Aseguramiento de calidad
EQUIPOS
MANIPULACION DE MUESTRAS
Norma ISO 17025
Bqca. QM Alicia I. Cuesta,
Consultora Internacional de la FAO
Objetivos de la clase:
EQUIPOS: Requisitos de la Norma 17025.
Equipos habituales de un laboratorio microbiológico.
Calibración y verificación de equipos: Definición y concepto.
Programas para calibración, verificación, limpieza y mantenimiento.
Registros del equipamiento.
MANIPULACION DE MUESTRAS: Requisitos de la Norma 17025.
Transporte de las muestras.
Recepción de las muestras.
Manipulación de las muestras.
Almacenamiento de las muestras.
Disposición final de las muestras.
REQUISITOS: EQUIPOS
El laboratorio debe estar provisto de
todos los equipos necesarios para la
correcta ejecución del ensayo.
Equipos habituales de
un laboratorio microbiológico :
Material de uso general: Material de vidrio o plástico
(Ejemplo: tubos de ensayo, placas de Petri, etc.),
instrumentos de muestreo, ansas de siembra, etc.
Equipos volumétricos como pipetas, distribuidores
automáticos, sembradores en espiral, etc.
Instrumentos de medida: termómetros, cronómetros,
balanzas, medidor de pH, contadores de colonias, etc.
Estufas, autoclaves, baños termostáticos, heladeras,
congeladores, campanas de flujo laminar, equipos de
filtración, etc.
REQUISITOS: EQUIPOS (cont)
Los equipos y su soporte lógico
usados en la realización del ensayo y muestreo
deben permitir lograr
la EXACTITUD REQUERIDA
y cumplir con las especificaciones
establecidas para los ensayos.
Hay equipos cuya exactitud es clave en el
impacto sobre la incertidumbre de los resultados,
por lo que es
imprescindible
que cumplan siempre con las especificaciones
más relevantes del método.
Definición: Calibración.
Conjunto de operaciones que
PERMITEN ESTABLECER,
en condiciones especificadas,
LA RELACIÓN EXISTENTE ENTRE :
los valores indicados por el instrumento de medida o un
sistema de medida
o un material de referencia
y
los correspondientes valores conocidos del mensurando.
(valores de una magnitud obtenidos mediante un patrón de referencia)
Calibración:
Formas de establecer esta relación es mediante:
Tablas de corrección
Rectas o curvas de calibración
otras
CALIBRACION
Elimina el error
CORRECCION Incertidumbre
Ejemplo:
Calibración de termómetro
TABLA 1
Termómetro a calibrar (Tx)
¿Qué hago? Termómetro patrón (Tp)
1. Mido n veces a una
Temperatura y completo la Termómetro Termómetro
TABLA 1. a calibrar patrón
(ºC) (ºC)
Tx Tp
Baño de agua
El baño se pone a Ti
Ejemplo:
Calibración de termómetro
TABLA 1
Termómetro a calibrar (Tx)
¿Qué hago? Termómetro patrón (Tp)
2. Esto lo realizo para
diferentes temperaturas (Ti) Termómetro Termómetro
según los requerimientos. a calibrar patrón
(ºC) (ºC)
3. Calculo la corrección e
incertidumbre para cada
punto.
Certificado de calibración de un termómetro
Ejemplo de resultados
Indicación del Corrección Incertidumbre
termómetro (º C) (º C)
(º C)
5.5 -0.4 +0.1
30.0 0.2 +0.2
36.8 0.2 +0.2
42.1 0.0 +0.3
Debe figurar:
Descripción e
identificación del
instrumento que se calibró.
Fecha de calibración.
Fecha de emisión del
certificado de calibración
nombre del cliente
Certificado de Metodología empleada
calibración de un para calibrar.
termómetro Rango de calibración.
Resultados: corrección e
incertidumbre para cada
temperatura.
Definición:
Incertidumbre de la medición
Parámetro asociado al resultado de la medición,
que caracteriza la dispersión de los valores que
podrían ser razonablemente asignados al
mensurando.
INDICA LA CALIDAD DE UNA MEDICIÓN.
