Klinisk Vejledning revision lagt p� nettet 10 8 09 by k1kjGVi

VIEWS: 0 PAGES: 72

									INDHOLDSFORTEGNELSE
Forord

Advisering af hasteprøver
Infektionshygiejne
Kort over Skejby Sygehus med afdelingens beliggenhed
Klinisk mikrobiologisk afdeling (KMA)
Modtagelse af prøver
Principper for mikrobiologiske undersøgelser
Rekvisition af undersøgelser
Tolkning af svar
Vagthavende bioanalytiker
Vagthavende læge


BAKTERIOLOGISK AFSNIT
Bloddyrkning
Cerebrospinalvæske
Knoglemarv


Bordetella (Kighoste)
Bronchioalveolær skyllevæske (BAL)
Ekspektorat, bronchial- og trachealsekret
Legionella i luftvejssekret
Svælgpodning


Chlamydia trachomatis
Gonokokker
Trichomonas vaginalis
Urin (almindelige bakterier og svampe)
Vaginalpodning
Tarmbakteriologiske undersøgelser
Ascitesvæske og peritonealdialysevæske
Ledvæsker og knogleaspirater
Mave-/tarmsekreter
Pleuravæske og andre aspirater
Pus og sårsekret


Biopsimateriale
I.V. Kateter
Koncentrationsbestemmelse af antibiotika
Podning for multiresistent bakterier
Sektionsmateriale
Ørepodning
Øjenpodning


VIROLOGISK-IMMUNOLOGISK AFSNIT

Antistoffer mod CMV
Antistoffer mod Epstein-Barr virus (EBV)
Cytomegalovirus (CMV): Dyrkning og antigenpåvisning
Herpes simplex virus (HSV)
Varicella-Zoster virus (VZV)

Mycoplasma pneumoniae
Respirationsvejsvirus: Antigenpåvisning
Respirationsvejsvirus ved PCR
Influenza A virus påvist ved PCR


Antistoffer mod parvovirus B 19 (Parvo)
                      rubellavirus
                      hantavirus
Antistoffer ved neuroborreliose
Antistoffer mod toxoplasma gondii
Serumantistoffer mod borrelia
Viral Meningitis/encephalitis
Andre mikrobiologiske undersøgelser


Forord                  Hermed udsendes anden udgave af Vejledning vedrørende klinisk
                        mikrobiologiske undersøgelser.
                        Vejledningen udsendes til samtlige sygehusafdelinger og praktiserende
                        læger i Århus amt.
                        Der har få år efter trykningen af første udgave (1993) været behov for
                        justeringer og tilføjelse af nye afsnit om diagnostiske undersøgelser i
                        afdelingen.
                        Det er vores håb, at vejledningen ud over at give overblik over de
                        analyser afdelingens 2 afsnit (bakteriologisk og virus/immunologisk
                        afsnit) kan tilbyde, vil lette vore brugere i arbejdet med prøvetagning,
                        forsendelse og tolkning af prøvesvar.
                        Vejledningen vil fremover kun findes i nærværende web-udgave, som
                        altid er den gældende.
                      Afdelingens læger bistår med klinisk mikrobiologisk rådgivning ved
                      telefonisk henvendelse og i et vist omfang også ved afdelingskonferencer.
                      Forslag til forbedringer af Klinisk Mikrobiologisk Afdelings
                      prøveprogram såvel som til udformningen af nærværende vejledning er
                      velkomne.
                      Redaktionsgruppen ved anden udgave har bestået af:
                      Jens K. Møller, Lars P. Nielsen og Hans Mogens Kerzel Andersen.


                      Redaktionen er afsluttet den 1. august 1999.


                       Afdelingens beliggenhed på Skejby Sygehus




Afdelingsbetegnelse   Klinisk Mikrobiologisk Afdeling (KMA).


Geografi              Bygning X.
                      Bakteriologisk afsnit er placeret i stueetagen.
                      Virologisk/immunologisk afsnit er placeret på 1. sal
                      Aflevering af alle prøver: Bygning X, stuen.
Telefon                  Forespørgsel vedrørende prøver:
                          Bakteriologi                             (8949) 5610
                          Virologi/immunologi                      (8949) 5610
                          Sekretariat:                             (8949) 5623-27 eller 5602
                          Rådgivning vedrørende patienter: (8949) 5610
                          Telefax:                                 (8949) 5611
Modtagelse af prøver      Normal åbningstid:                       alle prøver
                          Fast bioanalytikervagt:                  hasteprøver
                          Tilkaldevagt: Indtil kl. 24              hasteprøver
                          Efter kl. 24 kun prøver på særlig lægelig indikation




                                  Mandag - fredag       Lørdag                      Søndag



                         08-15    Normal                Normal                      Fast
                                  åbningstid            åbningstid                  bioanalytikervagt

                         15-20    Fast              Tilkaldevagt                    Tilkaldevagt
                                  bioanalytikervagt

                         20-08    Tilkaldevagt          Tilkaldevagt                Tilkaldevagt

Normal åbningstid                Mandag til lørdag                         08.00-15.00
                         NB: Det bør tilstræbes, at prøver afleveres så tidligt på dagen som muligt.


Fast bioanalytikervagt    Fast bioanalytikervagt i afdelingen:                   (8949) 5612
                          Mandag til fredag                                      15.00-20.00
                          Søndag + helligdage                                    08.00-15.00
                         Hasteprøver (se advisering af hasteprøver) bliver undersøgt umiddelbart i
                         tidsrummet kl. 08.00-20.00 på hverdage og 08.00-15.00 på søn- og
                         helligdage, dog skal disse være afdelingen i hænde senest 19.30 på
                         hverdage og senest 14.30 lørdag samt søn- og helligdage. (se
                         Bloddyrkninger).


Tilkaldevagt             Bioanalytiker i tilkaldevagt fra bolig:
                             Mandag til fredag                             20.00-08.00
                             Lørdag                                        15.00-08.00
                             Søndag og helligdage                          15.00-08.00
                            Indtil kl. 24.00: Hasteprøver modtages og undersøges som anført
                            ovenfor under ”Modtagelse af prøver”, dog skal vagthavende
                            bioanalytiker altid kontaktes telefonisk.
                            Efter kl. 24.00: Kun spinalvæsker fra patienter med formodet purulent
                            meningitis tages i arbejde straks efter advisering af vagthavende
                            bioanalytiker (indtil kl. 07.00).
                            Spinalvæsker fra patienter med serøs meningitis bør sendes, så de er i
                            afdelingen ved åbningstidens begyndelse. Andre prøver undersøges kun
                            undtagelsesvis og kun på særlig lægelig indikation.


Vagthavende bioanalytiker   Telefonnummer på vagthavende bioanalytiker oplyses af Skejby Sygehus
                            omstilling (8949 5566).


Vagthavende læge            Mandag til søndag i afdelingen kl. 08.00-15.00:
                                                   Tlf.nr.: (8949) 5620.
                            Mandag til søndag fra bolig kl. 15.00-20.00:
                                                  mobil tlf.nr.: 4036 7743.


Advisering af hasteprøver   Uopsættelige prøver skal mærkes tydeligt med hasteprøve udvendigt på
                            kuverten. Det gælder først og fremmest cerebrospinal- og ledvæsker,
                            pleura- og peritonealvæsker, transtrakeale aspirater samt prøver til speciel
                            undersøgelse for anaerobe bakterier.
                            Undersøgelse for Respiratorisk syncytial virus (RSV) (se
                            respirationsvirus) kan udføres af den faste bioanalytikervagt på hverdage,
                            hvis prøven er fremme inden kl. 18.30, og lørdag-søndag inden kl. 13.30.
                            Afdelingen skal altid adviseres telefonisk ved undersøgelse af
                            cerebrospinalvæsker.


Rekvisitionsseddel          Ved papirrekvisition skal hver prøve følges af en rekvisitionsseddel:
                            Brun til Bakteriologisk afsnit (se rekvisition af us.)
                            Grøn til chlamydia-prøver (se chlamydia)
                            Blå til Virologisk/immunologisk afsnit (se virologisk).
                            Kun én prøve per rekvisitionsseddel!
                            Praktiserende læger kan bestille rekvisitionssedler på tlf. nr. 8949 5625
                            eller, ved elektronisk rekvisition, Prøvetagningsblanketter hos MedCom.


Utensilier                  Krav til utensilier anført under afsnittene om de enkelte undersøgelser.
Telefonisk rådgivning       Afdelingens læger yder gerne rådgivning vedrørende
                            infektionssygdommes diagnostik, behandling og profylakse, såvel inden
                            for sygehusvæsenet som i den primære sundhedstjeneste.


Infektionshygiejne          Sygehushygiejnisk rådgivning foregår i samarbejde med afdelingens
                            hygiejnesygeplejersker.
                            Rådgivning via tlf. 8949 5610.


Videnskabelige              KMA samarbejder gerne med sine brugere om videnskabelige projekter.
undersøgelser               KMA vil gerne orienteres om projekter, også i de tilfælde, hvor et
                            samarbejde ikke umiddelbart skønnes nødvendigt. Ved brug af klinisk
                            mikrobiologiske svar i artikler bør KMA orienteres før indsendelsen af
                            manuskriptet.


                              PRØVETAGNINGSVEJLEDNING

Bakteriologisk Afsnit
Generelle principper for    Kvaliteten af en mikrobiologisk undersøgelse er helt afhængig af det
undersøgelser               modtagne prøvemateriale samt af de ledsagende kliniske oplysninger. Er
                            prøvematerialet ikke repræsentativt, eller er det tilblandet normalflora,
                            eller mangler relevante oplysninger om den kliniske problemstilling, kan
                            den mikrobiologiske besvarelse blive mangelfuld og eventuelt helt
                            misvisende.
                            I mange tilfælde er en fuldstændig beskrivelse af alle tilstedeværende
                            mikroorganismer ikke praktisk mulig.
                            Prøverne behandles derfor efter standardiserede procedurer, der
                            erfaringsmæssigt giver de væsentligste oplysninger. Således dyrkes visse
                            prøvekategorier ikke rutinemæssigt anaerob, idet dyrkningsresultaterne
                            sjældent giver klinisk relevante oplysninger. Dette gælder fx
                            svælgpodninger, ekspektorat, urin og vaginalpodninger.
                            I nogle tilfælde vil det naturligvis være indiceret at afvige fra de
                            standardiserede procedurer. Men dette forudsætter, at KMA informeres
                            via sufficiente oplysninger på rekvisitionssedlen, eventuelt suppleret
                            med telefonisk kontakt, inden prøven afsendes.
                            Ved dyrkning fra "sterile" områder (blod, cerebrospinalvæsker, visse
                            punkturvæsker og biopsier) vil som hovedregel alle dyrkbare
                            mikroorganismer blive søgt identificeret og resistensbestemt. Men selv i
                            disse tilfælde vil relevante fund kunne mistes, hvis der ikke medfølger
                            oplysninger om den kliniske problemstilling. I tilfælde af særlig
                            "kostbart" prøvemateriale vil det altid være en god idé at kontakte KMA
                            inden afsendelsen.


Specielle Mikroorganismer   Ved mistanke om specifik ætiologi til en infektion bør dette altid oplyses,
                            idet fx mikroorganismer som Legionellapneum-ophila, Actinomyces,
                            Nocardia, Corynebacterium diphtheriae og Brucella kræver særlig teknik
                            for at kunne påvises.
                       REKVISITION AF UNDERSØGELSER
Udfyldelse af          Ved papirrekvisition skal prøven følges af en af afdelingens brune
Rekvisitionsseddel     rekvisitionssedler (chlamydia-prøver dog på speciel grøn seddel).
                       Rekvisitionssedlen udfyldes med:

                             Patientidentifikation (CPR-nummer og navn).
                       NB: Skriv tydeligt, brug prægeplade, fortrykt label eller kuglepen.

                             Afsender (Husk afdelingsbetegnelse).

                             For indlagte patienter: indlæggelsesdato.

                             Prøvetagningstidspunkt.

                             Diagnose (Grundsygdom).

                             Indikation for prøven (Aktuel infektionsdiagnose).

                             Oplysning om aktuel og planlagt antibiotisk behandling.

                             Prøvens art og anatomiske lokalisation ved afkrydsning eller tekst.

                             Den ønskede undersøgelse ved afkrydsning eller tekst.
                       Ved elektronisk rekvisition udfyldes rekvisitionsoplysningerne på
                       skærmen. Samtidig med den elektroniske afsendelse af rekvisitionen
                       udskrives en unik stregkode-label, som hæftes på prøven. Påfør ALTID
                       stregkoden på langs ad prøveglasset, så stregkoden kan aflæses ved
                       modtagelsen i laboratoriet!


Utensilier             Det er vigtigt at følge anvisningerne i vejledningen for de enkelte
                       prøvekategorier. Vær specielt opmærksom på, at Stuart
                       transportmedium (SSI) kun skal anvendes til fremsendelse af
                       podepinde. Plastpodepinden stikkes helt ned i bunden af glasset, knækkes
                       på glassets kant, og når låget skrues på, fanges og fikseres podepinden
                       (ellers vanskeliggøres udsåningen af prøven). Glasset anbringes i
                       transporthylsteret. Transportmediet bør opbevares ved stuetemperatur; så
                       længe den nederste ⅓ er farveløs, kan mediet stadig anvendes.
                       Afsenderen skal påse, at forsendelsesmaterialer ("glas" & seddel) er rene
                       udvendigt (fx rengjort i sprit v/spild) ved fremsendelse til laboratoriet.


Opbevaring af prøver   Prøverne opbevares som foreskrevet under omtalen af de enkelte
                       prøvekategorier. Generelt gælder dog, at bloddyrkningskolber hurtigst
                       muligt sættes i varmeskab ved 35 °C, mens andre prøver opbevares i
                       køleskab ved 4 °C.


Transport              Prøver transporteres fra de respektive sygehuse i køle/ varmekasser ved
                       henholdsvis 4 °C og 35 °C som anført under de enkelte prøvekategorier.
                         NB: cerebrospinalvæske til hasteundersøgelse bør ikke nedkøles.
                         Prøver fra praksis: Sendes i godkendt emballage eller afleveres i KMA
                         (bygning X, stueetagen) i afdelingens åbningstid (se KMA).


                                 AFSENDELSE AF SVAR
Svartyper                Telefonisk svar: Telefonisk svar afgives altid for cerebrospinalvæske og
                         serumkoncentrationsbestemmelse; herudover altid ved positive fund i
                         bloddyrkninger og ved aspirater fra normalt sterile områder (fx levæsker).
                         I andre tilfælde efter skøn.
                         Skriftligt svar: Fremkommer, når identifikation og resistens-
                         bestemmelse er afsluttet, sædvanligvis efter 2-4 døgn.
                         Supplerende skriftligt svar: Afgives i de tilfælde, hvor identifikation har
                         krævet længere tid i laboratoriet, eller der er foretaget supplerende
                         undersøgelse (fx typebestemmelse af pneumokokker, gruppebestemmelse
                         af meningokokker eller identifikation af svampe) på Statens Serum
                         Institut, København.


Afsendelse af svar til   Svar afsendes dagligt med posten og vil således normalt være afdeling i
Sygehuse                 hænde dagen efter afsendelsen, dog vil svar til Århus
                         Universitetshospital blive udsendt med intern post og vil således kunne
                         være afdelingerne i hænde på dagen for svarafgivelsen.


Afsendelse af svar til   Svaret afsendes elektronisk hvis den praktiserende læge kan modtage det
praktiserende læge       sådan, og svaret modtages samme dag, som det afsendes.
                         Svar med posten afsendes dagligt og vil således normalt være den
                         praktiserende læge i hænde dagen efter afsendelsen.


                                  TOLKNING AF SVAR
Tolkning af svar         Den mikrobiologiske undersøgelse kan omfatte:
                            1) Mikroskopi
                            2) bedømmelse af mængden af isolerede mikroorganismer
                            3) bestemmelse af disses art (identifikation)
                            4) resistensbestemmelse over for antibiotika
                            5) vurdering af svarets kliniske relevans
                         1) Mikroskopi kan give oplysning om tilstedeværelsen af en
                         inflammatorisk reaktion (polymorfkærnede og/eller mononukleære
                         leukocytter) og af prøvematerialets egnethed, (se fx ekspektorat-
                         undersøgelse).
                         Mængden af mikroorganismer vil sædvanligvis blive bedømt per synsfelt
                         (objektiv x100) og angivet som 1) enkelte, 2) spredte, 3) en del eller 4)
                         mange. Visse mikroorganismer kan med stor sikkerhed henføres til
                         gruppe eller art ved direkte mikroskopi, således at der meget hurtigt kan
                         tilgå afdelingen relevante oplysninger.
Det materiale, der ønskes undersøgt ved direkte mikroskopi fremsendes,
således som det er anført under de enkelte prøvekategorier.
2) Mængden af isolerede mikroorganismer vil sædvanligvis blive
bedømt semikvantitativt og angivet som 1) enkelte, 2) spredte, 3) en del
eller 4) mange.
For væsker (fx urin, BAL, hjerneventrikelvæsker og amme-mælk) vil
antallet blive bedømt kvantitativt (per ml) og angivet med et tal (en
potens af 10, fx 105).
3 & 4) Identifikation og resistensbestemmelse foretages i den
udstrækning, afdelingen finder det klinisk, epidemiologisk eller
videnskabeligt relevant. Ved fund, der skønnes at være forurening eller
ikke klinisk relevant, angives kun en grov karakteristik af de pågældende
mikroorganismer, og besvarelsen sker eventuelt uden
resistensbestemmelse. Svampes følsomhed over for antimykotika
undersøges ikke rutinemæssigt.
Resistensbestemmelse på bakterier udføres og besvares over for et
udvalg af antibiotika primært bestemt af prøvens art.


Urin:
Ampicillin, sulfonamider, trimetoprim, gentamicin, ciprofloxacin,
nitrofurantoin, cefuroxim og mecillinam.

Andre prøver:
Penicillin, ampicillin, sulfonamid, trimetoprim, tetracyklin, cefuroxim,
gentamicin og erytromycin.

Øjenpodninger (konjunktivitis):
Der foretages ikke følsomhedsbestemmelse over for antibiotika med lokal
anvendelse (kloramfenikol og fucidin). De koncentrationer, som opnås
lokalt, ligger væsentligt over de gængse grænser ("break points") for in
vitro følsomhed.

Staphylococcus aureus / Staphylococcus epidermidis:
Desuden meticillin.

Anaerobe bakterier:
Penicillin, metronidazol, clindamycin.

Udvidet resistensbestemmelse:
Kommer på tale afhængig af prøvekategori, bakteriens art og resultatet af
de initialt udførte resistensbestemmelser (ved "multiresistens").


Resistensbestemmelse: Besvarelse og tolkning
Omfanget af resistensundersøgelsen afhænger af prøvens art, den
isolerede bakterie og rekvirenten (hospital/almen praksis).
Graden af følsomhed udtrykkes ved hjælp af SIR-systemet hvor. Sensitiv,
Intermediær sensitivitet, Resistent:
2 (S) =fuldt følsom, det vil sige behandling mulig med normal dosering
af det pågældende antibiotikum.
1 (I) =nedsat følsom, det vil sige behandling kun mulig, hvis dosis af det
pågældende antibiotikum kan øges eller forventes opkoncentreret i
infektionsfokus (fx urin).
0 (R) =resistent, det vil sige behandling ikke mulig med det pågældende
antibiotikum (effekt kan ikke forventes).


På svarsedlen vil de undersøgte antibiotika være angivet med deres
generiske navn (fx ampicillin - ikke anhypen eller pentrexyl).


Da antallet af registrerede antibiotikapræparater er meget stort, kan
KMA af praktiske grunde kun medtage et begrænset antal i de
rutinemæssige undersøgelser.
Resultatet af en resistensbestemmelse gælder dog for alle præparater,
som er synonyme med det undersøgte antibiotikum.


