Cuaderno de laboratorio by FACGtyN

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									PROYECTO INTEGRADO
  DE LABORATORIO
   CURSO 4º ESO
  DEPARTAMENTO
BIOLOGÍA-GEOLOGÍA
   BLOQUE I
TÉCNICAS GENERALES
                             PRÁCTICA 3 MANEJO DEL MICROSCOPIO ÓPTICO

MATERIAL

Microscopio ÓPTICO

Porta y cubre

Papel de periódico y fotocopia en la que aparezcan las partes del microscopio.

Pan de molde y placa de cultivo (para preparar la práctica siguiente.)

Nota. Este día se preparará la siguiente práctica (observación del moho del pan) por lo que el alumnado
deberá coger un trozo de pan de molde y humedecerlo. Después exponerlo durante varios minutos al
aire, colocarlo en el interior de una placa de cultivo cerrada y sitúar la placa en un lugar cálido y oscuro
donde permanecerá hasta la semana siguiente.

REALIZACIÓN DE LA PRÁCTICA

1-Identifica en tu microscopio las partes que aparecen en el esquema y aprende sus nombres para que te
resulten conocidas cuando más adelante nos refiramos a ellas.

2-Montaje de una preparación ficticia:

      Corta un trozo de periódico (más o menos cuadrado de 1 cm de lado) en el que se encuentre
       alguna letra.
      Echa un par de gotas de agua en el centro del porta y sobre ellas deposita el trozo de periódico sin
       que se arrugue.
      Coloca el cubre sobre la muestra poniendo cuidado de que no se formen burbujas. Para ello
       debemos bajarlo gradualmente.

3-Observación de la preparación (enfoque del microscopio):

Mover el espejo, diafragma y condensador hasta conseguir una iluminación adecuada.

Colocar la preparación sobre la platina sujetándola con las pinzas y observando que la letra esté derecha.

Elegir el objetivo de MENOR AUMENTO girando el revólver.

    Mirando lateralmente (no por el ocular) gira el macrométrico para subir la platina lo más posible;
     pero sin que llegue a tocar la preparación al objetivo.
    Observando por el ocular, mover el mismo tornillo MUY DESPACIO y en sentido contrario, hasta
     obtener una visión suficientemente destacada de la muestra.
    Una vez realizado éste enfoque aproximado, utilizar el tornillo micrométrico para un ajuste
     perfecto del enfoque.
    ¿En qué posición se ve la letra?............................................................................
    Mueve la preparación hacia la derecha. ¿Hacia qué lado se mueve la letra? ………………. Y si mueves
     la preparación hacia la izquierda ¿hacia dónde se mueve la letra?................

Este fenómeno puedes observarlo moviendo la preparación hacia adelante y hacia atrás.

    Gira el revólver para cambiar a un objetivo de MAYOR AUMENTO (notarás que lo has colocado en
     el lugar debido cuando llegues a un ligero tope y además se veas el campo totalmente iluminado).
     Ajusta el enfoque con el micrométrico.
    ¿Cambia la letra de posición con respecto a la visión con el objetivo anterior?............... Por
     consiguiente: “LA IMAGEN AL MICROSCOPIO ÓPTICO SIEMPRE SE VE …………….”
    Con este segundo objetivo ¿ves la letra entera o por el contrario ves parte de
     ella?................................................ En éste caso ¿cómo es el área de observación mayor o
     menor?..................................... Por tanto:

“A MÁS AUMENTO LA IMAGEN SE VE ………………………..GRANDE PERO EL CAMPO VISUAL
ES……………………………”

Anota lo siguiente:

El ocular del microscopio utilizado tiene……………………..aumentos.

El primer objetivo tiene……………. aumentos y el segundo……………..aumentos.

Por lo tanto:

En la primera observación la letra se vio con ………………………aumentos.

En la segunda observación la letra se vio con ………………..aumentos.

Utiliza de la misma forma, otro objetivo mayor.

ACTIVIDAD

Nombra cada una de las partes del microscopio óptico.
                                                     PRÁCTICA 4.

                        MANEJO DE LA LUPA. OBSERVACIÓN DE HONGOS CON LUPA BINOCULAR.

                           ESTUDIO DEL MOHO DEL PAN. OBSERVACIÓN DE UN CHAMPIÑON

MATERIAL

Lupa BINOCULAR y fotocopia en la que aparezcan las partes de la lupa.

Pan de molde, agua y champiñones.

Placa de cultivo y lancetas.
Cuchilla o cuchillos.

Material para la próxima práctica: lechuga, espinacas, hortalizas, hojarasca marchitas y sucias.

Se llena un vaso con agua corriente. Agregar unas hojas de hortalizas, lechugas, acelgas, hojarasca, marchitas y
sucias. Se dejará hasta la próxima semana. Se debe evitar los rayos directos del sol y temperaturas demasiado altas
o bajas. El recipiente no se debe cerrar herméticamente.

REALIZACIÓN DE LA PRÁCTICA: OBSERVACIÓN DEL MOHO DEL PAN

Observación del moho del pan. El punto 1 deberán hacerlo la semana anterior.

Debes coger un trozo de pan de molde y humedecerlo. Después exponlo durante varios minutos al aire, colócalo
en el interior de una placa de cultivo cerrada y sitúa la placa en un lugar cálido y oscuro.