Relación de exactitud (RE):
RE = Especificación
Incertidumbre
ISO 100012 recomienda RE>3:1
Preferiblemente hasta 10:1
Definición:
VERIFICACIÓN.
Confirmación por examen
y provisión de evidencia
de que los requerimientos especificados
han sido satisfechos.
Ejemplo:
Verificar diariamente una balanza con una pesa calibrada.
Verificación
del instrumento de medición
VERIFICACIÓN
TOMO DECISION
Asignar a la
tarea de medición
Reparar/ ajustar
Usarlo para otro equipo
Declararlo fuera de uso
REQUISITOS: EQUIPOS (cont)
Antes de poner en servicio un equipo (incluido
el empleado para el muestreo) se lo debe calibrar
o verificar con el fin de asegurar que responde a
las exigencias especificadas del laboratorio y
está conforme a las especificaciones
normalizadas pertinentes.
El equipo debe ser
verificado o calibrado
antes de su uso.
REQUISITOS: EQUIPOS (cont)
El laboratorio debe
documentar e implementar
Programas para
calibración y/o verificación
limpieza, mantenimiento y esterilidad
de los equipos cuando sea necesario.
(Los que tengan una influencia directa en los resultados de
los ensayos).
REQUISITOS: EQUIPOS (cont)
REQUISITOS PROVEEDORES DE CALIBRACION DE
EQUIPOS:
La calibración de los equipos debe ser llevada a cabo por
laboratorios de calibración que demuestren su
competencia y su capacidad de medición y trazabilidad.
(Laboratorio acreditado o aceptado por el organismo de
acreditación)
Las mediciones hechas por el laboratorio de calibración
deben ser trazables al Sistema Internacional de Unidades
(SI).
La naturaleza del equipo.
La frecuencia
de la calibración y/o Condiciones de uso.
verificación
de los equipos Gravedad de las
o patrón de consecuencias de una falta de
referencia calibración y/o verificación.
depende de:
Historia previa del equipo o
patrón de referencia.
Recomendaciones del
fabricante.
Directrices para
calibración de
equipos en el Tipo de Equipamiento Requisitos Frecuencia sugerida
laboratorio de Termómetro de referencia
Recalibrado y plenamente
trazable
Cada 5 años
microbiología. Termocupla de referencia
Recalibrado y plenamente
trazable
Anualmente.
Frente a un termómetro de
referencia en punto de
Termómetro de trabajo Anualmente.
congelación y/o rangos de
temperatura de trabajo
Frente a un termómetro de
referencia en punto de
Termocupla de trabajo Anualmente.
G-ENAC-04REV. 2 congelación y/o rangos de
temperatura de trabajo
Marzo 97.Guía para Balanza
Calibración plenamente
trazable
Anualmente.
la acreditación de Pesas de calibración
Calibración plenamente
trazable
Bianualmente/
Anualmente.
laboratorios que Frente a pesa calibrada o
verificar en la balanza
Pesas de control Anualmente.
realizan análisis inmediatamente después de
la calibración trazable
microbiológicos Microscopios
Calibración trazable al
micrómetro (cuando sea Inicialmente
apropiado)
Calibración trazable o
Centrifuga verificación con un Anualmente.
tacómetro independiente
Cronómetro Frente a la hora oficial Anualmente.
Directrices para la
puesta en servicio y
verificación de Tipo de Equipamiento Requisitos Frecuencia sugerida
equipos en el Equipos con temperatura
controlada
a) Verificar la estabilidad
y uniformidad de la
a) Inicialmente, cada 2
años y luego de una
reparación o modificación
laboratorio de (estufas de cultivo, baños ,
heladeras, congeladores)
temperatura
b) Verificar la temperatura
b) Diariamente o con cada
uso.
microbiología. a) Verificar la estabilidad
y uniformidad de la
a) Inicialmente, cada 2
años y luego de una
Estufas de esterilización reparación o modificación
temperatura
b) Diariamente o con cada
b) Verificar la temperatura
uso.
a) Verificar la estabilidad a) Inicialmente, cada 2
y uniformidad de la años y luego de una
Autoclave temperatura reparación o modificación
b) Verificar la temperatura b) Con cada uso.
