  – Microscopía de luz polarizada
• Proteoglicanos
  – Alcian blue
  – Azul de toluidina
  – PAS
Actividad
osteoblástica
Actividad
osteoclástica
Ameloblastoma
uniquístico
marsupializado
Sarcoma óseo
Displasia
fibrosa
          Biopsia ósea
• Tinciones
• Componentes minerales
 – Micro-radiografía de tejido
 – Solo en material no desmineralizado
   • Rojo alizarin (tiñe de rojo el Ca++ de la
     hidroxiapatita)
   • Von Kossa: negro el fosfato de Ca++ y
     otras sales de Ca++ (carbonato, oxalato)
Von Kossa




Goldner
            Biopsia ósea
• Estudios histoenzimáticos de
  osteoblastos y osteoclastos
  – fosfatasa alcalina
  – fosfatasa ácida tartrato-resistente
  – en tejidos “no fijados”
• IHQ: para estudios de diferentes tipos
  de colágeno y para identificación de
  tumores
  – El material desmineralizado es adecuado
Tumor fusocelular
Tumor de células
fantasmas
calcificante
(Gorlin sólido)
Tricrómico de Masson




Citoqueratina AE1/3
          Biopsia ósea
• Marcación fluorescente con
  tetraciclina
  – Los niveles marcados reflejan la
    interfase de hueso mineralizado-
    osteoide
             Biopsia ósea
• Biopsia intraoperatoria
  – Dos razones:
     • Diagnóstico preliminar
     • Evaluar adecuación del especimen para estudio
       ulterior
  – Limitación: tejido calcificado
  – Utilidad en valoración de márgenes de
    tejidos blandos
  – Determinación entre metástasis,
    inflamación o necrosis (en lesiones líticas,
    blandas)
           Biopsia ósea

• Si se plantean estudios moleculares
  – Hibridización in situ
  – Reacción en cadena de polimerasa (PCR)
• No se puede desmineralizar el material
  – Los AANN son degradados por la
    decalcificación