Primero, se depositan sobre el pan esporas microscópicas presentes en el aire. Al encontrar las condiciones de
humedad apropiadas, germinan. Poco después se forman las hifas, que no poseen tabiques. El conjunto de hifas
que se desarrollan se denomina micelio. Al cabo de unos días e micelio cubrirá la superficie del pan o la fruta.

            Coge con una lanceta una pequeña muestra del moho y, después de colocarla sobre una placa,
             obsérvala con la lupa binocular.

ACTIVIDAD

¿Qué observas? Dibújalo.

Realiza dos dibujos, uno de observación directa y otro de la visión a través de la lupa.

Nota: Las hifas semejan pequeñas raíces, son los rizoides, que penetran en el interior del pan, donde absorben los
nutrientes tras segregar enzimas digestivas, que son las responsables del color y olor característicos de los mohos.

Observarás la presencia de puntos negros, son los esporangios, situados en el borde de una hifa aérea, que se
desarrolla por encima de los rizoides. Cuando el esporangio madura libera unas 50.000 esporas, que son
transportadas por el aire hasta que encuentran un lugar apropiado para germinar.

REALIZACIÓN DE LA PRÁCTICA: OBSERVACIÓN DE UN CHAMPIÑÓN

En las setas el micelio es subterráneo. La parte aérea, muy desarrollada, constituye el aparato reproductor del
hongo. En él se distinguen dos partes: pié y sombrerillo.

Corta con la cuchilla el sombrerillo y obsérvalo bajo la lupa binocular. En la cara inferior del sombrerillo aparecen
diminutos poros en las laminillas donde se forman la esporas. Separa con unas pinzas alguna laminilla y obsérvala
con el binocular.

ACTIVIDAD

       Dibuja una lupa binocular indicando sus partes.
   Realiza dos dibujos, uno de observación directa y otro de la visión a través de la lupa.
                                 FICHA DE TRABAJO PARA EL ALUMNADO
ACTIVIDAD

Nombra cada una de las partes del microscopio óptico.




ACTIVIDAD

      Dibuja una lupa binocular indicando sus partes.

      Realiza dos dibujos, uno de observación directa y otro de la visión a través de la lupa.
                                                  PRÁCTICA 5

                                OBSERVACIÓN Y TINCIÓN DE PROTOZOOS
MATERIAL

Microscopio óptico /    Pipeta /         Portas y cubres    /      Vaso de precipitado            /Hojarasca

Azul de metileno, rojo neutro / Cuentagotas

REALIZACIÓN DE LA PRÁCTICA. PRIMERA PARTE: OBSERVACIÓN DE PROTOZOOS SIN TEÑIR

Se llena el vaso con agua corriente. Agregar unas hojas de hortalizas, lechugas, acelgas, hojarasca, marchitas y
sucias. Se deja durante una semana en el laboratorio. (Se realizó la semana anterior). Se debe evitar los rayos
directos del sol y temperaturas demasiado altas o bajas. El recipiente no se debe cerrar herméticamente.

Con la pipeta, tomar unas gotas de líquido de la infusión en las cercanías de los restos vegetales. Con las pinzas
finas puede tomarse algún residuo vegetal, muy pequeño, en avanzado estado de descomposición. Se deposita
el producto obtenido en un porta colocando el cubre encima dejándolo caer como se cierran las tapas de un
libro, para evitar que se formen burbujas de aire. Los bordes del cubre se secan con una tira de papel de filtro.

Se toma una gota de agua de la infusión con un cuentagotas y se deposita sobre el portaobjetos. Si la gota se
toma de la superficie, habrá mayor abundancia de paramecios. Si se toma del fondo, predominarán las amebas.

ACTIVIDAD

Trata de identificar todos los organismos que encuentres, haz un dibujo de ellos y anota los aumentos con que
los has observado.

REALIZACIÓN DE LA PRÁCTICA. SEGUNDA PARTE: TINCIÓN DE PROTOZOOS.

1. Se disuelve en la infusión un colorante para microscopia.

Los más comunes son el azul de metileno, el verde de metilo acético o el lugo, pero tienen el inconveniente de
mata a los infusorios y no se puede observar su movimiento. El rojo neutro los tiñe sin matarlos. (véase nota)

Se toma una gota de la infusión con un cuentagotas y se deposita en el portaobjetos.

2. Se enfoca con el microscopio aumentando sucesivamente los aumentos hasta llegar a los adecuados que
   permitan una visión nítida. Se busca una zona en la que haya suficiente cantidad de infusorios. ( Conviene
   estar observando un rato hasta que el ojo se hay acostumbrado a descubrir los portozoos).

3. ¿Se observan distintas clases de protozoos?

ACTIVIDAD

Dibújese aproximadamente lo visto.

NOTA

Los tintes vienen normalmente en polvo o hay que hacer alguna mezcla. Conviene tener alguna orientación
para el caso de que haya que prepararlos.

Azul de metileno

Si se dispone de azul de metileno en polvo, se disolverá en un tubo de ensayo con agua una punta de paleta o
bisturí hasta que la disolución tenga un aspecto parecido a la tinta. (Hay que tomar poquísimo polvo de azul de
metileno).

Rojo neutro y verde de metilo

Si están en polvo disolver en agua como en el caso anterior. Para el verde de metilo añadir unas gotas de ácido
acético (o vinagre).
TÉCNICAS DE SEPARACIÓN
                             TÉCNICAS DE SEPARACIÓN

Decantación. Consiste en separar mezclas heterogéneas de líquidos o líquidos y sólidos que tengan
densidades distintas. Al quedar en reposo los materiales se depositan distintas alturas.