G-ENAC-04REV. 2 c) Verificar el tiempo
a) Verificar las
c) semestralmente
a) Inicialmente y luego de
características técnicas una reparación o
Marzo 97.Guía para Cabinas de seguridad b) Verificar la velocidad
del aire
modificación
b) Anualmente.
la acreditación de c) Monitoreo microbiológico c) semanalmente
a) Inicialmente y luego de
a) Verificar las
laboratorios que Campana de flujo laminar características técnicas
b) Verificar la esterilidad
una reparación o
modificación
b) Mensualmente.
realizan análisis Ajuste de la respuesta
usando como mínimo dos Diariamente o con cada
Peachímetros
buffers de calidad uso
microbiológicos aceptable.
Ajuste a cero y verificación Diariamente o con cada
Balanzas
con la pesa control uso
a) Verificar la
Destilador, desionizador y Conductividad a) Semanalmente
unidad de ósmosis inversa b) Verificar la b) Mensualmente.
Directrices para la
puesta en servicio y
verificación de
equipos en el Tipo de Equipamiento Requisitos
a) Verificar peso y volumen
Frecuencia sugerida
laboratorio de Diluidores gravimétricos
(peso) dispensado.
b) Verificar coeficiente de
a) Diariamente
b) Mensualmente.
dilución
microbiología. Inicialmente y
periódicamente
Verificar el volumen
Distribuidores de medios dependiendo de la
distribuido.
frecuencia y naturaleza
de su uso.
a) Inicialmente y
Verificar la precisión y periódicamente
Pipetas automáticas exactitud del volumen dependiendo de la
distribuido frecuencia y naturaleza
de su uso.
G-ENAC-04REV. 2 a) Verificar las características
técnicas frente al método a) Inicialmente y
Marzo 97.Guía para la Sembradores en espiral
convencional
b) Verificar el estado del
anualmente.
b) Diariamente o con
acreditación de punzón y puntos de inicio y
fin.
cada uso.
c) Mensualmente
c) Verificar volumen distribuido.
laboratorios que
Contadores automáticos Verificar frente al recuento
Anualmente.
realizan análisis de colonias manual
microbiológicos Jarra de anaerobiosis Indicador de anaerobiosis Con cada uso
Verificar la aceleración contra
Centrifugas un tacómetro calibrado y Anualmente.
independiente
REQUISITOS: EQUIPOS (cont)
Es de primordial importancia que el laboratorio cuente con
un programa formal, documentado e implementado de
mantenimiento de equipos.
El mantenimiento de los equipos esenciales debe
realizarse a intervalos especificados.
(por el departamento de mantenimiento, por el proveedor,
fabricante, etc).
En el documento ISO 7218: 1996 (E), se facilitan
directrices sobre el mantenimiento de los equipos.
Directrices para el Tipo de Equipamiento Requisitos Frecuencia sugerida
Estufas de cultivo, Limpiar las superficies
mantenimiento de heladeras, congeladores
Estufas de esterilización
internas y desinfectar si es
necesario
Semestralmente
equipos Baños de agua
Vaciar, limpiar, desinfectar
Mensualmente
y rellenar
en el laboratorio de Centrifugas Limpiar y desinfectar Trimestralmente
microbiología. Autoclaves
Verificar visualmente la
junta, limpiar/drenar la Mensualmente
cámara
Cabinas de seguridad y de
Revisión /cambio de filtros Anualmente
flujo laminar
Microscopios Limpieza de objetivos Anualmente
a)Limpiar los electrodos
a)Con cada uso
Peachímetros b)Revisar/rellenar
G-ENAC-04REV. 2 electrolito
b)Cuando sea necesario
Marzo 97.Guía para la Balanzas/ Diluidores
gravimétricos
a)Limpiar
b)Revisar
a) Con cada uso
b) Anualmente
acreditación de Destilador Limpiar y desincrustar Según sea necesario
laboratorios que Desionizador y unidad de
ósmosis inversa
sustituir cartucho y
membrana
Según recomendación del
fabricante
realizan análisis Jarra de anaerobiosis Limpiar y desinfectar Después de cada uso
Distribuidores de medios,
microbiológicos Pipetas automáticas,
equipos volumétricos, etc.