Beslægtede antibiotika vil ofte vise samme resistensforhold, således
at resultatet opnået for ét antibiotikum også kan gælde andre
antibiotika. Dette gælder blandt andet for:

Antibiotikum (generisk
navn)                        Dækker også:

Ampicillin                   Amoxicillin

Cefalotin                    Cefaklor, cefradin, (cefamandol)

Cefotaxim                    Ceftriaxon

Ciprofloxacin                Ofloxacin og norfloxacin. NB: For 3. og 4.
                             generations-kinoloner (fx grepafloxacin)
                             gælder det kun for Gram-negative
                             bakterier

Erytromycin                  Roxitromycin og azitromycin

Gentamicin                   For normalt følsomme bakterier1 dækker
                             gentamicin, netilmicin og tobramycin
                             hinanden

Meticillin                   Cloxacillin, dikloxacillin, flucloxacillin

Tetracyclin                  Chlortetra-, doxy-, demeclo-, lyme- og
                             oxytetracycline
1
    Staphylococcus epidermidis ofte undtaget.


NB: Angivelse af resistensforhold for en bakterie er ikke ensbe-
tydende med en anbefaling af antibiotisk behandling.
                          5) Vurdering af svarets kliniske relevans
                          Denne vurdering er i høj grad afhængig af en omhyggelig udfyldt
                          rekvisitionsseddel.
                          Undertiden vil det skriftlige svar være udvidet med en bedømmelse af
                          svarets kliniske relevans; fx "Fundet sandsynligvis en forurening",
                          "Nosokomiel stamme”, "Materialet uegnet, dyrkning har ikke fundet
                          sted".


Bakteriologisk Taksonomi og systematik
Taksonomi og systematik   Særligt den molekylærbiologiske udvikling har ydet væsentlige
                          bidrag til fortsat udvikling af mikrobiologisk systematik og takso-
                          nomi. Én af konsekvenserne er, at der forsat beskrives nye arter af
                          bakterier og svampe, ligesom kendte arter kan ændre navn og
                          slægtsmæssige tilhørsforhold.
                          Løbende ajourføring af arts- og slægtsnavne er derfor nødvendig,
                          men i et så besindigt tempo, at der ikke sker forplumring af
                          kommunikationen mellem klinikere og kliniske mikrobiologer.
                          Manglende ajourføring kan dog føre til, at det bliver vanskeligt at
                          sammenholde patienternes mikrobiologiske fund med standardværker
                          og artikler i videnskabelige tidsskrifter. I det følgende gives en
                          kortfattet oversigt over dels synonymer og provisoriske betegnelser.


                          Tidligere betegnelse            Moderne navngivning

                          Bacteroides melaninogenicus Prevotella malaninogenicus

                          Branhamella catarrhalis         Moraxella catarrhalis

                          CDC gruppe DF-2                 Capnocytophaga canimorsus

                          Campylobacter pylori            Helicobacter pylori

                          Corynebacterium                 Arcanobacterium haemolyticum
                          haemolyticum

                          Corynebacterium pyogenes        Actinomyces pyogenes

                          Corynebacterium "D2"            Corynebacterium urealyticum

                          Corynebacterium "JK"            Corynebacterium jeikeium

                          Enterobacter hafniae            Hafnia alvei

                          Haemophilus vaginalis           Gardnerella vaginalis

                          Proteus morganii                Morganella morganii

                          Pseudomonas maltophilia         Xanthomonas maltophilia1

                          Staphylococcus albus            Koagulasenegative stafylokokker
                             Staphylococcus faecalis           Enterococcus faecalis

                             Staphylococcus faecium            Enterococcus faecium
                             1
                                 Stenotrophomonas maltophilia er foreslået som nyt navn.

Bloddyrkning
Undersøgelsens Princip       Blod tages via et lukket system direkte i bloddyrkningskolber med et
[MDSM: 10160]                vækstmedium. De to kolber i et "sæt" anbringes hurtigst muligt ved
                             ca. 35oC med henblik på aerob og anaerob vækst. Der foretages
                             identifikation af isolerede bakterier og svampe- og
                             resistensbestemmelse af bakterier; ved besvarelsen foretages
                             eventuelt en vurdering af fundets kliniske relevans.


Indikation                   Formodning om septikæmi eller endocarditis.
                             Ved visse lokaliserede infektioner giver bloddyrkning ofte den
                             ætiologiske diagnose (fx pneumoni, epiglottitis, meningitis, akut
                             osteomyelitis).
                             Temperaturforhøjelse er ikke nødvendigvis indikation for blod-
                             dyrkning. Hos indlagte patienter med temperaturforhøjelse ³ 38,5oC,
                             særligt i det postoperative forløb, er bloddyrkning tilrådelig.
                             Bloddyrkning er i særlig grad indiceret hos patienter med
                             længerevarende feber (>2 uger). Såfremt antibiotika er givet, bør
                             det overvejes at holde pause med antibiotika mindst ét døgn før
                             bloddyrkning.
                             2 kolbesæt (2 x 2 kolber, svarende til 30-40 ml) kan som hovedregel
                             udelukke bakteriæmi med tilstrækkelig sikkerhed ved negative
                             dyrkninger.


                             Forslag til strategi ved bloddyrkning:
                                   1. Ved septikæmi tages 2 kolbesæt, inden antibiotikabehandling
                                      iværksættes. Tages de to sæt ved uafhængige indstik, er der
                                      mulighed for en vurdering af evt. kontamination.
                                   2. I alle andre situationer, hvor flere - tidsmæssigt separate -
                                      bloddyrkninger ønskes foretaget, anbefales, at man tager ét
                                      kolbesæt ad gangen.


Prøvemateriale               Fra 7 til maksimalt 10 ml veneblod i hver bloddyrkningskolbe.
                             Dyrkning af arterieblod giver ikke bedre resultater end veneblod.
                             NB: Blod fra centralt venekateter bør kun anvendes, når almindelig
                             venepunktur ikke kan foretages.


Tidspunkt for Prøvetagning   Bør altid foretages inden indledning af antibiotikabehandling.
                             Yderligere prøvetagning afgøres af den ordinerende læge, eventuelt i
                             samråd med klinisk mikrobiologisk afdelings læger.
Utensilier                    Bloddyrkningskolber (BacT/Alert®, Organon Teknika)
                              Husk at se efter udløbsdato
                              Voksne og store børn:
                              1 sæt bloddyrkningskolber
                              (grå metalhætte = aerob,
                              lilla metalhætte = anaerob).
                              Børn 0 - 3 år:
                              "Baby-kolbe" (blå metalhætte).
                              Sommerfugl med adapter (mellemstykke)
                              Speciel kolbeholder.


Bestilling og opbevaring af   Varetages af den lokale klinisk biokemiske afdeling.
bloddyrkningskolber           NB: De enkelte afdelinger bør ikke have kolber liggende af hensyn
                              til holdbarheden.


Prøvetagning                  Venepunktur: Omhyggelig aseptisk teknik er helt afgørende. Der
                              udføres huddesinfektion 2 gange med enten 0,5 % klorhexidin i 70 %
                              alkohol eller 70 % alkohol (hospitals-sprit). Desinfektionsmidlet skal
                              have lov at tørre mellem påføringerne og inden punkturen (en
                              virketid på 1 minut er optimalt).
                              Det desinficerede hudområde må ikke kontamineres ved
                              efterfølgende berøring.
                              Propperne afsprittes (skal være helt tørre før prøvetagning).
                              Sommerfugl, mellemstykke og kolbeholder samles.
                              Punktur foretages.
                              Når der tages to sæt bloddyrkninger samtidigt, må samme indstik
                              anvendes.
                              Propperne afsprittes igen (med henblik på blodspild).
                              Vigtigt: I børnekolbe udtages ½ - 3 ml blod (dvs. her er 1 kolbe = 1
                              prøve).
                              Hvis der tages blod til flere analyser, skal bloddyrkninger altid tages
                              først, og altid aerob kolbe først.


Mærkning af kolber              Enten:    Mærkat med navn og CPR-nummer.
                                Eller:    Mærkat med klinisk biokemisk afdelings
                                          Rekvisitionsnummer på både kolbe og rekvisitions-
                                          Sedlen til KMA.
                                          Husk dato og klokkeslæt!
                              Mærkaten må ikke tildækkes kolbens stregkode.


Bemærkninger på               Dato og klokkeslæt noteres på rekvisitionssedlen. Såfremt blodet er
Rekvisitionsseddel            udtaget fra centralt venekateter (CVK, Port-a-cath og lignende),
                              noteres det på rekvisitionssedlen.
                       Formodning om endocarditis eller brucellose anføres i feltet: Aktuel
                       infektionsdiagnose.


Opbevaring af prøve    Efter prøvetagning anbringes kolberne umiddelbart i blod-
                       dyrkningsskab (termostat) på klinisk biokemisk afdeling.
                       Prøverne står i bloddyrkningsskabet til næste transport til KMA.
                       Bloddyrkningskolber stilles aldrig i køleskab!


Transport              Der bør foregå mindst to daglige transporter.
                       Transport sker i termokasser (store eller små).
                       Det anbefales, at:
                          o Foregående døgns kolber afleveres inden kl. 10.00
                          o Kolber fra dagtid afleveres inden kl. 15.00
                       Bloddyrkningskolber betragtes som hasteprøver; KMA har på alle
                       hverdage fast bioanalytikervagt til kl. 20.00.


Svarafgivelse          Bloddyrkningskolberne aflæses løbende, normalt i 6 døgn.
                       Telefonsvar afgives straks ved positivt fund. Forespørgsler
                       vedrørende resultater af bloddyrkninger er derfor overflødige.
                       Negativt svar afgives først efter 6 døgn, dog 14 dage ved
                       undersøgelse for brucellose.


Tolkning               Bloddyrkninger kan forurenes fra patientens hud, ved prøvetagning
                       samt under arbejdet i laboratoriet. Et positivt dyrkningsresultat,
                       som ikke er oplagt kontamination (se nedenfor), vil altid blive
                       telefoneret til afdelingen, således at der er mulighed for at diskutere
                       relevansen af det pågældende fund, samt eventuel behandling.
                       Bloddyrkning foretaget via et centralt venekateter vil ofte give
                       vækst af koloniserende bakterier, der ikke nødvendigvis er årsag til
                       septikæmi. Fund af koagulasenegative stafylokokker, coryneforme
                       stave, Propionibacterium acnes og visse andre hudbakterier kan bero
                       på kontamination (forurening) af prøven under prøvetagning. Vækst
                       af samme bakterieart i begge kolber i ét bloddyrkningssæt, udelukker
                       ikke forurening.


Særlige Bemærkninger   Ved formodning om bakteriæmi skal et infektionsfokus altid
                       overvejes, og dyrkning fra fokus søges opnået. Det vil således ofte
                       være relevant med ledsagende prøver af urin, cerebrospinalvæske,
                       ledvæske og aspirater.
                       Ved formodning om infektion med langsomtvoksende bakterier
                       som fx Brucella, samt i visse tilfælde af endocarditis, kan længere
                       inkubationstid og andre særlige foranstaltninger komme på tale. Det
                       er derfor vigtigt, at rekvisitionssedlen udfyldes omhyggeligt.
                             Leptospirose: Ved formodning om infektion med leptospirer sendes
                             også VenojectR-glas med blod til Leptospiroselaboratoriet, Afdeling
                             for mave-tarminfektioner, Statens Serum Institut.
                             TB: Se Statens Serum Instituts Håndbog.
                             Praktiserende læger: Bloddyrkning er kun undtagelsesvis indiceret
                             hos ikke-indlagte patienter (muligt septiske patienter bør indlægges
                             af hensyn til opfølgning og behandling). Henvendelse kan rettes til de
                             klinisk biokemiske afdelinger, som råder over de nødvendige
                             utensilier.


Knoglemarv
Undersøgelsens Princip       Dyrkning af knoglemarv med henblik på kræsne bakterier eller
[MDSM: 10060]                mikroorganismer, som af anden grund erfaringsmæssigt er
                             vanskelige at isolere.


Indikation                   Som supplement til bloddyrkning hos immunkompromitterede
                             patienter. Kan være særligt indiceret hos patienter med mulig
                             brucellose eller histoplasmose.


Tidspunkt for prøvetagning   Udbyttet er størst før start af antibiotisk behandling.


Prøvemateriale               Knoglemarv aspireret fra sternum eller crista iliaca.


Utensilier                   Aerob bloddyrkningskolbe (Grå metalhætte).
                             Øvrige utensilier til knoglemarvsaspiration.


Procedure                    Med henblik på at forebygge stikuheld kan følgende procedure
                             følges: Før aspirationen desinficeres membranen på
                             bloddyrkningskolben og perforeres med kanyle med steril lukkeprop.
                             Efter aspirationen overføres materialet til kolben gennem den påsatte
                             kanyle, som herefter fjernes til kanylebøtte.


Mærkning af                  I rubrikken Prøve fra: under pkt. 380Andet noteres "Knoglemarv".
rekvisitionsseddel           Aktuel infektionsdiagnose anføres, og det er vigtigt at angive
                             formodning om brucellose eller histoplasmose.


Opbevaring                   Bloddyrkningskolben anbringes hurtigst muligt i bloddyrkningsskab.


Forsendelse                  I termokasse; afsendes sammen med sygehusets bloddyrkninger.


Besvarelse                   Aflæses løbende, normalt i 6 døgn.
                         Telefonsvar afgives straks ved positivt fund.
                         Ved formodning om brucellose eller histoplasmose kan der blive tale
                         om at forlænge inkubationstiden ud over de 6 døgn.


Fortolkning              Knoglemarv er principielt et velegnet materiale til dyrknings-
                         undersøgelse på grund af fagocytosefunktionen i marven.
                         Undersøgelsen kunne derfor være særlig indiceret ved formodning
                         om infektion med intracellulære parasitter som Salmonella spp.,
                         Brucella spp., Listeria monocytogenes eller Histoplasma capsulatum.
                         Der synes dog ikke at være foretaget en systematisk sammenligning
                         med moderne bloddyrkningsteknik, hvor blodvolumen er ret stort.
                         Det aspirerede materiale vil normalt indeholde en del perifert blod.
                         Der er formentlig større kontaminationsrisiko ved aspiration af
                         knoglemarv end ved bloddyrkning!


Cerebrospinalvæske
Undersøgelsens Princip   Mikroskopi samt aerob dyrkning af bakterier og svampe med
[MDSM: ?]                påfølgende identifikation og resistensbestemmelse. Anaerob
                         dyrkning foretages kun på speciel indikation (fx hjerneabsces).


Indikation for akut      Purulente spinalvæsker eller spinalvæsker fra klinisk dårlige patienter
mikrobiologisk           med formodet meningitis sendes efter forudgående telefonisk aftale
Undersøgelse             med vagthavende bioanalytiker på KMA.
                         Indikationen for akut mikrobiologisk undersøgelse af klare
                         spinalvæsker i vagtperioden stilles normalt af vagthavende 1.
                         reservelæge på den rekvirerende afdeling, og aftale om forsendelse
                         sker mellem denne og vagthavende bioanalytiker på KMA. Der
                         henvises i øvrigt til afsnittet om afdelingens tilkaldevagt.


Utensilier               Spidsglas (10 ml), sterile.


Prøvetagning             Der udføres huddesinfektion 2 gange, bedst med 2,5 % jodsprit,
                         ellers med 0,5 % klorhexidin i 70 % alkohol. Desinfektionsmidlerne
                         skal have lov at tørre mellem påføringerne og inden punkturen.
                         Hvis spinalvæsken er blodig, bortkastes de første dråber. Derefter
                         opsamles væske til mikrobiologisk undersøgelse og til sidst til klinisk
                         biokemisk afdeling.


Prøvemængde              1-3 ml spinalvæske eller hjerneventrikelvæske (husk at afkrydse den
                         relevante rubrik på rekvisitionssedlen).
                         Kun et glas skal fremsendes til Bakteriologisk afsnit.
                         Eventuelt separat glas til virologisk afsnit (husk medfølgende
                         serumprøve).


Opbevaring               I køleskab (4oC).
Forsendelse              Kort transporttid bør sikres. Forudsat at transporttiden er kort er det
                         mest hensigtsmæssigt ikke at benytte kølekasse.


Svarafgivelse            Svar på akut mikroskopisk undersøgelse af spinalvæske meddeles
                         straks telefonisk til rekvirenten.
                         Ved vækst meddeles dette straks telefonisk.
                         Hjerneventrikelvæsker uden vækst besvares efter 2 døgn,
                         spinalvæsker uden vækst efter 3 døgn.


Tolkning                 Bakterier, der sædvanligvis forårsager meningitis (Neisseria
                         meningitidis, Streptococcus pneumoniae og Haemophilus influenzae)
                         er sjældent årsag til forurening af bakteriologisk prøvemateriale.
                         Svar på mikrobiologisk undersøgelse af spinalvæske udtaget fra
                         patienter med formodet bakteriel meningitis er oftest entydige.
                         Anderledes forholder det sig med neurokirurgiske patienter
                         (specielt patienter med ekstern drænage og/eller trykmåling), hos
                         hvem hjerneventrikelvæsken ofte findes inficeret med bakterier
                         tilhørende den normale hudflora.


Særlige Bemærkninger     Ved formodning om bakteriel meningitis vil der altid være grund til
                         samtidig at foretage bloddyrkning (se bloddyrkning) og evt.
                         mikroskopi/dyrkning fra petecchie (se biopsi) samt dyrkning i
                         forbindelse med sanering af fokus, fx otitis media. KMA
                         videresender meningokokker til typebestemmelse med henblik på
                         epidemiologisk udredning.
                         TB (mykobakterier): Direkte mikroskopi er ikke en tilstrækkelig
                         sensitiv undersøgelse til at udelukke diagnosen tuberkuløs
                         meningitis, og ved klinisk formodning bør behandling påbegyndes,
                         så snart cerebrospinalvæske, ekspektorat, ventrikelskyllevæske, urin
                         og evt. knoglemarv er sikret til undersøgelse på Statens Serum
                         Institut, jævnfør Statens Serum Instituts Håndbog.
                         Leptospirose: Se Statens Serum Instituts Håndbog.


Ekspektorat, broncihial- og trachealsekret
Undersøgelsens Princip   Mikroskopi samt aerob dyrkning med identifikation og
                         resistensbestemmelse af sandsynligt patogene bakterier i prøve fra de
                         nedre respirationsveje hos patienter med formodet infektion.
                         Bedømmelsen af hvilke bakterier, der sandsynligt er patogene,
                         foregår hovedsagelig på basis af mikroskopi af sekretet.
                         Ekspektorater kan være kontamineret med mundhulesekret i en sådan
                         grad, at materialet ved mikroskopi kan bedømmes som uegnet til
                         bakteriologisk diagnostik.
                         Det har vist sig vanskeligt at relatere resultatet af bakteriologisk
                         undersøgelse af selv "gode" ekspektorater til den klinisk diagnose.
                         Dette har medført, at en del afdelinger har erstattet undersøgelsen af
                             ekspektorater med bronchoskopi (bronchioalveolær skyllevæske)
                             eller transtracheal aspiration.


Indikation                   Kun indiceret hos patienter med kliniske/røntgenologiske tegn på
                             nedre luftvejsinfektion.
                             Sædvanligvis ikke indiceret ved feber af ukendt årsag.


Prøvemateriale               Ekspektorater: Ophostet sekret fra nedre luftveje.
                             Bronchial- og trachealsekreter: Materiale aspireret fra trachea eller
                             bronchier.


Tidspunkt for Prøvetagning   Før påbegyndelse af antibiotisk behandling.


Utensilier                   Steril skål & prøvesæt (inkl. plastpipette) eller sugekateter med
                             prøvesæt.
                             NB: Ekspektorater modtaget på podepind kan ikke undersøges på
                             relevant måde.