Esta técnica está basada en una propiedad específica de los cuerpos llamada densidad que es el
cociente entre la masa y el volumen.

Filtración. Consiste en separar sustancias de una suspensión. El filtro permite el paso del líquido (o
gas) e impide el de las partículas sólidas.

Basado en la propiedad específica de los cuerpos llamado estado físico de la materia.

Destilación. Consiste en separar los componentes de una disolución líquida cuyos puntos de
ebullición sean distintos. Al hervir se evapora la sustancia con el punto de ebullición más bajo.

Basada en el punto de ebullición.

Extracción. Consiste en separar mezclas heterogéneas. Basad en la solubilidad en un disolvente.

Cromatografía. Consiste en arrastrar cada sustancia de la mezcal por un disolvente a lo largo de una
sustancia absorbente (papel de filtro) a una velocidad distinta.

Basado en la propiedad específica de los cuerpos llamada solubilidad.
                                                    PRACTICA 6

                                      CÁLCULO DE VOLUMEN EN UNA MEZCLA

RECUERDA:

A diferencia de los compuestos, una mezcla está formada por la unión de sustancias en cantidades variables y que
no se encuentran químicamente combinadas. Por lo tanto, una mezcla no tiene un conjunto de propiedades únicas,
sino que cada una de las sustancias constituyentes aporta al todo sus propiedades.
Las mezclas están compuestas por una sustancia, que es el medio, en el que se encuentran una o más sustancias en
menor proporción. Se llama fase dispersante al medio y fase dispersa a las sustancias que están en él.

De acuerdo al tamaño de las partículas de la fase dispersa, las mezclas pueden ser homogéneas (las disoluciones) o
heterogéneas (emulsiones, suspensiones y coloides).

ACTIVIDAD 1

Seguro que conoces muchos ejemplos de mezclas, nombra diez y clasifícalas en homogéneas o heterogéneas.

EJEMPLOS: la sangre, el agua del mar, el aire,…..

        Homogéneas                                                            Heterogéneas

ACTIVIDAD 2
                                                    PRÁCTICA 7

                         SEPARACIÓN DE COMPONENTES DE UNA MEZCAL POR FILTRACIÓN

RECUERDA:

Independiente del tipo de mezcla, los componentes de la misma, pueden ser separados con cierta facilidad a través
de las técnicas de laboratorio, sin que cambien las propiedades físicas y químicas que estos tienen.

Filtración: A través de materiales porosos como el papel filtro, algodón o arena se puede separar un sólido que se
encuentra suspendido en un líquido. Estos materiales permiten solamente el paso del líquido reteniendo el sólido.
ACTIVIDAD 1: Cómo hacer un filtro sencillo

Materiales: Papel del filtro, tijeras, embudo




ACTIVIDAD 2: Cómo hacer un filtro de agua

Materiales:

Dos vasos de yogur con orificios pequeños en la base, grava gruesa, grava fina, arena, dos vasos de precipitado,
dos embudos.

Procedimiento:




ACTIVIDAD 3

Remueve agua lodosa y pon 100 cc en una probeta. Échalos a través de los distintos tipos de filtros.

    a) ¿Cuál de los filtros es mejor?
    b) ¿En qué te has basado para decidir cuál es el mejor filtro?
                                                                 PRÁCTICA 8

                            SEPARACIÓN DE LOS COMPONENTES DE UNA MEZCA: DECANTACIÓN

INTRODUCCIÓN

La decantación sirve para separar una mezcla heterogénea y de componentes de distintas densidades. En nuestro experimento usaremos
dos componentes líquidos de distintas densidades, agua y aceite, evidentemente el aceite es más denso que el agua y debido a ello el aceite
queda arriba cuando se separan en el embudo de decantación.

MATERIALES

Embudo de decantación                   3 Vasos de precipitado                  Probeta graduada

Soporte universal                       Agua y aceite                           Varilla de vidrio

Nuez doble. Se coloca en el palo vertical del soporte universal y así sostiene la pinza inmóvil.

Pinza metálica. Se coloca en la nuez doble y sirve para sujetar el embudo de decantación.

El montaje debe quedar como aparece en las fotografías siguientes:




 METODOLOGÍA

     1.   Primero montaremos el embudo como se indica en la fotografía.
     2.   Si el embudo que vamos a utilizar es de 250 ml debemos medir 100ml de cada componente con la probeta, pero si el embudo es
          pequeño y su capacidad es de 150ml, la cantidad de los líquidos será solo de 50ml cada uno. Dichos líquidos se añaden en un vaso
          de precipitado y se mezclan bien con una varilla de vidrio.
     3.   Añadimos la mezcla al embudo de decantación y esperamos a que ambos líquidos se separen.
     4.   Una vez separados, vamos a vaciar el embudo. Para ello colocamos un vaso de precipitado debajo del embudo y con mucho
          cuidado abrimos la llave del embudo para que caiga el primer líquido y una vez que haya terminado de caer cerramos la llave para
          que no se cuele ni un milímetro del otro líquido. Una vez que tenemos el agua en nuestro vaso de precipitado, ahora hacemos lo
          mismo para el aceite, colocamos el otro vaso debajo del embudo de decantación y abrimos la llave para que el aceite caiga.