Prøvetagning                 Ekspektorat: Ophostes i steril skål. Før opsamlingen bør mund og
                             svælg skylles for eventuelle madrester. Læge, sygeplejerske eller
                             fysioterapeut (NB mundbind) bør instruere og assistere patienten
                             under forsøget på at opbringe sekret fra de nedre luftveje. Materiale
                             fremsendes i spidsglas.
                             Bronchialsekret: Ophentes ved sugning fra trachea eller ved
                             sugning gennem bronchoskop. Der bør anvendes mundbind og sterile
                             handsker. Det er væsentligt, at sugekateteret "kinkes" under indføring
                             og udtagning, således at der udelukkende suges i selve
                             trachea/bronchier. Alternativt ophentes sekret ved transtracheal
                             aspiration.


Prøvemængde                  1-2- ml.


Opbevaring                   Køleskab (4° C).


Forsendelse                  Om muligt i kølekasse.


Svarafgivelse                Prøven mikroskoperes ved ankomsten til KMA. Selv materiale
                             ophentet ved tracheal- eller bronchialsugning kan erfaringsmæssigt
                             indeholde materiale fra mundhulen.
                             Prøven vurderes som egnet eller uegnet. Til grund herfor ligger
                             mikroskopi af Gramfarvet præparat med henblik på forekomst af
                             pladeepitelceller og leukocytter ved oversigtsforstørrelse (Objektiv
                             x10):

                             Per synsfelt                      Pladeepitelceller
                         Obj. X 10                         <10                ³10

                                            >25

                         Leukocytter        10-25          Egnet              Uegnet

                                            <10



                         Hvis prøvematerialet ved direkte mikroskopi viser sig uegnet
                         foretages dyrkning ikke. Mikroskopisvar fremsendes med henblik på
                         at ny prøve eventuelt kan fremsendes.
                         Egnede prøver: Ved isolation af bakterier, som svarer til de
                         bakterier, som er iagttaget ved direkte mikroskopi, foretages
                         identifikation og resistensbestemmelse.


Tolkning                 Overensstemmelsen mellem mikroskopiske og dyrkningsmæssige
                         fund bør tillægges væsentlig betydning i vurderingen af bakteriers
                         eventuelle patogene betydning.
                         Påvisning af bakterier i materiale ophentet ved bronchoskopi eller
                         transtracheal aspiration (TTA) har stor vægt og kan oftest tillægges
                         patogenetisk betydning.


Særlige Bemærkninger        1) Hos patienter med bakteriel pneumoni, specielt
                               pneumokokpneumoni, er bloddyrkning en meget værdifuld
                               diagnostisk undersøgelse.
                            2) Hvis en patient er intuberet eller har tracheostomi vil det ofte
                               ikke være muligt ved mikroskopi og dyrkning at skelne en
                               kolonisation af tube eller tracheostoma fra en nedre
                               luftvejsinfektion. De mikrobiologiske fund skal i disse
                               tilfælde sammenholdes særlig kritisk med klinikken.
                            3) Undersøgelse for TB.
                               Hvis der ønskes mikroskopi for TB, skal dette anføres
                               særskilt på rekvisitionssedlen.
                               Mikroskopi for TB udføres ikke akut!
                               Materiale til undersøgelse for TB bør altid også fremsendes til
                               Statens Serum Institut med henblik på mikroskopi og
                               dyrkning, idet sidstnævnte metode er den mest sensitive og
                               kun udføres på Statens Serum Institut
                               (se Serum Instituttets Håndbog).


Bronchioalveolær skyllevæske (BAL)
Undersøgelsens Princip   Undersøgelsen omfatter:
                            1. Mikroskopi og dyrkning for aerobe og anaerobe bakterier
                               med efterfølgende identifikation og resistensbestemmelse.
                                2. Mikroskopi og dyrkning for skimmelsvampe og gærsvampe.
                             Efter særskilt ordination på brun rekvisitionsseddel:
                                3. Direkte mikroskopi for mykobakterier (Ziehl-Neelsen
                                   farvning).
                             Efter særskilt ordination på blå rekvisitionsseddel
                                4. Påvisning af Legionella med PCR teknik
                                   (separat glas med 5-10 ml BAL væske).
                                5. Dyrkning for virus
                                   (separat glas med 5-10 ml BAL væske).
                             Prøvematerialet ophentes ved skylning af et lungeafsnit gennem
                             bronchoskop (engelsk: bronchioalveolar lavage = BAL). Risikoen for
                             kontamination med sekret fra øvre luftveje er til stede. Fund af "orale
                             streptokokker" og anden mundhuleflora er således ikke usædvanlig.
                             Fund i BAL af bakterier og andre mikroorganismer, som kan have
                             patogen betydning, bør derfor vurderes kritisk, som det er tilfældet
                             for ekspektorater og bronkialsekreter, se under tolkning af prøve
                             (BAL).


Indikation                   BAL er en velegnet undersøgelse hos patienter med klinisk eller
                             røntgenologisk mistænkt lungeinfektion. Det gælder særligt patienter,
                             som ikke ekspektorerer, som er intuberet eller som er modtagelige for
                             specielle infektioner fx Pneumocystis carinii på grund af deres
                             immunologiske status (HIV-infektion, leukæmi,
                             immunosuppression).
                             Ved planlægning af BAL er en hæmatologisk vurdering nødvendig
                             for patienter med koagulationsforstyrrelser, ligesom en
                             anæstesiologisk vurdering kan være nødvendig for patienter med
                             respirationsinsufficiens.
                             BAL foretages som en serviceundersøgelse på Lungemedicinsk
                             afdeling og Øre-, Næse og Halsafdelingen, Århus Kommunehospital.


Prøvemateriale               Bronchioalveolær skyllevæske fra det perifere bronchietræ og
                             alveoler.


Tidspunkt for Prøvetagning   Før antibiotisk behandling påbegyndes. Dog kan BAL være en
                             velegnet undersøgelse hos immunkompromitterede patienter med
                             pneumoni, som ikke har responderet på empirisk behandling. BAL
                             bør da foretages, før den empiriske behandling evt. revideres og
                             gerne under antibiotikapause. Af hensyn til den primære
                             mikroskopiske undersøgelse bør KMA adviseres og prøven
                             fremsendt så hurtigt som muligt og inden kl. 19. Mikroskopi for TB
                             foretages ikke akut (kun i almindelig dagtid).
Utensilier             Sterile spidsglas.


Prøvetagning           Gennem fiberbronchoskop instilleres ca. 50 ml tempereret
                       fysiologisk sterilt saltvand i en segmentbronchie og det tilhørende
                       lungesegment. Væsken opsuges og fordeles i prøveglas.


Opbevaring             Køleskab (4 °C).


Rekvisitionsseddel     Mærkes BAL og nærmere lokalisation af bronchie.


Forsendelse            Kort transporttid bør sikres. Evt. forsendelse bør ske i kølekasse.


Svarafgivelse          Mikroskopi: Forekomsten af celler (epitelceller, polymorfkærnede
                       og mononukleære leukocytter) angives per synsfelt (Objekt x 100).
                       Eventuelle bakterier eller svampe angives ved deres
                       morfologi/speciesgruppe.
                       Dyrkning: Aerob og anaerob dyrkning foretages i 2 døgn. (se
                       legionella-påvisning ved hjælp af PCR).


Tolkning               BAL er et værdifuldt prøvemateriale på linje med prøver opnået ved
                       transtracheal aspiration (TTA). Fund af lejlighedsvis patogene
                       bakterier i BAL kan have klinisk betydning, specielt hvis de
                       forekommer i renkultur eller som dominerende fund i betydelig
                       mængde. Dog er patienter med kronisk bronchitis ofte koloniseret i
                       deres dybe luftveje, hvorfor skelnen mellem kolonisation og
                       infektion i denne patientgruppe er vanskelig. Der er derfor
                       overvejelser om at anvende et kvantitativt mål for mængden af
                       mikroorganismer i lighed med signifikansbegrebet inden for
                       urinvejsinfektioner.


Særlige bemærkninger   Pneumocystis carinii: KMA foretager p.t. ikke undersøgelse for
                       Pneumocystis carinii; der henvises til Patologisk-anatomisk institut.
                       Forekomsten af Pneumocystis carinii kan være så massiv, at
                       mikroorganismerne erkendes som Gram-negative i de bakterio-
                       logiske præparater.
                       Svampe: BAL kan være en velegnet metode til påvisning af
                       pulmonale svampeinfektioner (specielt invasiv aspergillose) hos
                       immunkompromitterede patienter, men negativ dyrkning udelukker
                       ikke diagnosen.
                       Dyrkning af mykobakterier: Se Statens Serum Instituts Håndbog.
                       Undersøgelse for TB.
                       Hvis der ønskes mikroskopi for TB, skal dette anføres særskilt på
                       rekvisitionssedlen.
                       Mikroskopi for TB udføres ikke akut!
                             Materiale til undersøgelse for TB bør altid også fremsendes til
                             Statens Serum Institut med henblik på mikroskopi og dyrkning, idet
                             sidstnævnte metode er den mest sensitive og kun udføres på Statens
                             Serum Institut (se Serum Instituttets Håndbog).


Legionella i luftvejssekret
Undersøgelsens Princip       Påvisning af Legionella pneumophilia ved PCR teknik.


Indikation                   Mistanke om legionella infektion. Indtil videre kun efter aftale med
                             laboratoriet på tlf.: (8949) 5610.


Prøvemateriale               Bronchioalveolær skyllevæske (BAL) eller sekret fra trachea og
                             bronchier (evt. ekspektorat).


Tidspunkt for prøvetagning   Tidligst muligt i forløbet.


Prøvetagning                 Se under de respektive afsnit om ekspektorat, tracheal- og
                             bronchiesekret og BAL.


Opbevaring                   I køleskab (4 °C).


Forsendelse                  Evt. I kølekasse. Transporteres direkte til laboratoriet.


Svarafgivelse                Besvares 1 - 2 hverdage efter modtagelse.


Tolkning                     PCR undersøgelsen giver ikke informationer om mængden af
                             legionella i det kliniske materiale. Legionella findes i omgivelserne
                             specielt i vand (NB varmtvandsinstallationer). Med ovennævnte in
                             mente må fund af legionella i luftvejssekreter tages som udtryk for en
                             sandsynlig årsag til en pneumoni.


Særlige Bemærkninger         Metoden er under evaluering. Klinisk sensitivitet og specificitet er
                             uafklaret.


                             Koder til elektronisk rekvisition
                             MDS-systemet:

                             121502014000000 Legionella - PCR; Ekspektorat;

                             121502016000000 Legionella - PCR; Trachealsekret

                             121506015000000 Legionella - PCR; BAL (Bronchioalveolær lavage);

                             IUPAC-systemet(NPU kode):
                             17445 Ex - Legionella pneumophilia(DNA); arb.k.(0 1) =?

                             17506 Sekr(Trachea) - Legionella pneumophilia(DNA); arb.k.(0 1) =?

                             17494 Sekr(Bronchus; spec.) - Legionella pneumophila(DNA); arb.k.(0 1) =?


Us. for bordetella (kighoste) ved PCR
Undersøgelsens Princip       Påvisning af Bordetella pertussis og Bordetella parapertussis ved
                             PCR.


Indikation                   Formodning om kighoste.


Tidspunkt for Prøvetagning   Tidligst muligt i forløbet.


Prøvemateriale               Sekret fra nasopharynx. Der podes fra bagvæggen ved at føre bøjet
                             podepind op bag den bløde gane.


Utensilier                   Bøjet podepind. Spidsglas tilsat 2-3 dråber sterilt saltvand,
                             alternativt virus transportmedium (Stuarts transportmedium kan
                             IKKE anvendes).


Opbevaring                   I køleskab (4 °C).


Forsendelse                  I beskyttelsesrør


Besvarelse                   Besvares som DNA positiv / negativ.


Tolkning                     Påvisning af DNA fra B.pertussis er foreneligt med aktuel eller
                             nylig kighoste.
                             Ved B. parapertussis ses oftest mildere forløb. PCR kan ikke
                             anvendes til at afgøre om patient smitter eller ej, da der påvises
                             såvel levende som døde bakterier.
                             Negativt resultat udelukker ikke infektion.


Svælgpodninger
Undersøgelsens Princip       Rutinemæssigt foretages kun dyrkning med henblik på
                             β-hæmolytiskestreptokokker gruppe A. En dominerende flora af
                             hæmolytiske streptokokker gruppe B, C eller G vil dog også blive
                             bemærket.
                             Ønskes undersøgelse for difteribakterier, meningokokker eller
                             gonokokker, anføres dette særskilt på rekvisitionssedlen.
                             Undersøgelse for andre bakterier samt svampe kan komme på tale i
                             særlige tilfælde, specielt hos immunkompromitterede patienter(særlig
                             ved udtalt granulocytopeni).
Indikation                   Ved kliniske tegn på halsinfektion. I visse tilfælde ved smitte-
                             opsporing (familieepidemier af tonsillit).


Prøvemateriale               Podning fra tonsiller eller tonsillejer, eventuelt andre områder med
                             tegn på inflammation.


Tidspunkt for Prøvetagning   Så vidt muligt før antibiotisk behandling påbegyndes.


Utensilier                   Kulpodepind i Stuart transportmedium.


Prøvetagning                 Det er vigtigt kun at berøre tonsilområde, der skal undersøges, og at
                             opsuge tilstrækkeligt materiale på podepinden.
                             Ved kliniske tegn på epiglottitis bør dette anføres på rekvisi-
                             tionssedlen, idet undersøgelsen i disse tilfælde også vil omfatte
                             kapsulerede stammer af Haemophilus influenzae.
                             NB: Svælgpodning kan dog være kontraindiceret hos patienter med
                             kliniske tegn til epiglottitis; en stor del af patienterne med epiglottitis
                             har bakteriæmi, og patienterne bør så vidt muligt bloddyrkes.


Opbevaring                   Køleskab (4 °C)


Forsendelse                  Eventuelt i kølekasse. Ved forsendelse med postvæsenet
                             anbringes Stuart transportmedium i forsendelseshylster.


Svarafgivelse                Skriftligt svar efter 1-2 døgn.
                             På svaret anføres eventuelle fund af hæmolytiske streptokokker
                             gruppe A, B, C eller G. Der gives almindeligvis ikke meddelelse om
                             fund af andre bakterier.
                             Hvis der er rekvireret undersøgelse for meningokokker, gonokokker
                             eller difteribakterier, anføres det, om der er fundet vækst af disse
                             bakterier eller ej, medens vækst af andre mikroorganismer ikke
                             anføres.


Tolkning                     Hverken pneumokokker, hæmophilusarter, andre Gramnegative stave
                             eller stafylokokker giver anledning til halsbetændelse.
                             β-hæmolytiske streptokokker gruppe A kan forekomme hos helt
                             symptomfrie bærere. Betydningen af β-hæmolytiske streptokokker
                             gruppe B, C eller G er ikke afklaret.
                             Det er ikke indiceret rutinemæssigt at foretage kontroldyrkning efter
                             behandling for infektion med β-hæmolytiske streptokokker gruppe A,
                             da en eventuel bærertilstand af kortere eller længere varighed ikke
                             har klinisk betydning og specielt ikke er forbundet med risiko for
                             udvikling af febris rheumatica.
Særlige Bemærkninger         Når der i sjældne tilfælde ønskes undersøgt for andre bakterier end β-
                             hæmolytiske streptokokker eller svampe, skal indikationen for denne
                             undersøgelse tydeligt angives på rekvisitionssedlen under rubrikken
                             “Ønsket undersøgelse”.
                             Arcanobacterium (Corynebacterium) haemolyticum er lejlighedsvis
                             associeret med et skarlatinalignende sygdomsbillede.


Urin
Undersøgelsens Princip       Kvantitativ aerob dyrkning i 1 døgn med påfølgende identifikation og
                             resistensbestemmelse af bakterier (og svampe), som forekommer i
                             betydende mængde, eller som af anden grund skønnes at have klinisk
                             betydning.


Indikation                   Hos patienter med recidiverende urinvejsinfektioner er der altid
                             indikation for dyrkning.
                             Nitrittesten eller mikroskopi udgør for bestemte patientgrupper et
                             alternativ til urindyrkning:
                             Ukomplicerede urinvejsinfektioner: En positiv mikroskopi eller
                             nitrittest ("stix") på en korrekt opbevaret urinprøve overflødiggør
                             urindyrkning.
                             Screening i forbindelse med urologisk undersøgelse og
                             behandling: Nitrittest kombineret med leukocyt-esterasetest kan
                             anvendes til frasortering af negative urinprøver.
                             Kontroldyrkning efter afsluttet antibiotisk behandling af ukompli-
                             ceret cystitis er ikke indiceret.
                             Dyrkning fra patienter med blærekateter er i reglen kun indiceret ved
                             feber, hvor også bloddyrkning bør overvejes.


Prøvemateriale               Midtstråleurin.


Bemærkninger                 Hospitalsafdelinger: Urinen opsamles og indsendes med "Urin-
                             Monovette" rør, som kan rekvireres med følgende regions-
                             rekvisionsnummer: 11003275.
                             Praktiserende læger: Urinen opsamles og indsendes med "Urin-
                             Monovette" rør som er tilsat borsyre.
                             "Toileturin", det vil sige urin der er opsamlet direkte i et bækken eller
                             urinflaske, kan ikke anvendes til bakteriologisk diagnostik.


Tidspunkt for prøvetagning   Det er bedst at undersøge morgenurin, alternativt urin opsamlet 2
                             timer efter forrige vandladning.


Utensilier                   "Urin-monovette" kit med og uden borsyre. Den opsamlede urin
                             overføres med den indbygget sprøjte i "Urin-monovette" kittet link
Prøvetagning           Afvaskning spiller ikke nogen rolle for kontamination ved korrekt
                       opbevaring og fremsendelse af prøven!
                       Mænd: Vandet lades og den sidste del (midtstråleurin) opsamles
                       direkte i plastbæger.
                       Kvinder: Labia holdes adskilt for at hindre tilblanding af fluor
                       vaginalis. Vandet lades, og den sidste del opsamles i plastbæger.
                       Spædbørn: Hos spædbørn kan poseurin anvendes til bakteriologisk
                       undersøgelse. Der bør foretages omhyggelig afvaskning, inden posen
                       påsættes. Man bør tilse posen hver ½ time, og så snart der er urin i
                       posen, opsamles denne.
                       På trods af disse forholdsregler ses ofte falsk positive dyrkninger
                       fra poseurin.
                       Ved positiv dyrkning fra poseurin bør undersøgelsen gentages
                       eventuelt i form af blærepunkttur.


Prøvemængde            Mindst op til "minimums stregen" på opsamlingsrøret


Opbevaring             Stuetemperatur. Indsendes så hurtigt som muligt.


Forsendelse            Intern transport eller via postvæsenet.


Svarafgivelse          Ved negativt fund afgives svar efter 1. døgn, ved fund af bakterier
                       afgives svar efter 1-2 døgn.


Tolkning               Bakterietallet oplyses, hvis det er >103 per ml urin. Almindeligvis
                       taler >104 kolonier/ml urin stærkt for urinvejsinfektion, og der vil
                       rutinemæssigt blive udført identifikation og resistensbestemmelse.
                       Ved fund af blandingskultur foretages identifikation og
                       resistensbestemmelse efter skøn, men det vil almindeligvis dreje sig
                       om forurening, hvorfor disse prøver vil blive besvaret uden nærmere
                       identifikation og følsomhedsbestemmelse.


Særlige bemærkninger   Fundet af bakterier skal altid sammenholdes med patientens
                       symptomer og kliniske tilstand. Specielt er påvisning af bakteriuri
                       og/eller leukocyturi hos kateterbærere og ældre kvinder ikke i sig
                       selv indikation for antibiotisk behandling.
                       Uafkølet urin fremsendt i glas via postvæsenet vil ikke blive dyrket
                       (kan være falsk positive på grund af sekundær opformering).
                       TB: Urin til undersøgelse for TB skal sendes til Mykobakterie-
                       afdelingen, Statens Serum Institut (se Serum Instituttets Håndbog).
                       Leptospirose: Se Statens Serum Instituts Håndbog.
Gonokokker
Undersøgelsens Princip       Dyrkning i 2 døgn i CO2-atmosfære på selektivt substrat med
                             påfølgende identifikation af Neisseria gonorrhoeae.


Indikation                   Formodning om gonoroisk infektion. Hos kvinder eventuelt før
                             provokeret abort eller andre intrauterine indgreb.


Prøvemateriale               Slimhindesekret fra urethra, cervix, rektum, svælg og øjne.


Tidspunkt for Prøvetagning   Så tidligt som muligt i sygdomsforløbet og inden antibiotisk
                             behandling påbegyndes.


Utensilier                   Kulpodepind i Stuart transportmedium.


Prøvetagning                 Dyrkningsmaterialet opsamles med en kulpodepind, som anbringes i
                             Stuart transportmedium.
                             Ved podning fra øjensekret (konjunktivitis) anvendes en hvid
                             podepind.
                             Ved podning fra cervix er det vigtigt, at podepinden ikke kommer i
                             berøring med vaginalvæggen eller vaginalsekreter.


Opbevaring                   I køleskab (4 °C).


Forsendelse                  Prøver bør så vidt muligt være KMA i hænde inden 24 timer efter
                             prøvetagningen. Ved forsendelse med postvæsenet emballeres Stuart
                             transportmedium i forsendelseshylster.


Svarafgivelse                Positivt svar afgives telefonisk hyppigst efter 1-2 døgn, i visse
                             tilfælde kan identifikationen dog tage længere tid.
                             Negativt svar afsendes efter 2 døgn.
                             Foretages efterfølgende en mere omfattende resistensbestemmelse i
                             samarbejde med Neisseria-afdelingen, Statens Serum Institut.
                             Supplerende svar følger. Resultatet kan oplyses telefonisk; det er af
                             særlig betydning ved behandlingssvigt.


Særlige Bemærkninger         I visse tilfælde kan dyrkningspladerne overvokses af andre
                             bakterier/gærsvampe, hvorfor eventuel tilstedeværelse af Neisseria
                             gonorrhoeae ikke kan påvises.
                             Fremsendelse af ny prøve. Hos kvinder er der altid indikation for
                             samtidig dyrkning fra cervix, rectum og svælg, og hos mænd fra
                             urethra, rectum og svælg.
Chlamydia trachomatis
Undersøgelsens Princip   Påvisning af Chlamydia trachomatis ved DNA-forstærkningsmetode.
[MDSU: 12253]
Indikation                Mænd:             Urethritis, epididymitis (under 35 år) og
                                            eventuelt proctitis og konjunktivitis.


                          Kvinder:          Fluor vaginalis, cervicitis, salpingitis, "abakteriel
                                            cystit" / "urethral syndrom" og eventuelt
                                            konjunktivitis.
                                            Oplægning af spiral, provokeret abort eller andre
                                            intrauterine indgreb.
                          Nyfødte:          Konjunktivitis og eventuelt pneumoni.
                         På baggrund af de mange asymptomatiske tilfælde vil følgende
                         risikofaktorer kunne give anledning til et tilbud om undersøgelse:
                               seksuelt aktive unge under 25 år (årlig undersøgelse).
                               partnerskifte eller flere partnere i de sidste 6 måneder.
                               partner med symptomer.


Prøvemateriale           Podning fra inficeret slimhinde (øjne, cervix eller urethra) eller urin i
                         udvalgte tilfælde.
                         Vaginalpipettemateriale se under særlige bemærkninger..


Utensilier               Podningssæt indeholdende to podepinde. Den tykke er beregnet til at
                         fjerne exocervicalt slim (kasseres herefter). Den tynde anvendes til
                         podning fra cervix eller urethra M/K.
                         Prøvetagningsmaterialet opbevares ved stuetemperatur.


Rekvisitionsseddel       Prøvesæt kan rekvireres på tlf. 8949 23-27, kontroller udløbsdato
                         (datomærket) før brug! (vejledning og speciel grøn
                         rekvisitionsseddel medsendes).


Prøvetagning             Chlamydia findes i slimhindens epithelceller - og ikke i pus.
                         Derfor skal pus og sekret fjernes før selve prøvetagningen, som skal
                         foregå med et så kraftigt tryk, at epithelceller skrabes løse.
                         Podepindene er perforerede, så de knækker på det rigtige sted. Brug
                         venligst mærkaten på glasset til patientnavn og CPR-nummer.
                         Indsendte glas må kun indeholde én podepind!


Prøvetagning             Chlamydia findes i slimhindens epithelceller - og ikke i pus.
                         Derfor skal pus og sekret fjernes før selve prøvetagningen, som skal
                   foregå med et så kraftigt tryk, at epithelceller skrabes løse.
                   Podepindene er perforerede, så de knækker på det rigtige sted. Brug
                   venligst mærkaten på glasset til patientnavn og CPR-nummer.
                   Indsendte glas må kun indeholde én podepind!


Konjunktiva           a. Der anvendes den tynde podepind.
                      b. Det nedre øjelåg trækkes ned. I nogle sekunder roteres
                         podepinden på konjunktivalslimhinden.
                      c. Podepinden anbringes i transportglasset.


Cervix                a. Den ene store podepind anvendes til fjernelse af slim
                         fra exocervix. Denne podepind kasseres.
                      b. Den tynde podepind indføres i den endocervikale kanal indtil
                         det meste af spidsen ikke er synlig.
                      c. Rotér podepinden grundigt i 5-10 sek. med tilstrækkeligt tryk
                         til at løsrive cylinderepithelceller.
                      d. Træk podepinden ud uden at berøre vaginas overflade.
                      e. Podepinden anbringes i transportglasset.


Urethra               a. Fjern eventuelt generende pus inden prøvetagningen.
                      b. Før den tynde podepind 2-4 cm ind i urethra.
                      c. Rotér podepinden for at overføre celler.
                      d. Lad podepinden blive i urethra i ca. 2 sekunder inden den
                         trækkes ud.
                      e. Podepinden anbringes i transportglasset.


Rectum og tonsil   Kun ved specifikke symptomer.
                   Kan af analysetekniske grunde være problematiske selv ved DNA-
                   forstærknings-teknik (KMA bør kontaktes forinden).


Urin               "First void" urin (første vandladning om morgenen) indsendt i
                   sterilt prøvetagningsglas (min. 5-10 ml. i almindelig urin spidsglas)
                   kan anvendes til Chlamydia diagnostik hos mænd.
                   Der kan være hæmningsfænomener på grund af specielle
                   komponenter i urinen (falske negative svar).
                   For kvinder bør urinprøver ikke træde i stedet for en urethra/-
                   cervixpodning - varierende hormonale faktorer under
                   menstruationscyklus synes kraftigt at påvirke påvisningen af
                   chlamydia i urinen hos kvinder (falske negative svar)!
Opbevaring                   I køleskabe (4 °C).


Svarafgivelse                Svar vil blive afsendt 1-2 hverdage efter modtagelse af prøven.


Tolkning                     Besvares som positiv eller negativ. DNA-forstærknings-metoden har
                             en samtidig høj sensitivitet og specificitet (>99,5 %).
                             Kontrolprøver bør ikke udføres efterfølgende, da DNA-metoden
                             er så følsom, at selv døde chlamydia eller rester heraf kan påvises i
                             mange uger efter endt behandling ("falsk" positivt svar).


Særlige bemærkninger         Vaginal skylning ved hjælp af en pipette synes at være en særdeles
                             velegnet metode (følsom og specifik) for diagnostik af cervix-
                             infektioner, men er på nuværende tidspunkt kun afprøvet og
                             tilgængelig i forbindelse med screenings-undersøgelser (selvtagne
                             prøver).


Trichomonas vaginalis
Undersøgelsens Princip       Dyrkning af Trichomonas vaginalis i specialsubstrat.
                             Alternativt kan diagnosen stilles ved undersøgelseslejet ved direkte
                             mikroskopi af vaginal/urethralsekret.


Indikation                   Formodning om trichomoniasis: vaginitis og/eller urethritis.


Tidspunkt for Prøvetagning   Ikke væsentligt.


Prøvemateriale               Vaginalsekret (fornix posterior) eller urethralsekret.


Utensilier                   Kulpodepind og Stuart transportmedium.


Opbevaring                   I køleskabe (4 °C).


Forsendelse                  I beskyttelsesrør, med postvæsenet.


Besvarelse                   Svar med resultat af dyrkning afsendes 3-5 dage efter prøvens
                             modtagelse.


Vaginalpodning
Indikation                   Vaginalpodning er en prøve, som har stærkt begrænset klinisk
                             værdi. Sundhedsstyrelsens Vejledning for diagnose og behandling af
                             seksuelt overførbare sygdomme (1992), side 44 & 52 anbefaler
                             direkte mikroskopi frem for dyrkning.
                         Uspecifik vaginitis (bakteriel vaginose) diagnosticeres ved en
                         såkaldt amintest, det vil sige pådrypning af 10 % kalium-hydroxid
                         på vaginalsekretet. Frigørelse af en fiskeagtig lugt er et sikrere tegn
                         på uspecifik vaginitis end påvisning af Gardnerella vaginalis ved
                         dyrkning.
                         Gærceller og Trichomonas vaginalis kan ligesom "clue cells" påvises
                         ved undersøgelseslejet ved hjælp af den direkte mikroskopi af
                         vaginalsekretet.
                         Findes vaginalpodning indiceret, er det vigtigt af hensyn til prøvens
                         behandling i laboratoriet at anføre, hvilke(n) mikroorganisme(r), der
                         ønskes identificeret (se Tolkning).
                         Undersøgelse for Chlamydia trachomatis bør foretages på vid
                         indikation (se Gonokokker). Ved tegn på cervicitis anbefales under-
                         søgelse af cervikalsekret for gonokokker.


Undersøgelsens Princip   Aerob dyrkning og efterfølgende påvisning af eventuel dominerende
                         mikroorganisme.


Prøvemateriale           Slimhindesekret fra vagina.


Utensilier               Kulpodepind i Stuart transportmedium.


Prøvetagning             Materialet opsamles på kulpodepinden direkte fra slimhinden.
                         Podepinden anbringes i glas med Stuart transportmedium.


Prøvemængde              Tilstrækkeligt til at fugte podepinden.


Opbevaring               I køleskabe (4 °C).


Forsendelse              Så vidt muligt i kølekasse. Forsendelse med postvæsenet kan dog
                         anvendes. I så fald anbringes Stuart transportmedium i
                         forsendelseshylster.


Svarafgivelse            Resultatet af dyrkning besvares tidligst 2 døgn efter modtagelsen.


Tolkning                 Vaginalpodning er ikke nogen ideel metode til at vurdere ætiologien
                         til en vaginal inflammation, bl.a. fordi Gardnerella vaginalis næppe i
                         sig selv er det ætiologiske agens til uspecifik vaginitis, men kun
                         indikator på, at der kan være sket forskydninger i vaginalfloraens
                         økologi med overvækst af anaerobe bakterier.
                         Gravide: Hos gravide kan bakterier i vaginalfloraen som fx β-
                         hæmolytiske streptokokker gruppe B eller Haemophilus influenzae
                         spille en rolle for intrauterin såvel som intrapartum og postpartum
                            infektion. β-hæmolytiske streptokokker gruppe B kan muligvis
                            sammen med andre mikroorganismer spille en rolle for præterm
                            fødsel.
                            Derfor kan der specielt hos kvinder, som tidligere har født et
                            inficeret barn eller har haft en inficeret abort, være indikation for at
                            foretage dyrkning med henblik på den tidligere påviste bakterieart.
                            For sådanne prøver bør det af rekvisitionssedlen fremgå, at patienten
                            er gravid (eventuelt graviditetsuge) og hvilken bakterie, der ønskes
                            dyrket for.


Us. for tarmpatogene bakterier fra fæces
Undersøgelsens princip og   Standard undersøgelse for dyrkning af fæces omfatter følgende
omfang                      bakterier: Salmonella, Shigella, Vibrio, Yersinia enterocolitica og
                            Campylobacter, Aeromonas, Plesiomonas.
                            For særlige patientgrupper inkluderes følgende patogener
                            rutinemæssigt i undersøgelsen, såfremt anamnestiske oplysninger
                            foreligger:
                            Verotoksinproducerende Escherichia coli (VTEC/EHEC) og
                            enteropatogene E. coli (EPEC)
                               o makroskopisk blodig diaré,
                               o patienter med hæmolytisk uræmisk syndrom (HUS) eller
                                 trombotisk trombocytopenisk purpura (TTP)
                               o børn under 7 år.
                            Clostridium difficile
                               o hos patienter med formodet antibiotika-udløst diare,
                               o hos hospitalsindlagte patienter med pseudomembranøs
                                 colitis.
                            Der kan undersøges for andre bakterier og evt. virus efter aftale.
                            Undersøgelse for parasitter kan udføres på de samme prøver (se
                            senere).


Indikation                  Klinisk:
                               o Akut gastroenterit af nogle dages varighed
                               o Længerevarende (> 2 uger) diarésygdom,
                               o Blodtilblandet diaré,
                               o Rejsediaré,
                            Epidemiologisk:
                               o Ved ophobede tilfælde af diarésygdom
                             Præventivt:
                                o Diarésygdom hos personer hvis arbejde indebærer risiko for
                                  smittespredning.
                             Angives en af nedenstående kliniske indikationer kan følgende
                             undersøgelser forventes:

                                                  Standard      E.coli   C.difficile   Parasitter
                             Klinisk indikation
                                                  us.

                             Akut diaré (opstået X
                             i Danmark)

                             Længerevarende       X                                    X
                             diaré

                             Mistanke om          X                                    X
                             rejsediaré

                             Antibiotika udløst   X                      X
                             diaré

                             Blodig diaré         X             X

                             Vedr. parasit-undersøgelse: se bagerst i dokumentet.


Prøvemateriale               Ca. 5 ml fæces (pus, blod eller slim tages med i prøveglasset).
                             Fyld højst prøveglasset med 1/3.


Tidspunkt for prøvetagning   Ved diarésygdomme påvises bakterierne lettest i fæces fra de første
                             sygdomsdage. Ved septiske salmonella infektioner (tyfus og
                             paratyfus) forekommer bakterierne inkonstant i fæces i sygdommens
                             begyndelse (men de kan da påvises ved almindelig bloddyrkning).
                             Prøven bør ikke udtages på tidspunkter der medfører, at den
                             modtages i laboratoriet på søn- eller helligdage med mindre der er
                             truffet aftale med vagthavende læge, Klinisk mikrobiologisk
                             Afdeling (KMA), Skejby Sygehus om dyrkning.


Utensilier                   Universalkontainer til fæces (uden tilsætning) og transportkontainer
                             (yderhylster) til forsendelse.
                             Sygehusafdelinger rekvirerer utensilier fra Centraldepotet på det
                             lokale sygehus.
                             Praktiserende læger rekvirerer utensilier via Driftsafdelingen, Århus
                             Kommunehospital (sammen med forbindsstoffer som står på
                             "Positivlisten"; angiv vare-nr: 301750).


Prøvetagning                 Frisk kvitteret fæces fra bækken. For patienter i eget hjem kan
                             opsamling ske i wc-kumme præpareret med en avis.
Prøvemængde          Ca. 5 ml fæces (pus, blod eller slim tages med i prøveglasset) per
                     prøve. Én prøve er tilstrækkelig såfremt symptomerne har varet få
                     dage (< 1uge). Er dyrkningsresultatet negativt og der fortsat er diaré
                     kan yderligere 2 separate prøver tages.
                     Har symptomerne varet i mere end 2 uger tages 3 prøver med det
                     samme (fra separate toiletbesøg).
                     Undersøgelse for parasitter kan udføres på de samme prøver
                     (foretages af afd. Q, Skejby Sygehus). Af hensyn til sensitiviteten af
                     den parasitologiske undersøgelse bør der tages i alt 3 prøver.
                     Parasit-undersøgelse kræver udfyldelse af særskilt rekvistionsseddel.
                     Prøver hvorpå der skal foretages både bakteriologisk og
                     parasitologisk undersøgelse indsendes i samme kuvert til KMA.
                     KMA sørger for videreforsendelse.


Rekvisitionsseddel   Der anvendes rekvisitionsseddel til Klinisk Mikrobiologisk Afdeling,
                     Skejby Sygehus. Husk, én prøveseddel per prøveglas.
                     Der krydses af i rubrik 23 (øverst til højre) på rekvisitionssedlen og
                     der skrives fæces. Af hensyn til undersøgelsens omfang er det vigtig
                     at der anføres relevante kliniske oplysninger (under rubrikken
                     ”Aktuel infekt.diagnose”). Se under kliniske indikationer.
                     Såfremt der ønskes undersøgelser for parasitter (foretages af afd. Q)
                     skal særskilt rekvisitionsseddel udfyldes.


Opbevaring           I køleskabe (4 °C).


Forsendelse          Almindelig post. Forsendelsesmåden skal sikre at der går mindre end
                     1 døgn fra prøvetagningen til modtagelsen i laboratoriet.
                     Prøver hvor der også ønskes parasitologisk undersøgelse sendes
                     primært til Klinisk mikrobiologisk Afdeling, Skejby Sygehus, som
                     sørger for videreforsendelse til afd. Q.


Svarafgivelse        Skriftligt svar afsendes 2 døgn efter dyrkningens igangsættelse hvis
                     der ikke er fundet noget bakteriologisk abnormt. Ved fund af
                     sygdomsfremkaldende bakterier besvares når et resultat foreligger,
                     sædvanligvis efter yderligere 1-2 døgn.
                     Hospitalsafdelinger med indlagte patienter vil endvidere få et
                     telefonisk svar.


Tolkning             Negativt bakteriefund udelukker ikke infektion. Bakteriepåvisningen
                     kan svigte fordi udskillelsen er sparsom, ophørt eller undertrykt af
                     antibiotika. Positivt bakteriefund kan ses under aktuel sygdom og
                     efter overstået sygdom eller - ved tyfus og paratyfus - som led i en
                     kronisk infektion med vedvarende udskillelse.
                     Et positivt bakteriefund er ikke i sig selv en indikation for antibiotisk
                     behandling. Såfremt patienten er alment medtaget er der indikation
                              for indlæggelse.


Kontroldyrkning               Er kun relevant ved fund af Salmonella typhi, Salmonella paratyphi,
                              Shigella dysenteriae type 1 og VTEC.


Særlige bemærkninger         Indlagte patienter bør altid bloddyrkes.
                             Escherichia coli
                                 o Verotoksin-producerende E. coli (VTEC) er en væsentlig
                                   årsag til blodig diaré især hos børn og en mulig årsag til
                                   hæmolytisk uræmisk syndrom (HUS).
                                   Enteropatogene E. coli (EPEC) er den hyppigste bakterielle
                                   årsag til diaré hos børn under 2 år.
                             Gastroenteritis epidemi på institution (fx Norwalk virus)
                                 o Afføringsprøver i forbindelse med udredning af ophobede
                                   tilfælde af gastroenteritis på hospitalsafdelinger sendes
                                   primært til Statens Serum Institut.
                             Clostridium difficile
                                 o Fund af Clostridium difficile skal altid vurderes i
                                   sammenhæng med det kliniske billede. Hos børn under 2 år er
                                   fund af Clostridium difficile meget hyppigt, og ca. 3 % af
                                   voksne er raske bærere. Påvisning af toksinproduktion er en
                                   usikker undersøgelse med ringe korrelation til
                                   sygdomsaktivitet.