ACTIVIDADES

     1.   Observa que las medidas de agua y aceite ¿cuántos mililitros obtienes de cada líquido?
     2.   ¿Por qué ambos líquidos no se mezclan?
     3.   Dibuja un embudo de decantación.
                                         PRÁCTICA 8. SEGUNDA PARTE

                         SEPARACIÓN DE LOS COMPONENTES DE UNA MEZCA: FILTRACIÓN II

INTRODUCCIÓN

La mezcla está formada por sal y arena, es una mezcla heterogénea, se pueden distinguir sus dos componentes. La
arena no es soluble en agua, la sal si lo es.

MATERIALES

       Embudo

       Vaso de precipitado

       Base y soporte

       Varilla de vidrio para agitar

       Papel para fabricar el vidrio

METODOLOGÍA

    1. Se prepara un papel de filtro y se elabora un filtro que se coloca en el embudo

    2. El embudo se coloca en el soporte vertical.

    3. Se echa la mezcla de sal y arena en un vaso de precipitado y mezclamos.

    4. Se añade agua a la mezcla (la sal se disuelve en agua y la arena permanece en el fondo). Con la ayuda de
       una varilla de vidrio removeremos la nueva mezcla hasta que la sal quede completamente disuelta en el
       agua.

    5. Para separar la disolución de sal en agua se recurre a la filtración donde la arena queda retenida en el papel
       de filtro y la sal puede separarse del agua por evaporación del disolvente.

Si disponemos de cristalizador haremos lo siguiente:

    a) Colocaremos el embudo en el soporte y debajo colocaremos el cristalizador. Se echa la mezcla y se espera a
       que caiga todo el agua al cristalizador. Esto ocurre porque las disoluciones no pueden ser separadas
       mediante el método de filtración.

    b) Dejamos el cristalizador a temperatura ambiente y se espera a que el agua se evapore, quedando en el
       cristalizador la sal.

    c) Mediante estos dos métodos (filtración y cristalización) es posible separar la mezcla de sal y arena.
                                                PRÁCTICA Nº9
                                     EXTRACCIÓN DE YODO CON GASOLINA

                      SEPARACIÓN DE LOS COMPONENTES DE MEZCAS HOMOGÉNEAS

La solubilidad de una sustancia es una propiedad que depende del disolvente que interviene. La distinta solubilidad
que una sustancia presenta según el disolvente, es la base del proceso de separación de sustancias que se llama
extracción. Mediante esta técnica se extraen las esencias y perfumes de las plantas y flores, el café y en general las
infusiones.

OBJETIVO
Extraer el yodo disuelto en el agua utilizando la propiedad de que el yodo es más soluble en gasolina que en agua.
Después bastará dejar evaporar la gasolina para obtener el yodo puro.

MATERIAL
        Dos tubos de ensayo
        Un vidrio de reloj
        Yodo sólido
        Gasolina
        Agua

MÉTODO
    1.   Disuelve unos cristalitos de yodo en agua en un tubo de ensayo. ¿Qué color tiene la disolución?
    2.   Añade gasolina a la disolución anterior y agita la mezcla.
    3.   Deja reposar y observa que quedan dos capas. ¿Cuál queda arriba? ¿De qué color son cada una?
    4.   Separa la capa superior y recógela con cuidado en otro tubo de ensayo
    5.   Coloca una porción del líquido extraído en un vidrio de reloj y déjalo evaporar a temperatura ambiente. Se
         observará como se forman cristales de yodo

ACTIVIDAD
Escribe brevemente en tú cuaderno lo que has realizado y dibuja lo que has obtenido.
                                                PRÁCTICA Nº 10
              SEPARACIÓN DE LOS COMPONENTES DE LA CLOROFILA POR CROMATOGRAFÍA

OBJETIVO

Separar las sustancias componentes de la clorofila: xantofila, clorofila A, clorofila B y caroteno utilizando la
propiedad de que los componentes tienen diferente velocidad de difusión en el papel de filtro.

MATERIAL

       Un vaso de precipitado
       Una pajita
       Un mortero
       Papel de filtro (fase sólida)
       Alcohol etílico (eluyente)
       Hojas verdes

MÉTODO

    1. Toma unas hojas verdes (de yedra o espinacas), tritúralas en un mortero y añade una pequeña cantidad de
       alcohol etílico. Vierte un poco de esta disolución en una cápsula de petri y coloca un trozo de papel de
       filtro. Dóblalo de forma que quede vertical.
    2. Deja pasar un día y observa lo que ocurre. Comprobarás que se han separado cuatro bandas de diferente
       color que corresponden en orden descendente a : xantofilas (color amarilla), clorofila B (color verde
       oscuro), clorofila A (color verde claro) y carotenos (amarillo anaranjado)
    3. El montaje quedará de la siguiente forma:




ACTIVIDAD
Describe lo que has realizado y dibuja lo que has obtenido.
              SEPARACIÓN DE LOS COMPONENTES DE LA CLOROFILA POR CROMATOGRAFÍA II

         SEPARACIÓN DE LOS DIFERENTES COMPONENTES DE LA TINTA DE UNA ROTULADOR POR
                                       CROMATOGRAFÍA

INTRODUCCIÓN

La tinta está compuesta por la mezcla de varios compuestos de diferentes colores. Cada uno de ellos tiene una
solubilidad diferente en el etanol que vamos a utilizar.

MATERIALES

Papel de filtro

Vaso de precipitado.

Etanol

METODOLOGÍA

Hacemos una mancha con un rotulador en el papel de filtro.

Sujetamos la tira de papel con un lápiz y la colocamos sobre la boca de un vaso de precipitado e introducimos su
extremo en el etanol que hay en el fondo del mismo

El disolvente comienza a subir por el papel (capilaridad) y arrastra a cada componente de la mezcla a diferente
velocidad debido a la solubilidad diferente en cada caso, separando los colores.
BLOQUE II
CITOLOGÍA
                                            PRÁCTICA NÚMERO 11

                  OBSERVACIÓN DE CÉLULAS DE LA EPIDERMIS DE CEBOLLA (Allium cepa)

Introducción
Las células de la epidermis de las hojas internas del bulbo de cebollas, son de forma alargada y bastante
grandes. La membrana celular celulósica se destaca muy clara. Los núcleos son grandes y muy visibles, en
su interior se perciben granulaciones , son los nucléolos. El citoplasma tiene aspecto bastante claro, en el
que se distinguen algunas vacuolas grandes débilmente coloreadas

Material

Microscopio                Frasco lavador               Papel de filtro            Cubreobjetos
Portaobjetos               Bisturí                     Pinzas de disección         Trozo de cebolla
Cuentagotas                Caja de Petri               Colorante: verde metilo


Procedimiento
1. -Toma un trozo de cebolla y marca con incisiones del bisturí una pequeña cuadrícula en la parte interior

  del trozo de cebolla.

2.- Extrae con ayuda de la pinza un trozo de la fina película que hay entre las hojas de la cebolla.

3.- Pon una gota de agua en el portaobjetos y coloca encima la fina piel extraída. Procura que no se
arrugue. Ponle un cubreobjetos encima.

4.- Coloca el portaobjetos en el microscopio.

   ¡Recuerda! Debes empezar siempre enfocando el mínimo aumento.

5.- Gira el revólver del microscopio al aumento medio y dibuja lo observado.

6.- Saca el portaobjetos del microscopio, levanta el cubreobjetos y coloca el portaobjetos encima de una
placa de Petri.




7.- Añade unas gotas de verde de metilo. Espera 5 minutos. (Se muestra en las fotografías anteriores)
8.- Con unas pinzas sujeta el porta y retira el exceso de colorante vertiendo agua con el frasco lavador
encima de la muestra. Seca los alrededores de la muestra con papel filtro.




9.- Añade unas gotas de agua y procura que no se formen burbujas de aire.




 10.- Coloca el cubre sobre el portaobjetos y coloca la preparación en el

    microscopio a unos 200-400 aumentos para observar bien el resultado.

Actividades
Dibuja lo que ves y contesta las siguientes cuestiones:



1.-Indica qué dibujo representa mejor la imagen que has observado en el microscopio.




2.- ¿Cuáles son las partes de la célula que has observado claramente?

3.- ¿Por qué no se observan otros componentes de la célula?
                                             PRÁCTICA NÚMERO 12

                  OBSERVACIÓN DE LA EPIDERMIS DE LA HOJA DE LIRIO (Iris germanica)

Introducción
Las células de la epidermis de la hoja de lirio son alargadas e incoloras, tienen núcleos bien visibles. Cada
estoma está formado por dos células simétricas arriñonadas, células estomáticas, éstas son las únicas de
la epidermis que contienen granos de clorofila. Entre estas dos células se percibe un orificio de forma
oval, el ostiolo. Si aparecen granos de cloroplastos en las células de la epidermis pertenecen al
parénquima clorofílico de la célula.

Material

Microscopio                Frasco lavador               Papel de filtro            Cubreobjetos
                                                                                   Trozo de epidermis de
Portaobjetos               Bisturí                     Pinzas de disección
                                                                                   lirio
Cuentagotas                Caja de Petri               Colorante: verde metilo
Preparación
   1. Hacer una incisión transversal, con una cuchilla, de medio centímetro de longitud, en el tercio
      superior de la hoja. Con las pinzas tirar de uno de los bordes del corte rasgando en sentido
      longitudinal de la hoja. Se desprenderá fácilmente una fina membrana, que es la epidermis de la
      hoja.

   2. Se recortan pequeños fragmentos
   3. Colocarla sobre el porta con un par de gotas de agua y taparla con el cubre presionando con
      cuidado.

   4. Observar al microscopio, primero con los mínimos aumentos, luego pasar a aumentos mayores.

Actividades
Dibuja lo que has observado indicando los aumentos.
                                               PRÁCTICA NÚMERO 13

                        OBSERVACIÓN DE CÉLULAS DE LA MUCOSA BUCAL HUMANA

Introducción
La mucosa bucal constituye un tejido epitelial o de revestimiento. Es de tipo pluriestratificado de descamación, por lo que
es sencillo obtener muestras de sus células. Al microscopio se observan con facilidad tras teñirlas, ya que son
transparentes, y destaca su núcleo redondeado y central.