Anmeldelsespligt             Sygdom fremkaldt af Salmonella typhi, Salmonella paratyphi,
                             Shigella dysenteriae, Vibrio cholerae og verotoksinproducerende E.
                             coli (VTEC/EHEC) er anmeldelsespligtige for rekvirenten.
                             Der er endvidere anmeldelsespligt for udbrud af levnedsmiddelbårne
                             (og vandbårne) sygdomme, (klinisk diagnose + mistanke til bestemt
                             smittekilde).
                             Jvf. Sundhedsstyrelsens Bekendtgørelse om Lægers Anmeldelse af
                             Smitsomme Sygdomme mv., nr. 277 af 14. april 2000, samt
                             Vejledning nr. 61 af 14. april 2000.
                             Fund i laboratoriet af tarmpatogene bakterier indberettes til Statens
                             Serum Institut. Som led i det nationale overvågningsprogram udbeder
                             Statens Serum Institut sig undertiden supplerende oplysninger fra
                             rekvirenten.


Parasitologisk undersøgelse Parasitologisk undersøgelse af fæces omfatter altid ormeæg og cyster,
                            og ved angivelse af ”Rejsediaré” også Cryptosporidium parvum /
                            Cyclospora cayetanensis.
                            Af hensyn til parasit-undersøgelsens sensitivitet bør der tages i alt 3
                            prøver.
                            Parasit-undersøgelse kræver særskilt rekvistionsseddel. Under-
                            søgelsen foretages af Parasitologisk Laboratorium,
                            Infektionsmedicinsk afdeling Q, Skejby Sygehus.
                            (se www.auh.dk/sks/afd/afdq/dk/parasito.htm)


Ledvæsker og knogleaspirater
Undersøgelsens princip      Mikroskopi, dyrkning med efterfølgende identifikation og
                            resistensbestemmelse.


Prøvemateriale              Ledvæsker.
                            Knogleaspirater fra osteogent infektionsfocus.
                            Dyrkning af knogleaspirat er et vigtigt supplement til dyrkning af
                            biopsimateriale (se Biopsi).
                            Fremsendelse af selve aspiratet i sprøjte muliggør et bedre
                            dyrkningsresultat end fremsendelse af materiale på podepind.


Tidspunkt for prøvetagning Så vidt muligt før antibiotisk behandling påbegyndes.


Utensilier                  Engangssprøjte(r). Prop påsættes inden forsendelse!


Prøvetagning                Prøven udtages sædvanligvis ved perkutan punktur, efter desinfektion
                            som ved bloddyrkning (Bloddyrkning), eller under operation.


Prøvemængde                 Så meget materiale som muligt, gerne i flere sprøjter.
                            Ved ledvæsker dog ikke mere end 20 ml. fra hvert led.


Opbevaring                  I køleskabe (4 °C).


Forsendelse                 Fremsendes hurtigst muligt.


Svarafgivelse               Telefonsvar: Hvis der ved direkte mikroskopi gøres fund, der skønnes
                            relevante for diagnostik og behandling, vil dette blive meddelt
                            telefonisk.
                            Vækst i prøven meddeles også telefonisk.
                            Negative prøver besvares skriftligt efter 6 døgn.


Tolkning                    Ved god prøvetagningsteknik er falske positive fund sjældne.


Særlige                     Hvis der ønskes mikroskopi for TB, skal dette anføres særligt på
                            rekvisitionssedlen, og prøve til mikroskopi og dyrkning fremsendes
bemærkninger                sideløbende til Mykobakterieafdelingen, Statens Serum Institut.
Ascitesvæske og peritonealdialysevæske
Undersøgelsens princip      Mikroskopi, aerob og anaerob dyrkning og påfølgende identifikation
                            og resistensbestemmelse.


Prøvemateriale              Aspirat fra peritoneum (ascitesvæske) og peritonealdia-lysevæske
                            (CAPD).


Tidspunkt for prøvetagning Så vidt muligt før antibiotisk behandling påbegyndes.


Utensilier                  Spidsglas, sterile.
                            Bloddyrkningskolber (BacT/Alert).


Prøvetagning                Prøven udtages sædvanligvis ved perkutan punktur efter desinfektion
                            som ved bloddyrkning (se bloddyrkning) eller fra CAPD-kateteret
                            efter samme princip som ved perkutan punktur.


Prøvemængde                 Så meget materiale som muligt, spidsglasset må dog kun fyldes halvt.
                            Kanyle påsættes sprøjten med ascitesvæske, og der overføres 10 ml til
                            den aerobe (grå metalhætte) og 10 ml den anaerobe (lilla
                            metalhætte) bloddyrkningskolbe. Husk at membranen på de to
                            bloddyrkningskolber skal desinficeres med alkohol forinden!


Opbevaring                  Spidsglas i køleskab (4 °C). Bloddyrkningskolberne ved stue-
                            temperatur.


Forsendelse                 Fremsendes hurtigst muligt, spidsglas helst i kølekasse.


Rekvisition                 Der udfyldes én rekvisitionsseddel (brun) til spidsglasset og én seddel
                            til de to bloddyrkningskolber. Under rubrikken Prøvens art anføres
                            under punkt 380 "Andet" Ascites-væske eller peritonealdialysevæske.


Svarafgivelse               Telefonsvar: Såfremt der ved direkte mikroskopi gøres fund, der
                            skønnes relevante for diagnostik og behandling, vil dette blive
                            meddelt telefonisk (kun på prøve fremsendt i spidsglas!).
                            Negative prøver besvares efter 3-4 døgn.


Tolkning                    Fund af bakterier kan sædvanligvis anses som patologisk. Det kan
                            dog være vanskeligt at skelne mellem kolonisation og infektion i
                            bloddyrkningskolberne (se under bloddyrkning).
Særlige bemærkninger        Hvis der ønskes mikroskopi for TB, skal dette anføres særskilt på
                            rekvisitionssedlen, og prøve til mikroskopi og dyrkning fremsendes
                            sideløbende til Mykobakterieafdelingen, Statens Serum Institut.


Pleuravæske og andre aspirater
Undersøgelsens princip      Mikroskopi, aerob og anaerob dyrkning og påfølgende identifikation
                            og resistensbestemmelse.


Prøvemateriale              Punkturvæsker fra sædvanligvis sterile områder som fx pleura og
                            perikardium.


Tidspunkt for prøvetagning Så vidt muligt før antibiotisk behandling påbegyndes.


Utensilier                  Spidsglas, sterile.


Prøvetagning                Prøven udtages sædvanligvis ved perkutan punktur efter desinfektion
                            som ved bloddyrkning (se Bloddyrkning).


Prøvemængde                 Så meget materiale som muligt, glasset må dog kun fyldes halvt.


Opbevaring                  I køleskabe (4 °C).


Forsendelse                 Fremsendes hurtigst muligt, helst i kølekasse.


Svarafgivelse               Telefonsvar: Såfremt der ved direkte mikroskopi gøres fund, der
                            skønnes relevante for diagnostik og behandling, vil dette blive
                            meddelt telefonisk.
                            Negative prøver besvares efter 5 døgn.


Tolkning                    Fund af bakterier kan sædvanligvis anses som patologisk. Såfremt der
                            er indlagt fremmedlegemer i kaviteten (fx dræn), kan det dog være
                            vanskeligt at skelne mellem kolonisation og infektion.


Særlige bemærkninger        Hvis der ønskes mikroskopi for TB, skal dette anføres særskilt på
                            sedlen. Prøve til mikroskopi og dyrkning fremsendes sideløbende til
                            Mykobakterieafdelingen, Statens Seruminstitut.


Mave-/tarmsekreter
Undersøgelsens princip      Aerob og anaerob dyrkning med påfølgende identifikation og
                            resistensbestemmelse.
                            Der gøres ikke rutinemæssigt forsøg på isolering af Helicobacter
                            pylori.


Prøvemateriale              Galde, ventrikelvæske, duodenalsekret etc.


Tidspunkt for prøvetagning Så vidt muligt før antibiotisk behandling påbegyndes.


Utensilier                  Spidsglas, sterile.


Prøvetagning                Omhyggelig aseptisk teknik.


Prøvemængde                 Spidsglasset må kun fyldes halvt op.
                            1-2 ml er tilstrækkelig.


Opbevaring                  I køleskab (4 °C).


Forsendelse                 I kølekasse. Af hensyn til dyrkning af anaerobe bakterier bør hurtig
                            fremsendelse tilstræbes.


Svarafgivelse               Negative prøver besvares efter 2 døgn.


Tolkning                    Afhænger af den kliniske situation.
                            Clostridium difficile: Ved formodning om antibiotikaassocieret diarré
                            kan tarmsekret efter forudgående aftale modtages til dyrkning for
                            Clostridium difficile.
                            Tarmpatogene bakterier: se Tarmpatogene.


Pus og sårsekret
Undersøgelsens princip      Mikroskopi (om muligt), aerob og anaerob dyrkning med påfølgende
                            identifikation og resistensbestemmelse.


Indikation                  Ved kliniske tegn på infektion i sår eller bløddele.
                            Ved kroniske sår (fx ulcus cruris eller decubitus) er dyrkning som
                            hovedregel ikke indiceret.
                            Dyrkning fra fistelåbninger giver ofte vækst af en "fistelflora", der
                            sjældent er repræsentativ for en eventuel "dybereliggende" infektion.
                            Det gælder dog, at fundet af Staphylococcus aureus taler for
                            dybereliggende infektion.


Prøvemateriale              Aspireret pus eller sekret foretrækkes. Kulpodepind anvendes kun,
                            hvor det ikke er muligt at fremsende aspireret materiale.


Tidspunkt for prøvetagning Så vidt muligt før antibiotisk behandling påbegyndes.


Utensilier                  Sprøjte til aspiration af materiale. Steril lukkeprop.
                            Til større mængder anvendes sterilt spidsglas.
                            Kulpodepind i Stuart transportmedium.


Prøvetagning                NB: Det er altid bedst at fremsende selve det inficerede materiale
                            frem for en podepind.
                            Ved mængder over ½-1 ml bør materialet overføres til et sterilt
                            spidsglas, aldrig til Stuart transportmedium.
                            Ved mindre mængder kan materialet fremsendes i den sprøjte, der er
                            anvendt til aspiration: kanylen fjernes og anbringes i kanyleboks, og
                            sprøjten sikres med steril lukkeprop. Af hensyn til dyrkning af
                            anaerobe bakterier bør luft-tilblanding i sprøjter undgås.
                            Ved bløddelsinfektion uden pussekretion eller abscesdannelse
                            (flegmone, cellulitis o.lign.) kan prøvemateriale opnås på følgende
                            måde: efter grundig desinfektion af huden med 2,5 % jodsprit og
                            eventuelt anlæggelse af lokalanæstesi indføres en kanyle, påmonteret
                            en sprøjte med 1 ml fysiologisk sterilt saltvand, i det inficerede
                            område. Saltvand injiceres, hvorefter der aspireres så meget som
                            muligt. Den aspirerede væske forsendes i sprøjten som beskrevet oven
                            for.


Prøvemængde                 Så meget materiale som muligt, glasset må dog kun fyldes halvt.


Opbevaring                  I køleskab (4 °C).


Forsendelse                 Så vidt muligt i kølekasse. Af hensyn til dyrkning af anaerobe
                            bakterier bør hurtig forsendelse tilstræbes.
                            Podninger i Stuart transportmedium kan forsendes med postvæsenet
                            efter emballering i forsendelseshylster.


Svarafgivelse               Negative prøver besvares efter 2 døgn.
                            Identifikation og resistensbestemmelse foretages på alle mikro-
                            organismer, der skønnes relevante.
                            Podning fra kroniske sår (ulcus cruris, decubitus) samt fra
                            fistelåbninger besvares summarisk. Fund af hæmolytiske strep-
                            tokokker og Staphylococcus aureus vil dog altid blive anført.


Tolkning                    Fundet af en eller flere potentielt patogene bakterier er ikke
                            ensbetydende med, at man har fundet det ætiologiske agens til den
                            pågældende infektion.
                            Angivelse af resistensforhold for en funden bakterie betyder ikke, at
                            antibiotikabehandling tilrådes.
                            Bidsår: Bid kan fremkalde alvorlige infektioner. Eksempler på
                            bakterier associeret med bestemte typer af bid:
                            Hunde- og kattebid: Pasteurella multocida og Capnocytophaga
                            canimorsus (tidligere CDC gruppe DF-2).
                              Heste- og svinebid:      Pasteurellacaeae og Actinobacillaceae.


                                   Rottebid:                Streptobacillus moniliformis.
                                  Slangebid:                       Mykobakterier.


                            Til "bidfloraen" hører også Weeksella zoohelcum og Staphylococcus
                            intermedius).
                            Ved dyrebid bør dyrearten angives præcist på rekvisitionssedlen, og
                            kirurgisk revision bør foretages på vid indikation, ligesom penicillin
                            anbefales som profylaxe.
                            Risikoen for viral infektion, herunder rabies, bør holdes i erindring.
                            Toxisk shock syndrom (TSS): Ved formodning om TSS kan isolater
                            af Staphylococcus aureus undersøges for toxinproduktion på Statens
                            Serum Institut.


Ørepodning
Undersøgelsens princip      Aerob dyrkning med påfølgende identifikation og resistens-
                            bestemmelse af potentielt patogene bakterier.
                            Anaerob dyrkning udføres kun efter særlig anmodning og motivering,
                            fx mastoiditis eller hjerneabsces.


Indikation                  Dyrkning fra mellemøre i tilslutning til paracentese.
                            Podning fra ydre øregang i tilfælde af otitis externa er sædvanligvis
                            ikke indiceret.


Prøvemateriale              Sekret fra mellemøre.


Tidspunkt for prøvetagning Så vidt muligt før antibiotisk behandling påbegyndes.


Utensilier                  Kulpodepind eller speciel metalvatpodepind (hvid) i Stuart
                            transportmedium.


Prøvetagning                Sekret eller pus opsamles på podepinden.
                         Hvis prøven tages fra mellemøret sammen med paracentese, bør man
                         undgå kontaminering af podepinden i den ydre øregang.


Opbevaring               I køleskab (4 °C).


Forsendelse              Om muligt i kølekasse. Ved forsendelse med postvæsenet anbringes
                         Stuart transportmedium i forsendelseshylster.


Svarafgivelse            Negative prøver besvares efter 2 døgn.


Tolkning                 Et eventuelt bakteriefund må bedømmes med forsigtighed på grund af
                         risiko for tilblanding af normalflora fra tilgrænsende områder.
                         De fleste tilfælde af akut otitis media skyldes pneumokokker,
                         Haemophilus influenzae, hæmolytiske streptokokker og Branhamella
                         catarrhalis.
                         Fund af Staphylococcus aureus vil ofte være udtryk for tilblanding af
                         flora fra ydre øregang.


Særlige bemærkninger     Såfremt ørepodning tages fra patienter med kronisk otitis media, bør
                         dette fremgå af oplysningerne på rekvisitionssedlen.
                         Ligeledes skal det også oplyses, når prøven er taget under operation.
                         I tilfælde af formodning om malign (nekrotiserende) extern otitis
                         skal diagnosen påføres. Infektionen af ørebrusken skyldes oftest
                         Pseudomonas aeruginosa og kan få et livstruende forløb.
                         Øreinfektioner efter badning: Pseudomonas aeruginosa, Aeromonas
                         hydrophila gruppen og Vibrio arter optræder som årsag til
                         øreinfektioner efter badning.


Øjenpodning
Undersøgelsens princip   Aerob dyrkning med påfølgende identifikation og resistens-
                         bestemmelse af potentielt patogene bakterier.
                         Alle øjenpodninger fra nyfødte undersøges specielt med henblik på
                         gonokokker. Direkte mikroskopi udføres akut, såfremt der
                         fremsendes sekret udstrøget på objektglas (specielt mærkede glas bør
                         anvendes og nedenstående prøvetagningsteknik følges).


Indikation               Formodning om bakteriel konjunktivitis (øjeninfektion).
                         Undersøgelsen er specielt væsentlig hos nyfødte (de første par
                         leveuger) med tegn på konjunktivitis for at udelukke gonoroisk
                         infektion.


Prøvemateriale           Sekret/pus fra conjunctiva.
Tidspunkt for prøvetagning Så vidt muligt før antibiotisk behandling påbegyndes.


Utensilier                  Podepind i Stuart transportmedium.
                            Eventuelt objektglas og forsendelsesetui.


Prøvetagning                Podning foretages principielt med steril hvid podepind. Hvis der er
                            så rigeligt med pus, at kontakt med slimhinden kan undgås, kan
                            kulpodepind benyttes (optimalt for Neisseria). Podepinden anbringes i
                            Stuart transportmedium.
                            Til direkte mikroskopi tages sekret/pus med steril hvid podepind,
                            og materialet afsættes ved rulning på midterste del af et affedtet
                            objektglas. På samme side af glasset anbringes helt tæt på den korte
                            kant en mærkat med patientens data. Efter lufttørring fremsendes
                            objektglasset i forsendelsesetui ledsaget af rekvisitionssedlen.


Opbevaring                  I køleskab (4 °C).


Forsendelse                 Om muligt i kølekasse. Ved forsendelse med postvæsenet anbringes
                            Stuart transportmedium i forsendelseshylster og objektglas i
                            forsendelsesetui.


Svarafgivelse               Hvis direkte mikroskopi eller dyrkning giver formodning om
                            gonoroisk infektion hos en nyfødt, meddeles dette straks telefonisk til
                            rekvirenten.
                            Ved fund af Staphylococcus aureus, Hæmophilus arter og
                            Streptococcus pneumoniae foretages identifikation og resi-
                            stensbestemmelse kun for indlagte patienter. Ved fund af andre
                            bakterier foretages identifikation og resistensbestemmelse efter skøn.
                            Resistensbestemmelser er kun vejledende for en systemisk
                            behandling af patienten!
                            Der foretages ikke rutinemæssigt resistensbestemmelse over for
                            kloramfenikol eller fucidin (se Bakteriologisk), da disse bestemmelser
                            ikke er repræsentative for de høje lokale koncentrationer af antibiotika
                            som opnås ved lokal applikation.
                            Negative prøver besvares efter 2 døgn.


Tolkning                    Et eventuelt bakteriefund må bedømmes med forsigtighed på grund af
                            forekomsten af normalflora og mulighed for tilblanding af bakterier
                            fra palpebra og hud. Selv fund af potentielt patogene bakterier må
                            vurderes nøje, fx hos mindre børn med konjunktivitis symptomer i
                            forbindelse med catarrhalia (det er specielt denne patientgruppe, som i
                            alt for stort omfang bliver behandlet med antibiotika).
                            Direkte mikroskopi er værdifuld, specielt til en hurtig, præ-liminær
                            diagnose af gonoroisk øjeninfektion. Gram-negative diplokokker, som
                            iagttages ved direkte mikroskopi, er dog langt hyppigere Branhamella
                             catarrhalis eller andre Neisseria species end Neisseria gonorrhoeae.
                             Se Sundhedsstyrelsens Vejledning for diagnose og behandling af
                             seksuelt overførbare sygdomme, 1992, side 28.


Særlige bemærkninger         Ved konjunktivitis, bør der, specielt hos nyfødte, undersøges for
                             Chlamydia trachomatis (se Chlamydia).
                             Øjenpodninger fra patienter med keratitis eller endophthalmitis:
                             diagnosen bør klart fremgå af rekvisitionssedlen, så relevante
                             bakteriologiske fund ikke går tabt ved rutinemæssig behandling af
                             prøven. Sædvanligvis "apatogene" bakterier eller svampe kan i disse
                             tilfælde være årsag til infektion, og må således ikke negligeres.


Podning for multiresistente bakterier
Undersøgelsens princip       Aerob dyrkning med påfølgende identifikation af multiresistente
                             bakterier, som ikke normalt forekommer hos patienter på danske
                             sygehuse.


Indikation                   Forebyggelse af spredning af multiresistente bakterier blandt patienter
                             og personale på sygehuse.
                             Patienter, som overflyttes fra sygehuse i lande uden for Skandinavien,
                             kan være blevet koloniseret med multiresistente bakterier under
                             indlæggelsen, særligt meticillinresistente Staphylococcus aureus
                             ("MRSA") og aminoglykosidresistente enterobakterier.
                             Man bør være opmærksom på, at patienter kan være bærere af MRSA
                             i en længere periode (3-6 måneder) efter udskrivelse fra udenlandsk
                             sygehus.


Prøvemateriale               Næsepodning
                             Podning fra svælg
                             Podning fra perineum
                             Podning fra sår og drænvæske


Tidspunkt for prøvetagning Snarest efter overflyttelsen.


Utensilier                   Kulpodepinde, Stuart transportmedium.


Prøvetagning                 Næsepodning tages fra den forreste del af næsen (vestibulum nasi).


Mærkning af                  Rekvisitionssedlen mærkes med udlandsophold (MRSA).
rekvisitionsseddel
Forsendelse                  Om muligt i kølekasse. Ved forsendelse med postvæsenet anbringes
                             Stuart transportmedium i forsendelseshylster.
Svarafgivelse            Negativt svar afgives tidligst 2 dage efter modtagelsen og meddeles
                         altid telefonisk! Da identifikation af MRSA kan byde på
                         vanskeligheder, kan svarafgivelsen lejlighedsvis forsinkes.


Tolkning                 Ved fund af multiresistente bakterier specielt MRSA er der indikation
                         for opretholdelse af isolationsregime.
                         Hos koloniserede patienter, som har været i behandling med fx
                         klorhexidinvask, kræves erfaringsmæssigt flere prøvetagninger med
                         negativt resultat efter behandlingsophør, før bærertilstanden kan
                         betragtes som elimineret.


Bemærkninger             Udbredelsen af MRSA er størst på sygehuse i Sydeuropa,
                         Mellemøsten, Det fjerne Østen (specielt Australien og Japan) og USA.
                         Risikoen for kolonisation er størst ved ophold på intensivafdeling,
                         længerevarende hospitalsophold (>2 uger) og i forbindelse med
                         antibiotisk behandling.
                         De andre skandinaviske lande har et niveau af MRSA nær det danske,
                         det vil sige < 1 %.
                         Personale: For personale, som har arbejdet på hospitaler uden for de
                         nordiske lande, anbefales "screening" ved podning fra næse, svælg
                         eller perineum, og fra eventuelle hudlæsioner (sår eller eksem).
                         Rekvisitionssedlerne mærkes udlandsophold(MRSA) og personale.
                         Vedr. isolation af overflyttede patienter og podning af personale:
                         Se Hygiejnebogen
                         eller kontakt KMA:
                             Hygiejnesygeplejerskerne
                             (selvvalg (8949) 5642, 5643 eller 5645)
                         eller lægerne
                             (selvvalg (8949) 5610).


Biopsimateriale
Undersøgelsens princip   Mikroskopi (om muligt) samt aerob og anaerob dyrkning med
                         påfølgende identifikation og resistensbestemmelse.


Prøvemateriale           Vævsprøver udtaget ved kirurgisk indgreb eller ved punktur af
                         organer, fx knogleaspirat, finnålspunktur, lever- eller nyrebiopsi
                         (petecchier, se "Særlige bemærkninger").
                         Ortopædkirurgiske infektioner: Ved formodning om infektion, hvor
                         det kan være vanskeligt at skelne kontamination fra infektion (fx
                         ledproteser), anbefales det at udtage biopsier 5 steder i det operative
                         felt; eventuelle fistelgange bør undgås. Prøverne sendes separat med
                         hver sin rekvisitionsseddel. Se også ledvæske og knogleaspirater.
                            Hjerteklapper & karproteser: Det anbefales, at mindre stykker med
                            aseptisk teknik deponeres direkte i separate beholdere med
                            dyrkningsmedium (3 udgør et sæt); beholderne rekvireres fra KMA
                            før operationen.


Tidspunkt for prøvetagning Så vidt muligt før antibiotisk behandling påbegyndes.


Utensilier                  Kirurgiske instrumenter eller sprøjte + kanyle beregnet til punktur.
                            Sterile spidsglas, objektglas og forsendelsesetui.
                            Sterile beholdere med dyrkningsmedium (3 i et sæt) kan rekvireres fra
                            KMA (angiv formål: karprotese eller hjerteklap).


Prøvetagning                Omhyggelig aseptisk teknik.
                            Petecchier: Se: Særlige bemærkninger.


Prøvemængde                 Vævsstykker bør højst være ca. hasselnødstore (1 cm x 1 cm).
                            Ved anbringelse af aspireret materiale i spidsglas, må dette højst
                            fyldes halvt (1-2 ml er tilstrækkeligt).


Opbevaring                  I køleskab (4 °C). Forsendelse bør dog som hovedregel ske
                            umiddelbart efter prøvetagningen.


Forsendelse                 Kølekasse bør anvendes, med mindre forsendelsen sker meget hurtigt.
                            Biopsierne holdes fugtige med 2-3 dråber fysiologisk sterilt
                            saltvand.
                            I tilfælde af særligt "kostbart" materiale eller i forbindelse med
                            specielle kliniske problemstillinger bør KMA kontaktes inden af-
                            sendelsen af prøven.


Svarafgivelse               Negativt svar afsendes sædvanligvis efter 4-5 døgn.
                            Telefonisk svar afgives efter skøn, samt hvis ønske herom er angivet
                            på rekvisitionssedlen.


Tolkning                    Ved god prøvetagningsteknik er falsk positive fund sjældne. Falsk
                            negative fund kan forekomme i tilfælde af utilsigtet desinfektion af
                            prøvematerialet (fx ved tilsætning af formalin) eller ved
                            uhensigtsmæssig transport.
                            Ortopædkirurgiske infektioner: Fundet af samme bakterieart i
                            mindst 3 af 5 udtagne prøver underbygger den infektionsmæssige
                            betydning selv af lavpatogene mikroorganismer som
                            koagulasenegative stafylokokker eller coryneforme stave.
                            Fistelflora kan ofte kontaminere en eller flere af prøverne.
Særlige bemærkninger        Ved meningitis eller septikæmi ledsaget af petecchier kan
                            mikroskopi og dyrkning fra et hudelement eventuelt give en hurtig
                            diagnose.
                            Teknik: Efter desinfektion med sprit, løftes petecchien med steril, fin
                            kanyle og afsnittes med skalpel. Der foretages aftryk på rent,
                            flamberet, men afkølet, objektglas, afmærket med tuschcirkel på
                            samme side af glasset! Hudbiopsien sendes i et par dråber sterilt vand
                            til dyrkning. Objektglasset anbringes i forsendelsesetui.
                            Intraokulære infektioner: Ved formodning om endopthalmitis kan
                            der være indikation for aspiration fra forreste kammer eller
                            glaslegemet. Da prøvemængden er meget beskeden, bør materialet
                            inokuleres direkte på egnede bakteriologiske medier, som kan
                            fremsendes efter forudgående aftale med KMA. I det omfang der er
                            materiale til rådighed, bør et objektglas præpareres med henblik på
                            direkte mikroskopi. En mærkat med patientens data anbringes på
                            samme side af glasset og helt tæt på den korte kant. Objektglasset
                            sendes i forsendelsesetui, og rekvisitionssedlen afkrydses for direkte
                            mikroskopi.
                            Følgende specialvejledninger kan rekvireres fra Bakteriologisk
                            afsnit:
                            1. Finnålsaspirats fra spondylitispatienter.
                            2. Borebiopsi fra knoglevæv.


Sektionsmateriale
Undersøgelsens princip      Aerob og anaerob dyrkning med påfølgende identifikation af bakterier
                            og svampe.


Indikation                      1. Specielle tilfælde, hvor det anses for vigtigt, at afklare, om
                                   infektion har bidraget til patientens død.
                                2. Ved dødsfald i forbindelse med infektion (fx endocarditis eller
                                   meningitis), hvor det kan være af betydning at belyse, om den
                                   givne antibiotiske behandling har ført til sterilisering af
                                   infektionsfokus eller om der eventuelt er opstået en sekundær
                                   infektion.


Prøvemateriale              Hjerteblod og væv fra fx lever, milt, nyrer, lunger, meninges samt
                            eventuelt suspekte områder.


Tidspunkt for prøvetagning Hurtigst muligt efter dødsfaldet.


Utensilier                  Sterile spidsglas.
                            Sterile engangssprøjter (eventuelt sterile lukkehætter).
                            Kulpodepinde & Stuart transportmedium.
                            Tætte, sterile beholdere til vævsstykker.
Prøvetagning             Prøverne skal udtages sterilt.
                         På grund af det uafklarede spørgsmål om eventuelt flytning af
                         mikroorganismer ved exviscerationen gås frem på følgende måde:
                         Kropshulen åbnes aseptisk (jodning, sterile handsker og
                         instrumenter). Inden udtagning af organblokken aspireres fra
                         eventuelt pericardieexudat; gennem et opklippet "vindue" i pericardiet
                         jodes epicardiet, og hjerteblod aspireres fra højre ventrikel eller højre
                         atrium.
                         Fra lever og milt samt lunger og nyrer dyrkes efter jodning af
                         overfladen ved incision med éngangsknive og podning med steril
                         podepind fra vævets indre.
                         Hvis der i øvrigt findes exudater eller fokale infektionsprocesser,
                         foretages aspiration eller udtages vævsprøver, og hvor dette ikke er
                         muligt anvendes podepind.
                         Vævsprøver anbringes hver for sig i steril, tætsluttende beholder.
                         Aspireret materiale anbringes i sterilt spidsglas eller forsendes i
                         engangssprøjte med steril lukkehætte.
                         Hvis podepinde anvendes, anbringes de i hvert sit Stuart
                         transportmedium.


Prøvemængde              Spidsglas må højst fyldes halvt (1-2 ml er tilstrækkeligt).
                         Hjerteblod dog 5 ml.
                         Vævsprøver af maximalt hasselnødstørrelse.


Opbevaring               Sprøjter med lukkehætte, beholdere med vævsprøver, spidsglas og
                         Stuart medier i køleskab (4 °C).


Forsendelse              Forsendelse bør ske i kølekasse.


Svarafgivelse            Isolerede bakterier og svampe identificeres. Negative svar udsendes
                         efter ca. 2 døgn, bortset fra hjerteblod (7 døgn).
                         Resistensbestemmelse udføres kun efter anmodning.


Tolkning                 Trods omhyggelig udtagning af materiale ses ofte kontamination af
                         prøverne. Selv få timer efter dødsfald isoleres eksempelvis
                         Clostridium sordelli, C. septicum eller C. perfringens hyppigt fra blod
                         eller væv.


I.V. kateter
Undersøgelsens princip   Semikvantitativ, aerob dyrkning efter rulning af kateteret på agarplade
                         med påfølgende identifikation og resistensbestemmelse.


Indikation               Dyrkning af I.V. kateterspids foretages ved phlebitis i den
                         pågældende vene og ved formodning om bakteriæmi.
Prøvemateriale           5-7 cm af den intravenøse venekateterspids.


Utensilier               Sterilt spidsglas.


Prøvetagning             Kateterets indstikssted desinficeres omhyggeligt med 70 % alkohol.
                         Efter tørring fjernes kateteret aseptisk, og 5-7 cm af spidsen afklippes.
                         Afklipningsstedet skal ligge mindst ½ cm inden for hudniveau.
                         Kateteret anbringes i sterilt spidsglas, som forsynes med et par dråber
                         sterilt vand for at undgå udtørring.


Opbevaring               Køleskab (4 °C).


Forsendelse              Hurtig forsendelse tilrådes. Om muligt anvendes kølekasse.


Svarafgivelse            Ved vækst af bakterier angives det absolutte antal på pladen (se neden
                         for). Negative prøver besvares efter 2 døgn.


Tolkning                 Fremkommer der mere end 15 kolonier ved dyrkning, tyder dette på
                         en reel kolonisering af kateterspidsen, hvilket gør kateteret til et
                         muligt fokus for en eventuel bakteriæmi.
                         Hvis der fremkommer få kolonier (< 5-10) ved dyrkning, er det
                         overvejende sandsynligt, at væksten skyldes forurening af kateteret
                         under fjernelsen af dette.


Særlige bemærkninger     Der vil ofte være indikation for samtidig bloddyrkning fra
                         perifervene. Rutinemæssig dyrkning af I.V. katetre ved seponering er
                         ikke hensigtsmæssigt, da katetre som en funktion af tid koloniseres
                         med hudbakterier, som for de fleste patienter er uden klinisk
                         betydning.


Koncentrationsmåling af antibiotika
Undersøgelsens princip   Immunoenzymatisk eller biologisk (kun efter aftale) koncentra-
                         tionsmåling af antibiotika i blod eller vævsvæsker.
                         Der kan rutinemæssigt foretages koncentrationsbestemmelse af
                         gentamicin, tobramycin og vancomycin.
                         Bestemmelse af andre antibiotika kan kun foretages efter forudgående
                         aftale, eventuelt i samarbejde med Statens Serum Institut.
                         Koncentrationsbestemmelse af antibiotika foretages søndag og
                         helligdage kun efter aftale med Klinisk Mikrobiologisk Afdelings
                         læger.
Indikation                  Der er i reglen ikke indikation for at måle serumkoncentrationer for
                            patienter, som opfylder alle af følgende kriterier:

                                o kortvarig behandling med et aminoglykosid (< 5 dage),

                                o aminoglykosidet doseres én gang daglig,
                                o normal nyrefunktion bedømt ud fra kreatinin clearance (fx
                                  beregnet ud fra nomogram),
                                o nyrefunktionen stabil.

                            For patienter, som opfylder ét af følgende kriterier:
                                o længerevarende behandling (> 5 dage) med et aminoglykosid
                                  eller vancomycin,
                                o nedsat eller ustabil nyrefunktion,
                            er der altid indikation for, at måle serumkoncentrationer.
                            Koncentrationsbestemmelsen foretages som hovedregel første gang
                            efter 3. dosis.
                            Hos patienter i længerevarende behandling er koncentra-
                            tionsbestemmelse ("dal"-værdien) indiceret 1-2 gange ugentligt.


Parametre                   Følgende parametre kan bestemmes:
                            Akkumulation (toxisk koncentration): Påvises bedst ved be-
                            stemmelse af "dal"-værdi ("0"- eller "trough"-værdi).
                            Spidsværdi: Spids- eller "peak"-værdien kan i særlige tilfælde være
                            indiceret for at kontrollere, om doseringen er tilstrækkelig. For
                            aminoglykosider doseret én gang daglig vil spidsværdien altid være
                            høj, og oftest uden for måleområdet; måling er derfor i reglen ikke
                            indiceret.
                            Halveringstid: Ved nedsat nyrefunktion kan bestemmelse af
                            halveringstiden være indiceret med henblik på videre dosering.


Prøvemateriale              Blod (serum). Efter særlig aftale kan måling udføres i spinalvæske,
                            urin eller anden vævsvæske.


Tidspunkt for prøvetagning Dalværdi opnås ved prøvetagning umiddelbart før næste indgift af
                           det pågældende antibiotikum. Målingen kan derfor først anvendes til
                           eventuelt at regulere næstfølgende dosering!
                           Spidsværdi opnås ved prøvetagning 30 minutter efter intravenøs
                           indgift, 1 time efter intramuskulær indgift og 2 timer efter peroral
                           indgift af det pågældende antibiotikum.
                           Halveringstiden bestemmes ud fra 2 prøver taget 1 og 4 timer efter
                           opnået spidsværdi.


Utensilier                  Tørglas.
Prøvetagning    Venepunktur. Husk at angive tidspunktet for prøvetagning og sidste
                dosis af det pågældende antibiotikum.
                Husk også at angive, hvis patienten får andre antibiotika, og i givet
                fald hvilke. Der advares imod at anvende blod, trukket på intravenøse
                kateter, som anvendes til indgift af det pågældende antibiotikum; på
                trods af mange timers interval samt gennemskylning er der risiko for
                falsk forhøjede værdier.


Prøvemængde     4 ml blod eller 2 ml serum.


Opbevaring      I køleskab (4 °C).


Forsendelse     Om muligt i kølekasse. Ved længerevarende transport bør serum
                skilles fra og fremsendes separat.


Svarafgivelse   Koncentrationsbestemmelserne udføres én gang dagligt på hverdage,
                og for prøver modtaget inden kl. 13 (lørdag dog kl. 12!), kan svaret
                foreligge telefonisk i afdelingen kl. 15.
                Anvendes en biologisk metode, kan svar dog tidligst afgives ét døgn
                efter modtagelsen og forudsætter advisering dagen før modtagelse.
                Skriftligt svar afgives også samme dag som telefonisk eller
                elektronisk svar.


Tolkning        Resultatet af undersøgelsen vil være vejledende for den fortsatte
                dosering af det pågældende antibiotikum. Målet er på samme tid at
                opnå terapeutisk effekt og undgå toksiske koncentrationer.
                Aminoglykosiders effekt synes at bero på en høj spidsværdi og deres
                toksicitet på en høj dalværdi. Ved én-dosis i døgnet af
                aminoglykosider opnås en høj spidsværdi og en lav dalværdi.
                Vancomycins effekt synes at forudsætte en mere jævn fordeling af
                stoffet over tid (dalværdi over 10 mg/L), og for at undgå den toksiske
                effekt at dalværdien holdes under 20mg/L.
                Følgende skema kan anvendes ved bedømmelsen:

                                                Dalværdi mg/L

                                                Én-dosis              Fler-dosis

                Gentamicin og tobramycin        <1                    <2

                Vancomycin                       -                    <10-20*

                *Gælder hvor vancomycin indgives alene. Ved kombination med
                aminoglykosid bør der udvises større forsigtighed.


                Ved dosering én gang daglig kan næstfølgende dosis vejledende
                         fastlægges ud fra den målte serumkoncentration (dalværdi):

                         Dalværdi          Ny dosering
                         (mg/L)

                         0,6               Dosis = initialdosis

                         0,6 - 1,0         Dosis = 50 % af initialdosis

                         > 1,0             Pause; ved fortsat behandlingsindikation konferér
                                           eventuelt med klinisk mikrobiolog.



Initial dosis            Den initiale dosis ("Loading dose") er kun bestemt af patientens vægt:

                                                         Gentamicin

                                                         4-5 mg/kg



                         Virologisk-immunologisk afsnit
Aflevering af prøver     Bygning X, stuen.


Beliggenhed              Bygning X, 1. sal. Kortskitse: Se Kort.


Telefonisk henvendelse   Forespørgsel om virologiske prøver
                         og bestilling af transportmedier (8949) 5610
                         (kl.8.00-15.00)


Analyseprogram           For hver enkelt analyse må man gøre sig klart, om det drejer sig om
                         påvisning af hele virus (virusdyrkning) polymerase chain reaktion
                         (PCR) til påvisning af virus-nucleinsyrer, viruspåvisning med
                         immunologisk teknik (virusantigen) eller om tilstedeværelse og
                         eventuelt niveau af antistof, som er dannet specifikt mod virus.
                         Laboratoriet undersøger også for antistoffer mod andre
                         mikroorganismer.


Dyrkning af virus &      Laboratoriet igangsætter dyrkning af virus alle hverdage og udfører
antigenpåvisning         rutinemæssigt undersøgelser for virus-antigen mindst tre gange
                         ugentligt. Serologiske undersøgelser udføres 2 gange ugentligt, PCR
                         analyser mindst 2 gange ugentligt. Prøver kan eventuelt fremskyndes
                         efter telefonisk henvendelse.
                         Hasteprøver til undersøgelse for respiratorisk syncytial virus (RSV)
                         modtages uden for normal arbejdstid, i sæsonen, af den faste
                         bioanalytikervagt (se KMA).
Transportmedium              Til indsendelse af prøver til dyrkning, antigenbestemmelse eller PCR
                             anvendes én type transportmedium, som kan rekvireres fra virologisk
                             afsnit (Tlf.: 8949 5610).
                             Transportmediet skal opbevares på frost.
                             Patientprøver må ikke fryses inden forsendelse til laboratoriet med
                             mindre andet er aftalt!