Materiales
Microscopio                   Cubeta                    Mechero                   Porta y cubreobjetos

Pocillo de montar             Cuentagotas               Aguja enmangada

Soporte tinciones             Azul de metileno

Técnica de la preparación
Introducir un dedo en la cavidad bucal. Paspar suavemente con la uña la car interna del carrillo. Limpiar el producto
obtenido, del borde interno de la uña, con una aguja. Deposítese sobre una gotita de agua en un portaobjetos. Hacer
suavemente una extensión frotando con la aguja sobre el porta. Calentar hasta la desecación, a la llama del mechero, sin
que llegue a quemar el porta sobre el dorso de la mano. Colocar el porta sobre el soporte de tinción encima de la cubeta.

Agregar unas gotas de azul de metileno sobre toda el área de extensión realizada. Déjese actuar el colorante un par de
minutos. Inclinando el porta verter el colorante en la cubeta. Irrigar con el cuenta gotas unas gotas de agua para lavar la
preparación hasta que no suelte color. Poner unas gotas de agua limpia en el centro de la preparación. Poner un
cubreobjetos, de forma que este caiga como se cierran las tapas d un libro; dejando caer suavemente el cubre se evita que
queden burbujas de aire entre el porta y el cubre.

Observación al microscopio
Fijar la preparación sobre la platina haciendo uso de las pinzas de presión. Empleando aumentos débiles localizar el área
de la preparación más idónea para la observación (enfocar las células aisladas que son las que mejor se observan. Cambiar
a otro objetivo con aumento más fuerte.

El material observado procede de la capa superficial del epitelio de la mucosa bucal. En su mayoría son células muertas o
células en degeneración. El azul de metileno tiñe intensamente el núcleo, y con menos color el citoplasma, que suele ser
algo granuloso.

Actividades
Dibuja en tu cuaderno de actividades lo que observes en el microscopio anotando el número de aumentos que has
utilizado.

Debes ver una imagen similar a la que se muestra a continuación, donde se observan claramente los núcleos, la membrana
y el citoplasma.




Nota: además de células de la mucosa es posible observar bacterias de la mucosa bucal (Streptococos).
PRÁCTICA 14:OBSERVACIÓN DE BACTERIAS FIJADAS
        Y TEÑIDAS POR TINCIÓN SIMPLE
       OBJETIVOS

1. Realizar una tinción simple de bacterias procedentes de distintas muestras naturales.
2. Realizar dos tipos de fijaciones bacterianas y saber en qué casos se recomienda una u otra.
3. Observar la morfología bacteriana y aprender a distinguir los distintos tipos de
   agrupaciones que existen.
4. Practicar con el microscopio al máximo aumento y con el correcto empleo del aceite de
   inmersión

       MATERIAL

                                Mechero Bunsen o de alcohol
                                Asa de siembra o aguja enmangada
                                Pinzas
 Material de
                                3 Portaobjetos
 Laboratorio
                                Cubeta de tinción
                                Microscopio y aceite de inmersión

 Reactivos                      Azul de metileno al 1%
                                Muestras bacterianas de origen natural: yogur, vinagre,
 Material biológico
                                 sarro dental, etc.

       PROCEDIMIENTO

 A) BACTERIAS DEL YOGUR
El yogur es un producto lácteo producido por la fermentación natural de la leche. A escala
industrial se realiza la fermentación añadiendo a la leche
dosis del 3-4% de una asociación de dos cepas bacterianas:
el Streptococcus termophilus, poco productor de ácido, pero
muy aromático, y el Lactobacillus bulgaricus, muy
acidificante. En esta preparación se podrán, por tanto,
observar dos morfologías bacterianas distintas (cocos y
bacilos) y un tipo de agrupación (estreptococos, cocos en
cadenas arrosariadas). Además, el tamaño del lactobacilo
(unos 30µm de longitud) facilita la observación aunque no se tenga mucha práctica con el
enfoque del microscopio.

   1. Después de encender el mechero, esteriliza el asa de siembra con la llama del mechero,
      toma una mínima porción de yogur en una pequeña gota de agua y realiza un frotis
      (extenderla sobre todo el portaobjetos.).
   2. Pasar el portaobjeto por la llama del mechero para fijar la muestra, sin dejar de moverlo
      para impedir la fractura del cristal.
   3. Añadir una gota de azul de metileno al 1 % obre la preparación durante 1-2 minutos.
   4. Lavar la muestra con el frasco lavador, cuidadosamente, para eliminar el exceso de
      colorante.
   5. Dejar evaporar el agua sobrante moviendo la preparación en abanico.
   6. Añadir una gota de aceite de inmersión a la muestra, colocarlo sobre el microscopio y
      observar al máximo aumento del microscopio.

A) BACTERIAS DEL VINAGRE

  El vinagre es una solución acuosa rica en ácido acético resultante de la fermentación
espontánea del vino o de bebidas alcohólicas de baja graduación. La acetificación del vino es
producida por bacterias aeróbicas del ácido acético, principalmente Acetobacter aceti, aunque
también Gluconobacter. Se trata de bacilos rectos con flagelos polares.

    1. Tomar con una aguja enmangada una pequeña porción de madre de vinagre natural o de
       la telilla que se forma sobre la superficie de los vinos agriados.
    2. Extender la muestra en el portaobjetos con una gota de agua y hacer el frotis.
    3. Fijar con calor y secar al aire moviendo en abanico.
    4. Teñir 5 minutos con azul de metileno, lavar el exceso de colorante y secar.
    5. El montaje puede hacerse con una gota de glicerina o de agua antes de colocar el cubre;
       también puede observarse sin cubre mediante la técnica de inmersión.