Påvisning af antistof        For mange antistofundersøgelser gælder, at der bør indsendes såvel en
                             akut prøve som en prøve taget 2-3 uger eller senere efter
                             sygdomsudbrud.


Udfyldelse af blå            De kliniske oplysninger har særlig stor betydning for tolkning af
rekvisitionsseddel           virologiske/immunologiske fund. Det gælder forhold som syg-
                             dommens varighed, udlandsophold (særlig eksposition), graviditet og
                             immunsuppression.


Svarafgivelse og tolkning af Svar afgives skriftligt samme dag, undersøgelsen er afsluttet.
svar
                             Telefonisk svar afgives på anmodning.
                             Vedrørende tolkning af laboratoriefund kan værdifuld information
                             hentes i Statens Serum Instituts Håndbog og Niels Højby: Basal og
                             Klinisk Mikrobiologi, København.


Telefonisk rådgivning        Afdelingen yder gerne rådgivning vedrørende virussygdommes
                             diagnostik, terapi, undersøgelsesprogrammer og tolkning af konkrete
                             svar.


Herpes simplex virus (HSV)
Undersøgelsens princip       Påvisning af Herpes simplex virus (HSV) ved dyrkning i cellekultur
                             eller ved PCR.


Indikation                   Formodning om infektion lokalt af hud/slimhinder, generaliseret
                             infektion (især nyfødte) eller infektion i centralnervesystemet.
                             Undersøgelse for Herpes simplex encephalitis eller meningitis finder
                             sted ved PCR på spinalvæske. Prøven undersøges samtidig for
                             Varicella-Zoster virus og for enterovirus ("encephalitispanel").


Tidspunkt for prøvetagning Tidligst muligt i sygdomsforløbet. Ved hud og/eller slimhinde-
                           læsioner svarende til det vesikulære eller væskende stadium. Senere i
                           forløbet kan det være vanskeligt at påvise HSV.


Prøvemateriale                   1. Vesikelvæske eller celleskrab fra læsioner på hud og slim-
                                    hinder (brug HVID VATPODEPIND og TRANSPORT-
                                    MEDIUM; ikke kulpodepind og aldrig Stuart transport-
                                  medium!).
                              2. Mundskyl: Efter at have gurglet med fysiologisk sterilt
                                 saltvand spytter patienten det ud i virustransportmedium
                                 beregnet til forsendelse (alternativt: podning med hvid
                                 podepind, der indsendes virustransportmedium).
                              3. Væv (biopsi- og sektionsmateriale).
                              4. Cerebrospinalvæske: minimum 0,5 ml.


Utensilier                 Virustransportmedium, vatpind.


Procedure                  Hud og slimhinder: Vesikelvæske aspireres med kanyle, celleskrab
                           med egnet skalpel eller hvid vatpodepind; materialet overføres til
                           transportmedium og podepind efterlades i glasset.
                           Vævsstykke kan fugtes med få dråber fysiologisk sterilt saltvand eller
                           transportmedium.
                           Cerebrospinalvæske forsendes uden tilsætning.


Opbevaring                 I køleskab (+4oC). Prøvematerialet må ikke fryses.


Forsendelse                I beskyttelsesrør. Forsendes hurtigst muligt per post eller intern
                           transport.


Besvarelse                       Dyrkning:                   HSV isoleret / ikke påvist.
                            PCR undersøgelsen:             Positiv/negativ for HSV DNA


                           Ved fund af HSV udføres typebestemmelse for HSV-1 og HSV-2.


Tolkning                   Jævnfør Statens Serum Instituts Håndbog.
                           For encephalitis: Se undersøgelse for viral encephalitis.


Undersøgelsens princip     Påvisning af serum antistoffer mod HSV af IgG klasse i ELISA.
                           Det er ikke muligt at bestemme typespecifikke antistoffer.


Indikation                 Formodning om HSV infektion.


Tidspunkt for prøvetagning Akut prøve.


Prøvemateriale             3 ml. blod uden tilsætning eller 0,5 ml serum.


Utensilier                 Tørglas.
Opbevaring                  I køleskab (4oC).


Forsendelse                 I beskyttelsesrør med post eller intern transport.


Besvarelse                  Svar angives som positiv / negativ.


Bemærkninger                Ved udredning af encephalitis kan det være relevant at undersøge for
                            intrathekal dannelse af HSV antistoffer. Se Statens Serum Instituts
                            Håndbog.


Varicella-zoster virus (VZV)
Undersøgelsens Princip      Påvisning af Varicella-Zoster virus (VZV) ved PCR.


Indikation                  Formodning om VZV infektion lokalt af hud eller slimhinder.
                            Eventuelt generaliseret infektion, infektion i luftveje eller infektion af
                            centralnervesystemet (0-10 dage efter symptom-debut).


Tidspunkt for prøvetagning Tidligst muligt i sygdomsforløbet. Ved hud og/eller slimhinde-
                           læsioner svarende til det vesikulære eller væskende stadium.


Prøvemateriale                  1. Vesikelvæske eller celleskrab fra læsioner på hud og slim-
                                   hinder (brug HVID VATPODEPIND og TRANSPORT-
                                   MEDIUM; ikke kulpodepind og aldrig Stuart transport-
                                   medium!).
                                2. Spinalvæske.
                                3. Luftvejssekret.
                                4. Væv (biopsi- og sektionsmateriale).


Utensilier                  Virustransportmedium, VATPODEPIND.


Procedure                   Hud og slimhinder: Vesikelvæske aspireres med kanyle, celleskrab
                            med egnet skalpel, eventuelt anvendes hvid vatpodepind; materialet
                            overføres til transportmedium og podepind efterlades i mediet.
                            Cerebrospinalvæske kan forsendes uden tilsætning.
                            Luftvejssekret forsendes uden tilsætning.
                            Vævsstykke kan fugtes med fysiologisk sterilt saltvand eller
                            transportmedium.


Opbevaring                  I køleskab (+4oC).
Forsendelse                 I beskyttelsesrør.


Besvarelse                  Negativ/positiv for VZV DNA.


Undersøgelsens Princip      Påvisning af antistoffer i serum mod VZV af IgG klasse i ELISA.


Indikation                  Status for VZV immunitet, formodning om aktuel VZV infektion.


Tidspunkt for Prøvetagning Akut prøve, eventuelt fulgt af ny prøve 2-3 uger senere.


Prøvemateriale              3 ml blod uden tilsætning eller 0,5 ml serum.


Utensilier                  Tørglas.


Opbevaring                  I køleskab (4oC).


Forsendelse                 I beskyttelseshylster med post eller intern transport.


Besvarelse                  Svar angives som:
                            Negativ
                            Tvivlsom positiv
                            Positiv


Dyrkning og antigenpåvisning; Cytomegalovirus
Undersøgelsens Princip          1. Påvisning af Cytomegalovirus (CMV) ved dyrkning i celle-
                                   kultur.
                                2. Påvisning af viræmi (CMV-antigen i polymorfkærnede leu-
                                   kocytter i perifert blod).


Indikation                  Formodning om generaliseret infektion i særlig grad hos immun-
                            kompromitterede patienter og nyfødte.


Diagnostisk vejledning      DIAGNOSTISK VEJLEDNING

                            Kongenit CMV                 Dyrkning fra urin.

                            ”CMV-Mononucleose”           Serum til antistofundersøgelse.

                            Basisundersøgelse af         Serum til antistofundersøgelse.
                            allotransplanterede
                             Rutineundersøgelse af        EDTA-blod til CMV antigen
                             allotransplanterede          undersøgelse.

                             Febrilia hos allotransplan- EDTA-blod til CMV antigen
                             terede og andre             undersøgelse. Serum til antistof-
                             immunsupprimerede           undersøgelse.
                                                         Dyrkning fra urin, svælg og ved
                                                         lungesymptomer: BAL.

                             Slimhindeinfektion           Histologi af biopsi.

                             Retinainfektion              Opthalmoskopi.

Tidspunkt for Prøvetagning      1. CMV dyrkning: ikke kritisk.
                                2. CMV antigen: EDTA-blod tages om morgenen og skal være
                                   laboratoriet i hænde inden kl. 10.00. Dog skal hasteprøver,
                                   hvor der ønskes svar samme dag, aftales telefonisk og være
                                   laboratoriet i hænde inden kl. 9.00.


Prøvemateriale                  1. CMV dyrkning: Mundskyl med fysiologisk sterilt saltvand,
                                   urin, bronchioalveolær skyllevæske (BAL).
                                2. CMV antigen: 5 ml EDTA-blod.


Utensilier                   10 ml spidsglas (til dyrkning).
                              5 ml EDTA-glas (antigen).


Opbevaring & forsendelse        1. CMV dyrkning: I køleskab (+4oC) - må ikke fryses. For-
                                   sendes i beskyttelseshylster med post eller intern transport.
                                2. CMV antigen: Tåler ikke opbevaring (se tidspunkt for
                                   prøvetagning og fremsendelse ovenfor).


Besvarelse                   CMV dyrkning besvares med: CMV isoleret / ikke påvist.
                             Mængden af virus angives omtrentlig (potens af 10) per ml.
                             Positivt værdi-interval:
                                            Urin                         10 - 107 virus/ml
                                      Mundskyl, BAL                      10 - 105 virus/ml


                             CMV antigen i polymorfkærnede leukocytter i perifert blod besvares
                             med:
                             antal CMV positive leukocytter/ 2 x 105 granulocytter.
                             Positiv værdi-interval:
                             1 - 104 CMV positive leukocytter/ 2 x 105 granulocytter.
Bemærkninger                Påvisning af CMV antigen i polymorfkærnede leukocytter i perifert
                            blod er et udtryk for viræmi. Undersøgelsen har vist sig at være af
                            særlig værdi til diagnosticering af CMV infektion hos
                            transplantationspatienter i immunosuppressiv behandling. Tilstanden
                            kan medføre spredning til organer (dissemineret CMV infektion).
                            Ved fund af CMV positive granulocytter bør behandling med
                            ganciclovir eller andet middel mod CMV overvejes.
                            Påvisning af CMV-holdige granulocytter hos AIDS patienter har i
                            reglen ikke behandlingsmæssig konsekvens. Det anses dog for at
                            være et dårligt prognostisk tegn.
                            Undersøgelsen kan udføres hurtigere end dyrkning af CMV fra blod.
                            Da CMV kan udskilles i måneder til år, bør påvisning af CMV-
                            udskillelse vurderes med forsigtighed.
                            Ca. 20 % af raske børn i vuggestuealderen kan være CMV-inficeret
                            og udskille virus i urinen i mængde på op til 104 virus/ml. Højere
                            titre hos spædbørn tyder på en medfødt infektion.


Cytomegalovirus (CMV)
Undersøgelsens princip      Påvisning af serum antistoffer mod Cytomegalovirus.
                            Af 1. IgM klasse         (µ-capture ELISA).
                                 2. IgG klasse       (Indirekte ELISA)


Indikation                      1. Status for CMV immunitet.
                                2. Formodning om aktuel CMV infektion. CMV kan bl.a. være
                                   årsag til et mononukleoselignende sygdomsbillede hos yngre
                                   voksne (Mono-spottest negativ) og til hepatitis.


Tidspunkt for Prøvetagning Akut prøve og prøve efter 2-3 uger, eventuelt senere.


Prøvemateriale              3 ml blod uden tilsætning eller 0,5 ml serum.


Utensilier                  Tørglas.


Opbevaring                  I køleskab (4oC).


Forsendelse                 I beskyttelseshylster.


Besvarelse                  Positive svar afgives som titer respektivt arbitrære enheder (ELISA):
                            Immung IgG*                         IgM
                            lobulin
                            klasse

                            Metodik ELISA                       ELISA

                            Enheder Arbitrære enheder           Arbitrære enheder

                            Positive 232 -> 100.000             0,10 – 0,20 Tvivlsom positiv
                            værdier
                                                                >0,20        Positiv

                            *Ved parallelundersøgelse af parrede sera er 3 fold ændring i IgG titer
                            udtryk for signifikant ændring i IgG antistofniveau.


Tolkning                    Fund af IgM antistoffer mod CMV kan tyde på aktuel infektion; IgM
                            antistoffer kan dog være til stede i måneder/år hos immun-
                            kompromitterede, og CMV-inficerede spædbørn kan mangle dem.
                            IgG antistoffer persisterer efter infektion. Signifikant stigning i IgG
                            niveau er udtryk for aktuel primær, reaktiveret eller reinfektion.


Bemærkninger                Jævnfør Statens Serum Instituts Håndbog.


Epstein-Barr virus (EBV)
Undersøgelsens Princip      Påvisning af antistoffer mod Epstein-Barr virus (EBV) antigener med
                            ELISA teknik. De antigener, som anvendes til antistofpåvisning,
                            kommer til udtryk på forskellige tidspunkter i virus' formeringscyclus
                            (replikation): "Early Antigen" (EA) og "Epstein-Barr Nuclear
                            Antigen" (EBNA).


Indikation                  Formodning om EBV infektion (infektiøs mononukleose).


Tidspunkt for Prøvetagning Straks ved klinisk formodning, da specifikke EBV antistoffer dannes
                           tidligt i sygdomsforløbet.


Prøvemateriale              3 ml blod uden tilsætning eller 0,5 ml serum.


Utensilier                  Tørglas.


Opbevaring                  I køleskab (4 °C).


Forsendelse                 I beskyttelseshylster med post eller intern transport.


Besvarelse                  Der undersøges først for EBNA-IgG antistoffer. Er prøven positiv, er
                            der tale om tidligere (> 3 mdr.) EBV infektion, og der udføres ikke
                            yderligere undersøgelser undtagen efter særlig aftale. Er prøven
                            negativ for EBNA antistoffer undersøges tillige for IgM og IgG
                            antistoffer mod EBV-EA (early antigen).


Tolkning                    Resultat af undersøgelse besvares som en overordnet tolkning fra
                            følgende skema:

                            Typiske fund ved forskellige kliniske tilstande:

                                                Antistofprofil

                                                EA/IgM         EA/IgG       EBNA/IgG

                            1Primær infektion       Positiv      Negativ       Negativ
                            .Tidlig fase

                            2Primær infektion       Positiv/     Positiv       Negativ/Svag positiv
                            .Sen fase               Negativ
                                                                               (OD < 0,5)

                            3Reaktivering           Positiv      Negativ/      Positiv
                            .                                    Positiv
                                                                               (OD > 0,5)

                            4Tidligere infektion    Negativ      Negativ/      Positiv
                            .                                    Positiv

                            5Ingen tidligere        Negativ      Negativ       Negativ
                            .infektion



                            6Ikke tolkelig         Ny prøve tilrådes
                            .



Bemærkninger                Serologiske forhold som beskrevet under reaktivering forekommer
                            ikke sjældent hos raske bloddonorer. Man må derfor ikke tillægge et
                            sådant fund for megen vægt i en klinisk situation.


Respirationsvejsvirus
Undersøgelsens Princip      Påvisning af Respirationsvejsvirus: Influenzavirus type A og B,
                            respiratorisk syncytial virus (RSV), Adenovirus, parainfluenza virus
                            1, 2 og 3 med direkte immunfluorescens.


Indikation                  Kliniske tegn på luftvejsinfektion.
                            Metoden benyttes kun til undersøgelse af børn under 10 år.


Indikation for              Ved indlæggelse af børn, særligt £ 2 år, kan det have behand-
hasteundersøgelse for RSV   lingsmæssige konsekvenser at stille diagnosen RSV-infektion akut.
                             Hasteprøver: Undersøgelse for RSV kan udføres som vagtanalyse
                             uden for normal arbejdstid af den faste bioanalytikervagt (se KMA)
                             i virussæsonen. Metoden benyttes kun til undersøgelse af børn under
                             5 år.
                             Der anvendes en hurtigmetode, hvis resultat meddeles rekvirenten
                             telefonisk og skriftligt.


Tidspunkt for Prøvetagning Tidligst muligt i forløbet.


Prøvemateriale               Sekret fra næsesvælgrum ("nasalsekret").
                             Ekspektorat kan ikke anvendes.


Utensilier                   Prøvetagningssæt til opsugning af luftvejssekret, fysiologisk sterilt
                             saltvand (virustransport medium kan anvendes).


Procedure                    Sekret fra næsesvælgrum: Først føres kateteret gennem det ene,
                             derefter det andet næsebor til nasopharynx, hvorfra der aspireres.
                             Derefter suges ½ ml fysiologisk sterilt saltvand gennem kateteret, så
                             alt materiale opsamles i glasset.


Opbevaring                   I køleskab (4oC).


Forsendelse                  Transporteres direkte til laboratoriet.


Besvarelse                   Besvares som påvist / ikke påvist for de enkelte undersøgelser.
                             Hasteprøver besvares telefonisk efter få timer.


Tolkning                     Jævnfør Statens Serum Instituts Håndbog.


Bemærkninger                 Til hasteprøver for RSV anvendes en hurtigmetode, som er knap så
                             følsom (sensitiv) og specifik som den metode, der benyttes i dagtiden.
                             RSV-epidemier: Sæsonen for RSV falder mellem november og april,
                             noget varierende fra år til år. På basis af positive prøver kan
                             virologisk afsnit advisere de pædiatriske afdelinger om en
                             igangværende epidemi. Der er kun få sporadiske fund af RSV uden
                             for sæsonen.
                             Under RSV-epidemier kan diagnosen også være aktuel uden for den
                             tidlige barnealder, og nosokomiel infektion forekommer, blandt andet
                             hos intuberede patienter.
                             Infektioner hos voksne kan være vanskelige at diagnosticere ved den
                             beskrevne metode, hvorfor afdelingen efter prøvens beskaffenhed vil
                             undersøge prøven med PCR i stedet for at bruge antigen
                             detektionsmetoden.
                             Da svar på en PCR analyse først foreligger efter mindst 1 døgn, er
                             den uegnet til diagnostik af respirationsvejsinfektioner hos børn, hvor
                             man med immunologisk teknik kan afgive svar i løbet af få timer.


Respirationsvejsvirus påvist ved PCR
Undersøgelsens Princip       Påvisning af respirationsvejsvirus: Influenzavirus type A og B,
                             respiratorisk syncytial virus (RSV), Adenovirus og med RT-PCR eller
                             PCR.


Indikation                   Kliniske tegn på atypisk pneumoni særligt hos voksne og
                             immunkompromitterede.


Tidspunkt for Prøvetagning Tidligst muligt i forløbet.
Prøvemateriale               Sekret fra næsesvælg og ekspektorat.
                             Bronchialskyllevæske.


Utensilier                   Prøvetagningssæt til opsugning af luftvejssekret:
                             Nasalkateter & sug.
                             Fysiologisk sterilt saltvand, 2 ml.
                             (virustransportmedium kan anvendes).


Opbevaring                   I køleskab (4oC).


Forsendelse                  Transporteres direkte til laboratoriet.


Besvarelse                   Besvares som positiv / negativ.


Kommentarer                  Analyserne er først og fremmest indiceret ved atypisk pneumoni hos
                             voksne og særligt hos immunkompromitterede patienter, idet
                             respirationsvejsvirus kun vanskeligt kan påvises i disse patientgrupper
                             ved konventionelle teknikker.


Influenza A virus påvist ved PCR
Undersøgelsens Princip       Påvisning af influenza A virus RNA med RT-PCR.
Indikation                   Kliniske tegn på influenza hos alvorligt syge eller personer tilhørende
                             risikogruppen.


Tidspunkt for Prøvetagning Tidligst muligt i forløbet.
Prøvemateriale               Svælgpodning eller næsepodning fra den bagerste del af
                            næsehulen foretages med dacron- eller hvid vatpodepind.
                            Podepinden indsendes i spidsglas med ca. 1-2 ml. sterilt saltvand
                            eller virustransportmedium.
                            Prøver til influenzadiagnostik kan også tages som et nasopharynx sug.
                            Sugekateret placeres i nasopharynx og sekretet opsamles i spidsglas.
                            Sugekateret kan med fordel gennemskylles med saltvand eller
                            virustransportmedium. Dette er særlig velegnet til børn.


Utensilier                  Hvid podepind, spidsglas og fysiologisk sterilt saltvand, 2 ml.
                            (virustransportmedium kan anvendes).

                            Evt. nasalkateter & sug.


Opbevaring                  I køleskab (4oC).

Rekvisition                 Praktiserende læger rekvirerer via Webreq: Skejby sygehus KMA-
                            AUH; undersøgelse: "influenza A virus RNA"

                            Hospitalsafdelinger og vagtlæger rekvirerer på rekvisitionssedler fra
                            KMA Skejby (blå, virologisk - immunologisk afsnit) der forefindes
                            på afdelingerne og i lægevagtbilerne, og i de fastbemandede
                            lægevagts konsultationer for de læger, der kører selv.

                            Husk at anføre rekvirent og telefonnummer for telefonisk svar.

Forsendelse                 Transporteres i vanlig prøvekuvert med almindelig prøvetransport, så
                            den næste morgen er fremme ved:

                            Klinisk Mikrobiologisk Afdeling
                            Århus Universitetshospital, Skejby
                            Brendstrupgårdsvej 100
                            8200 Århus N.

                            Kuverten mærkes "Haste".

Besvarelse                  Besvares som POSITIV / NEGATIV for Influenza A.
                            Positive prøver types til "almindelig vinterinfluenza" eller "influenza
                            A(H1N1)v af svineoprindelse".

Kommentarer                 Se løbende opdateringer af de regionale eller nationale vejledninger
                            på praksis.dk, SSI.dk, & SST.dk


Us. for mycoplasma pneumoniae ved PCR
Undersøgelsens Indikation   Påvisning af Mycoplasma pneumoniae ved PCR teknik.
                            Mistanke om mycoplasma.
Tidspunkt for Prøvetagning Tidligst muligt i forløbet.
Prøvemateriale               Sekret fra næsesvælgrum, larynx, trachea og bronchier.
                             Bornchialskyllevæske, ekspektorat.
                             Eventuel svælgpodning med hvid podepind, indsendes i 2 ml
                             fysiologisk sterilt saltvand.


Utensilier                   10 ml spidsglas.


Opbevaring                   I køleskab (4oC).


Forsendelse                  Transporteres direkte til laboratoriet.


Besvarelse                   Besvares som positiv / negativ.


Viral menigitis/encephalitis
Viral meningitis             Viral meningitis skyldes først og fremmest enterovirus. Ofte findes
                             kun lettere kliniske symptomer og < 500 celler/µl i spinalvæsken.
                             Ved recidiverende aseptisk meningitis må Herpes simplex virus type 2
                             mistænkes som ætiologisk agens.


Viral encephalitis           Viral encephalitis kan blandt andet forårsages af Herpes simplex
                             virus, Varicella-Zoster virus og af enterovirus. Det kan klinisk være
                             vanskeligt eller umuligt at skelne mellem de tre ætiologier (alle
                             encephalitisformer kan være fokale). Herpes simplex virus og
                             Varicella-Zoster virus encephalitis kan behandles med reduktion af
                             sequelae og mortalitet til følge. Initialt i sygdomsperioden kan
                             specifikke virale gensekvenser påvises i spinalvæsken med
                             polymerase kæde reaktionen (PCR).
                             Ved encephalitis er PCR positiv i de første dage efter sygdomsdebut,
                             men bliver senere negativ. Herpes simplex og Varicella-Zoster
                             encephalitis kan endvidere sandsynliggøres ved måling af niveauet af
                             specifikke antistoffer i spinalvæsken i forhold til blodet.
                             Antistofundersøgelsen vil typisk være positiv 10-14 dage efter
                             sygdomsdebut, og kan derfor anvendes til konfirmering af diagnosen.
                             Ved mistanke om encephalitis anbefales det initialt at foretage PCR
                             analyse for nævnte virus. Ved positivt testresultat eller vedvarende
                             klinisk mistanke bør intrathecal produktion af HSV antistoffer måles.
                             Denne undersøgelse udføres på Statens Serum Institut. Ved positiv
                             test for enterovirus bør undersøgelsen konfirmeres ved påvisning af
                             virus i fæces (rectalpodning / fæces) og/eller svælget. Ved klinisk
                             mistanke om poliomyelitis bør afdelingen kontaktes med henblik på
                             udvidet undersøgelsesprogram.


Undersøgelsens Princip       PCR på spinalvæske for HSV, VZV og enterovirus nukleinsyre.
                             Endvidere PCR på fæces og svælgsekret for enterovirus RNA.
Indikation                   Formodning om encephalitis eller meningitis, forårsaget af HSV
                             (behandlingskontrol), VZV eller enterovirus.


Tidspunkt for Prøvetagning Så tidligt som muligt efter sygdomsdebut.
Prøvemateriale               1 ml spinalvæske, uden tilsætning.
                             Rectalpodning, i 2 ml fysiologisk sterilt saltvand. Podepind efterlades
                             i glasset.


Utensilier                   Spidsglas, hvid vatpodepind til rectalpodning.


Opbevaring                   I køleskab.


Forsendelse                  I beskyttelsesrør med post eller intern transport.


Besvarelse                   Efter PCR undersøgelse oplyses om der er fundet virus DNA (HSV
                             eller VZV) eller enterovirus RNA. Enterovirus typenummer kan ikke
                             angives.


Tolkning                     Positiv PCR findes ved encephalitis/meningitis, men bør konfirmeres
                             ved anden test (intrathechaltest ved HSV og VZV infektion eller
                             påvisning af enterovirus i faeces). Enterovirus-typen kan bestemmes
                             ved dyrkning af virus, fx. fra fæces.


Bemærkninger                 Undersøgelsen er beskrevet i Statens Serum Instituts Håndbog.


Parvovirus B 19 (PARVO)
Undersøgelsens Princip       Påvisning af serum antistoffer mod Parvovirus af IgM og IgGklasse i
                             µ-capture og indirekte ELISA.


Indikation                   Formodning om erythema infectiosum (lussingesyge eller den 5.
                             børnesygdom). Udredning i forbindelse med febrilia og led-
                             symptomer, samt ved cytopenier.
                             Anfør om patienten er gravid.


Tidspunkt for Prøvetagning Akut prøve, evt. fulgt af ny prøve 2-3 uger senere.
Prøvemateriale               3 ml blod uden tilsætning eller 0,5 ml serum.


Utensilier                   Tørglas.
Opbevaring               I køleskab (4oC).


Forsendelse              I beskyttelsesrør med post eller intern transport.


Besvarelse               Svar angives separat for hver af de 2 analyser som enten negativt eller
                         positivt.
                         Enkelte undersøgelser vil falde ud som tvivlsomt positive; eventuelt
                         kan man her indsende en ny prøve efter 14 dage.


Tolkning                     IgM og IgG negativ:                    Ingen tidligere infektion.
                             IgM negativ, IgG positiv:              Tidligere infektion.
                             IgM positiv, IgG negativ eller         Aktuel infektion.
                             positiv:



                         Alle positive IgM: Ny prøve tilrådes14 dage senere. Kun hvis der er
                         sket signifikante ændringer i forhold til gamle prøve, tolkes patienten
                         at have aktuel infektion. Falsk positive reaktioner forekommer.


Bemærkninger             Exanthem hos gravide bør ALTID give anledning til undersøgelse for
                         Rubella også selvom, der er påvist IgM antistoffer mod Parvovirus,
                         idet der kan være tale om krydsreaktion eller dobbeltinfektion.
                         Hos immunkompromitterede patienter kan det serologiske respons
                         mangle. Virus kan da påvises i plasma ved PCR teknik.


Rubellavirus
Undersøgelsens Princip   Påvisning af serum antistoffer mod Rubellavirus.
                         IgM og IgG antistoffer påvises i immunologisk assay
                         (µ-capture henholdsvis indirekte ELISA).


Indikation               Mistanke om rubella. Immunologisk status (kun IgG antistoffer).
                         Formodning om akut infektion, særligt under graviditet fx efter
                         smitteudsættelse ved exanthem og ved mistanke om kongenit rubella.
                         Ved undersøgelse for immunitet (vaccinationskontrol) bør man kun
                         rekvirere undersøgelse for IgG antistoffer for at undgå risiko for at
                         påvise falsk positiv IgM reaktioner, jævnfør nedenfor. Hos gravide
                         kvinder, der ikke er sikkert immune overfor rubella tilrådes ny
                         serologisk kontrol ved udgangen af 16. graviditetsuge, og vaccination
                         anbefales efter afsluttet graviditet. Under rubellaepidemi tilrådes
                         serologisk kontrol hver 2. uge til udgangen af 16. graviditetsuge.
                         Anfør om patienten er gravid.
Tidspunkt for Prøvetagning Akut prøve, eventuelt fulgt af ny prøve 2-3 uger senere.
Prøvemateriale              3 ml blod uden tilsætning eller 0,5 ml serum.


Utensilier                  Tørglas.


Opbevaring                  I køleskab (4oC).


Forsendelse                 I beskyttelseshylster med post eller intern transport.


Besvarelse                  Svar angives som positiv eller negativ. Mængden af IgG antistof
                            angives i IE/ml. Efter følgende skema.
                                            Negative:                         < 10 IE/ml
                                       Tvivlsom positive:                   > 10 £ 15 IE/ml
                                            Positive:                     > 15 -> 400IE/ml.


                            Ved undersøgelse for immunstatus udføres alene IgG undersøgelsen.


Tolkning                    Positiv IgM antistof: Tyder på akut rubellainfektion, IgM kan som regel
                            påvises 1-3 måneder efter infektionen, men kan hos enkelte påvises i op til
                            1 år. Ved positiv IgM test i forbindelse med graviditet videresendes
                            prøven til Statens Serum Institut med henblik på konfirmatorisk test. Ny
                            prøve tilrådes.


                            Positiv IgG antistof                    Patienten er immun over for
                                                                    rubella.
                            (> 15 IE/ml):

                            Tvivlsom positiv IgG antistof           Patienten er ikke sikkert immun
                                                                    over for rubella.
                            (>10 £ 15 IE/ml):

                            Rubella IgG ikke påvist:                Patienten er ikke immun over for
                                                                    rubella.



Bemærkninger                Undersøgelserne er også beskrevet i Statens Seruminstituts Håndbog.
                            Det bør overvejes at vaccinere ikke immune kvinder mod rubella.


Hanta virus
Undersøgelsens Princip      Påvisning af serum antistoffer af IgG klasse mod Hanta-virus.
                            Undersøgelsen er en immunfluorescenstest med virusinficerede celler som
                             antigen. Den indsendte prøve undersøges i fortynding 1:10 og 1:100.
                             Påvisning af serum antistoffer af IgM klasse ved positiv resultat af IgG
                             undersøgelse.


Indikation                   Formodning om Nephropathia epidemica.


Tidspunkt for Prøvetagning Tidligst muligt i sygdomsforløbet og eventuelt efter 2 uger.
Prøvemateriale               3 ml blod uden tilsætning eller 0,5 ml serum.


Utensilier                   Tørglas.


Opbevaring                   I køleskab (4oC).


Forsendelse                  I beskyttelsesrør med post eller intern transport.


Besvarelse                   Positiv prøve IgG besvares med styrkegrad (titer):
                             10, 100 eller >100.


Tolkning                     Ved typiske symptomer på nephropathia epidemica er positiv reaktion
                             diagnostisk.


Borrelia
Undersøgelsens Princip       Påvisning af serum IgM og IgG antistoffer mod Borrelia burgdorferi
                             spirochætens flagelantigen.
                             IgG antistoffer påvises ved indirekte ELISA, IgM antistoffer ved μ-
                             capture ELISA.


Indikation                   Formodning om Lyme borreliose. Det er ikke nødvendigt serologisk at
                             bekræfte erythema migrans efter kendt flåtbid. Antistof undersøgelser kan
                             ikke anvendes til kontrol af behandlingseffekt.


Tidspunkt for Prøvetagning Første prøve så tidligt som muligt; derefter ny prøve med 2-4 ugers
                           interval, indtil diagnostisk afklaring er opnået.


Prøvemateriale               3 ml blod uden tilsætning eller 0,5 ml serum.


Rekvisitionsseddel           Der benyttes blå rekvisitionsseddel. Kliniske oplysninger har stor værdi
                             (erythema migrans, artritis, sygdomsvarighed).


Utensilier                   Tørglas.
Opbevaring                  I køleskab (4oC).


Forsendelse                 I beskyttelseshylster med post eller intern transport.


Besvarelse                  Svar afgives som positiv / negativ.


Tolkning                    IgM-testen bliver oftest positiv 2-6 uger efter begyndelsen af første
                            stadium af borreliose, erythema migrans.
                            IgG-testen kan være negativ indtil 2-3 måneder efter begyndelsen af andet
                            stadium (lymfocytær meningora-radiculitis, artritis, myocarditis).
                            Udvikling af IgG antistoffer kan være forsinket, specielt hvis patienten er i
                            antibiotisk behandling.
                            Efter behandling aftager styrken af IgM antistoffer, som dog kan påvises i
                            op til ét år. IgG antistoffer kan påvises i flere år. Positivt IgG resultat er
                            derfor ikke ensbetydende med aktuel infektion.


Bemærkninger                Falske positive reaktioner kan ses ved syfilis. Stærk positiv, falsk IgM
                            reaktion kan ses ved infektiøs mononukleose og andre sygdomme. Før
                            behandling iværksættes skal serologiske fund derfor vurderes nøje i
                            forhold til klinik og mulig eksposition for skovflåt.
                            Se i øvrigt Statens Serum Instituts Håndbog.


Intrathekale antistoffer ved neuroborreliose
Undersøgelsens Princip      Parallel undersøgelse af cerebrospinalvæske og serum for antistoffer mod
                            Borrelia burgdorferi med henblik på at påvise lokal (intrathekal)
                            produktion af antistoffer.
                            IgM antistoffer undersøges ved μ-capture ELISA, IgG antistoffer ved γ-
                            capture ELISA. Metoden er særlig velegnet til at påvise antistoffer i
                            spinalvæske, hvor det totale indhold af IgG antistoffer er lavere end i
                            serum.


Indikation                  Formodning om neuroborreliose.


Tidspunkt for Prøvetagning Første prøve så tidligt som muligt, derefter ny prøve med 2-4 ugers
                           interval, indtil diagnostisk afklaring er opnået.


Prøvemateriale              Cerebrospinalvæske uden tilsætning, 1 ml.
                            3 ml blod uden tilsætning eller 0,5 ml serum.
                            Cerebrospinalvæske og blodprøve skal udtages med så kort interval som
                            muligt (< 48 timer).
                            Begge prøver skal indsendes samlet til afdelingen.
Rekvisitionsseddel           Der benyttes blå rekvisitionsseddel. Kliniske oplysninger har stor værdi
                             (især sygdomsvarighed).


Utensilier                   Tørglas og spidsglas.


Opbevaring                   I køleskab (4oC).


Forsendelse                  I beskyttelsesrør med post eller intern transport.


Besvarelse                   Udfra mængden af antistof i cerebrospinalvæske og tilhørende serum
                             udregnes et spinalvæske/serum indeks for henholdsvis IgM- og IgG-
                             klasse antistoffer mod Borrelia.
                             Positiv reference indeks: 0,3 - >100.
                             Indeks < 0,3: Ingen intrathekal antistofproduktion. Er der mononukleær
                             pleocytose i cerebrospinalvæsken, og er det tidligt i sygdomsforløbet,
                             tilrådes ny undersøgelse efter 1-2 uger.
                             IgG- og/eller IgM-indeks > 0,3 med samtidig lymfocytær pleocytose i
                             cerebrospinalvæsken tyder stærkt på, at der foreligger neuroborreliose.
                             Selvom der er tale om en semikvantitativ undersøgelse kan størrelsen af
                             indeks ikke tages som udtryk for sygdomsintensitet.
                             Efter adækvat antibiotisk terapi vil et specifikt IgM-indeks falde og efter
                             6-9 måneder sædvanligvis blive < 0,3. Forhøjet IgG-indeks kan persistere
                             i årevis og vil derfor i sig selv ikke være udtryk for pågående infektion.
                             Intrathekal testen vil hos nogle patienter først være positiv efter 6 ugers
                             sygdom.
                             Defekt blodhjernebarriere såvel som blodtilblanding til cerebro-
                             spinalvæsken mindsker indeksværdierne og giver ikke anledning til falske
                             positive fund.


Tolkning                     Jævnfør Statens Serum Instituts Håndbog.


Toxoplasma Gondii
Undersøgelsens Princip       Påvisning af serum antistoffer mod Toxoplasma gondii.
                             Prøverne undersøges for indhold af IgM og IgG antistoffer ved
                             immunologisk assay (µ-capture henholdsvis indirekte ELISA test).


Indikation                   Mistanke om Toxoplasmose.
                             Anfør om patienten er gravid.


Tidspunkt for Prøvetagning Akut prøve, eventuelt fulgt af ny prøve 2-3 uger senere.
Prøvemateriale               Blod uden tilsætning, 3 ml eller 0,5 ml serum.
Utensilier                Tørglas.


Opbevaring                I køleskab (4oC).


Forsendelse               I beskyttelseshylster med post eller intern transport.


Besvarelse                Svar angives som positivt eller negativt med angivelse af mængden af IgG
                          antistof ( IE/ml). Efter følgende skema:
                           Negativ:                            < 8 IE/ml
                           Tvivlsom positiv                    8 - < 10 IE/ml
                           Positiv:                            <10 IE/ml


Tolkning                  Positiv IgM antistof: Tyder på akut infektion med T. gondii, IgM kan dog
                          påvises i op til 12 måneder efter infektionen.
                          Positiv IgG antistof: Patienten er eller har været inficeret med T. gondii.
                          Negativ IgG antistof: Patienten er modtagelig for infektion.
                          Patienter med kompromitteret immunfunktion kan ikke altid reagere med
                          antistofdannelse mod mikroorganismer.
                          reaktivering, som blandt andet ses ved HIV infektion kan antistofrespons
                          mangle.
                          Ved fund af IgM antistoffer hos en gravid skal der undersøges en ny
                          prøve, taget 2 - 3 uger senere. Prøverne undersøges parallelt og sendes til
                          Statens Serum Institut (toxoplasmoseafdelingen) til udvidede
                          undersøgelser med henblik på at vurdere risikoen for smitte af fostret og
                          behov for at igangsætte behandling.


Bemærkninger              Toxoplasmose hos en gravid er ikke indikation for abortus provokatus,
                          men fostrets udvikling bør følges på specialafdeling med henblik på
                          antiparasitær kemoterapi.
                          Undersøgelserne er også beskrevet i Statens Serum Instituts håndbog.


Andre mikrobiologiske undersøgelser
Hepatitis og kvalitativ   Udføres på Klinisk immunologisk afdeling, Skejby Sygehus.
påvisning af HIV
Parasitologiske           Udføres på Parasitologisk laboratorium, Infektionsmedicinsk afdeling Q,
                          Skejby Sygehus.
Undersøgelser og
Pneumocystis carinii
Øvrige undersøgelser   Der henvises til Statens Serum Instituts Håndbog eller telefonisk
                       forespørgsel til KMA, tlf.nr. 8949 5610.

								
To top