B) BACTERIAS DEL SARRO DENTAL

     El sarro dental es un depósito consistente y adherente localizado sobre el esmalte de los
dientes. Está constituido principalmente por restos proteicos, sales minerales y bacterias junto con
sus productos metabólicos. La flora bacteriana de la cavidad bucal es muy variable dependiendo
de las condiciones que se den en el momento de hacer la preparación, pero suelen abundar
bacterias saprófitas, pudiéndose observar gran variedad de morfologías: espiroquetas,
cocobacilos, diplococos y bacilos.

    1. Con un palillo de dientes extrae una muestra del sarro dental, raspando la punta sobre los
       dientes y disolver la muestra en una gota de agua que previamente se ha colocado sobre
       el portaobjetos.
    2. Dejar secar y fijar con calor.
    3. Teñir 2-3 minutos con azul de metileno, lavar el exceso de colorante y secar.
    4. Observar al microscopio con aceite inmersión.

Guarda las preparaciones, para poder compararlas con la tinción de gram que vas a realizar en la
siguiente práctica.

       CUESTIONES

1. Haz un esquema de la preparación del yogurt localiza los dos tipos de bacterias que producen el yogur (relaciona
   el nombre científico con la forma de la bacteria) Haz un esquema de la preparación del vinagre y compara la
   forma de las bacterias Acetobacter con las observadas en la preparacióndel yogurt.
2. Dibuja lo que ves en el microscopio en cada una de las preparaciones.
3. ¿De qué color aparecen teñidas las bacterias?
4. Identifica los tipos de bacterias presentes en las muestras.
5. ¿Qué forma tienen?¿aparecen aisladas o agrupadas?. Tipo de asociación
6. Haz un recuento de cada uno de los tipos bacterianos de cada una de las preparaciones y exprésalo en forma de
   porcentaje. ¿Cuál es la bacteria mayoritaria en cada caso?.
    PRÁCTICA 15       PREPARACIÓN DE UN MEDIO DE CULTIVO


   PROCEDIMIENTO

           a) Preparación del medio

1.- Monta la rejilla, el mechero y el vaso de precipitado como se indica la figura. Se añaden todas las
sustancias constituyentes del medio en el vaso de precipitado, exceptuando la gelatina o el agar, y se pone
en el fuego hasta la ebullición.




                              Papel de aluminio.
                              Algodón hidrófilo.
                              Papel de filtro.
                              Tres placas de Petri.
                              Tres tubos de ensayo.
                              Mechero Bunsen o de alcohol
Material de
                              Trípode y rejilla
Laboratorio
                              Embudo.
                              Vaso de precipitado.
                              Asa de siembra o aguja enmangada
                              Esterilizador ( puede ser una olla a presión)
                              Estufa

                              60 cc de agua.
Sustancias                    0.6 g de glucosa.
constituyentes del            1,5 g de pastillas de caldo de pollo ( lípidos y proteínas)
medio                         3 hojas de gelatina o 3 g de agar.
                              Bicarbonato.
                            PRÁCTICA 16 ¿POR QUÉ DEBEMOS LAVARNOS LAS MANOS?

  INTRODUCCIÓN
  Como sabes, lavarse las manos, sobre todo antes de comer o de tocar zonas de la piel con heridas, es muy importante
  pero ¿cuál es la razón?. Con esta sencilla investigación podrás deducirla fácilmente.

  MATERIALES
  Rotulador indeleble. Tres placas de Petri con medio de cultivo

  Servilletas de papel.

  Las placas de Petri son unas cajas transparentes con tapadera, dentro de las cuales se coloca una sustancia (medio de
  cultivo) que sirve para alimentar a los microorganismos. Gracias a este medio de cultivo los microorganismos pueden
  desarrollarse y reproducirse hasta aumentar enormemente su número y formar colonias observables a simple vista.

                                                                            1.   Rotula las placas de Petri del uno al tres.

                                                                            2.   Destapa la placa 1 y pasa la yema de los dedos
                                                                                 sobre el medio de cultivo. Después cierra la
                                                                                 placa.

                                                                            3.   Lávate las manos solo con agua y sécalas con
                                                                                 una servilleta de papel. Toca el medio de
                                                                                 cultivo de la placa 2 como en el punto
                                                                                 anterior y luego ciérrala.

                                                                            4.   Lávate ahora las manos con agua y jabón, y
                                                                                 repite todo el proceso con la placa 3.

                                                                            5.   Coloca las tres placas boca abajo en una
                                                                                 estufa de cultivo a 28-32ºC. para evitar
                                                                                 confusiones anota con un rotulador en la base
                                                                                 de cada placa las condiciones en las que
                                                                                 estaban los dedos correspondientes (sin lavar,
                                                                                 lavados con agua, lavados con agua y jabón)

                                                                            6.   Pasadas 48 horas observa las placas de Petri.




ACTIVIDADES
                    1.    ¿Qué observas en las placas? ¿A qué es debido?

                    2.    Analiza los resultados de las tres placas y extrae conclusiones que puedan tener aplicación en la vida
                          cotidiana.

                    3.    ¿Te parece adecuado que los organismos encargados de la Sanidad Pública exijan el cumplimiento
                          de normas muy estrictas para manipular alimentos? ¿Por qué?

                    4.    Cita algunas situaciones en las que resulte imprescindible adoptar medidas higiénicas.
BLOQUE III
GENÉTICA
                 PRÁCTICA 17 OBSEVACIÓN DE MITOSIS DE CÉLULAS VEGETALES EN DIVISIÓN

INTRODUCCIÓN

Para observar la mitosis en células vegetales se utilizan tejidos meristemáticos, en los que las células se
multiplican constantemente, por lo que será fácil “sorprender” algunas células en distintas fases
mitóticas.

MATERIALES

Raíces de cebolla/Alubias, garbanzos o lentejas      Vaso de precipitado         Palillos de dientes

Placa de petri      Papel de filtro   Estufa     Cuchilla       Vidrio reloj   Aguja enmangada

Orceína acética      ClH 1N      Mechero       Portaobjetos      Cubreobjetos

PROCEDIMIENTO

   1. Empezaremos observando el proceso de división celular o mitosis. Se emplearán como material
      biológico raicillas de cebolla, aunque también se podrían utilizar las raíces obtenidas a partir de
      otros bulbos (ajos, puerros, jacintos, tulipanes, etc). Para conseguir raíces en crecimiento se
      coloca el bulbo de cebolla (al que previamente se habrán eliminado las raíces secas) sobre un vaso
      de precipitado ( si es necesario se sujeta mediante unos palillos). Se llena el vaso con agua hasta
      que toque superficialmente la zona donde van a crecer las raicillas. Al cabo de 2 o 3 días
      empezarán a crecer las raíces.



   2. Por otro lado, se
      utilizará       como
      material    biológico
      semillas de diversas
      especies:     alubias,
      garbanzos, lentejas,
      etc.      Para      la
      germinación de las
      semillas, se ponen
      en una placa de petri con unos discos de papel de filtro empapado de agua. Las placas se
      introducen en la estufa a 23-25ºC hasta que se produzca la germinación. En caso de no disponer
      de estufa en el laboratorio del instituto, se procederá de la siguiente manera: una vez están las
      semillas en la placa de petri las meteremos en el frigorífico 48 horas y después las dejaremos a
      temperatura ambiente. Gracias al choque térmico aceleraremos el proceso de germinación.
      Cuando las raíces tengan 1 cm se retiran de la placa y se eligen las semillas no contaminadas por
      hongos.



                                                              3. Elige una raíz joven (de unos 2 cm), lávala
                                                                 con agua y corta la punta a 5 mm del
                                                                 extremo.

                                                              4. Coloca la punta de la raíz en un vidrio de
                                                                 reloj. Para ablandar los tejidos e iniciar la
                                                                 tinción, se cubre la raíz con orceína acética y
                                                                 clorhídrico 1N en la proporción de 9:1, es
   decir, 9 gotas de orceína por cada gota de HCl. Si estas realizando la tinción en raíces de semillas
   también se podrían utilizar los colorantes: carmín acético o hematoxilina.

5. La hidrólisis debe hacerse en caliente, a unos 60º. Para ello, calienta el vidrio de reloj a la llama del
   mechero, justo hasta que empiecen a desprenderse tenues vapores, teniendo mucho cuidado de
   que no hierva. Retíralo para que se enfríe durante 8 minutos y repite esta operación 3 veces,
   añadiendo más orceína si hiciera falta, de modo que el líquido cubra en todo momento la punta
   de la raíz.

6. Saca la raicilla con la aguja enmangada y colócala sobre el portaobjetos. Con la cuchilla corta el
   ápice a unos 2 mm. El resto se descarta ya que las células meristemáticas se encuentran en el
   extremo, bajo la cofia.

7. Añade unas gotas de ácido acético al 45% (orceínaB) para terminar de ablandar los tejidos.

8. Limpia con papel de filtro los posibles residuos del colorante. Coloca el cubreobjetos y realiza un
   squash o aplastamiento. Para ello sitúa la preparación en un papel de filtro doblado y presiona con
   el dedo pulgar para aplastar el tejido y eliminar el exceso de colorante. Si al retirar el papel de
   filtro se ve que la muestra no queda suficientemente aplastada, se puede presionar el cubre en la
   zona donde está la raicilla con la parte posterior de la aguja enmangada. En cualquier caso hay
   que evitar que el cubreobjetos se deslice sobre el portaobjetos en el curso de la presión, y se debe
   conseguir una monocapa de células a través de la que pase la luz.

9. Observa al microscopio. Al principio con un aumento pequeño, para localizar las células
   meristemáticas mejor teñidas y en un solo plano. Luego, con mayor aumento, tratar de identificar
   células en cada una de las fases mitóticas.

Actividades
   1. Dibuja con cierto detalle, una célula en cada una de las fases de la mitosis: profase, metafase,
      anafase y telofase.

   2. Contesta a las siguientes cuestiones:

   a. ¿Por qué es más fácil encontrar mitosis en las células que se encuentran en el extremo de las
      raicillas y no aparecen en las zonas más alejadas?

   b. ¿En qué momento de la mitosis se identifican mejor los cromosomas para su recuento?
                                    MATERIAL ELENA UD 4

            PRÁCTICA 17 OBSEVACIÓN DE MEIOSIS DE CÉLULAS VEGETALES EN DIVISIÓN

INTRODUCCIÓN

Para ver células en meiosis habrá que recurrir a los órganos reproductores: estambres o carpelos,
donde se producen los gametos.

								
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