Limpiar y desinfectar
según sea apropiado
con cada uso
a) Descontaminar, limpiar
a) Con cada uso
Sembradores en espiral y esterilizar.
REQUISITOS: EQUIPOS (cont)
PARA CADA EQUIPO UTILIZADO EN LOS ENSAYOS EL
LABORATORIO DEBE TENER:
Identificación inequívoca y registro del equipo (con su
soporte lógico o software).
Los resultados de las calibraciones y verificaciones.
Las instrucciones actualizadas de uso y mantenimiento
del equipo disponibles (incluido el manual suministrado por
el fabricante) para el uso del personal del laboratorio.
EN EL IDIOMA DEL PAIS
REQUISITOS: EQUIPOS (cont)
Los registros del equipamiento deben
incluir como mínimo:
Nombre del fabricante, Informes de todas las
modelo, número de serie u calibraciones (debe contener
otros datos que lo identifique. fecha de calibración y
resultados), fecha prevista de
Datos de comprobación de la próxima calibración, los
cumplimiento de las ajustes, los criterios de
especificaciones a su ingreso. aceptación.
Ubicación del equipo dentro Plan de mantenimiento
del laboratorio, cuando (cuando corresponda ) y
corresponda (ver Plano del mantenimiento llevado a cabo
laboratorio) hasta la fecha
Todo daño, mal
Fecha de adquisición y funcionamiento, modificación o
puesta en servicio. reparación del equipo.
Instrucciones del fabricante Esto debe mantenerse durante
o la referencia a su ubicación. toda la vida útil del equipo y hasta
dos años después de sacarlo de
servicio.
REQUISITOS: EQUIPOS (cont)
Los equipos bajo el control del laboratorio que requieren
una calibración deben ser rotulados y identificados
Se deben colocar las Ejemplo:
etiquetas en el equipo : Etiqueta A: Nº de inventario.
Identificación del equipo. Etiqueta B:
color verde:
equipo/patrón en funcionamiento
Indicando si el equipo
está en funcionamiento o o
fuera de servicio. color rojo:
equipo/patrón fuera de período
de calibración/verificación.
Su estado de calibración.
Etiqueta C:
Fecha de calibración/verificación
Fecha de la próxima
calibración/verificación.
Autoclave
Además de controlar directamente la temperatura,
tiempo y presión del autoclave,
se comprueba la eficacia de su funcionamiento en
cada ciclo de esterilización o descontaminación.
mediante:
Indicadores Químicos. La cinta de autoclave o las
tiras indicadoras (controles químicos) permiten
distinguir que una carga ha sido procesada.
Indicadores Biológicos.
Autoclave
Los controles biológicos:
☺Evalúan la efectividad de la
totalidad del proceso de
esterilización.
☺Contienen esporas
de género Bacillus.
☺En todos los casos los
resultados obtenidos de
controles químicos y
biológicos se deben registrar.
Verificación de la temperatura de trabajo:
Se realiza un Registro de control de
monitoreo continuo de las temperatura:
temperaturas de las estufas,
heladeras, congeladores
usados para la realización -Equipo.
del ensayo. -Nº de inventario.
-Instrumento:
La temperatura del baño Corrección e incertidumbre
termostático se registra del termómetro.
antes de su uso. -Rango de aceptación.
-Tolerancia.
Ejemplo Cálculo del rango de aceptación
REGISTRO DE CONTROL DE TEMPERATURA:
Equipo: estufa de cultivo de 30º C. Nº de inventario_ _ _
Instrumento: termómetro Nº de inventario_ _ _
CORRECCIÓN DEL TERMÓMETRO (º C ): + 0.3
INCERTIDUMBRE DEL TERMÓMETRO (º C ): + 0.2
TOLERANCIA según metodología usada + 1 º C
Ejemplo Cálculo del rango de aceptación (cont)
Rango aceptado por la técnica es 29 y 31 º C
Cuando leo en el instrumento 29º C en realidad tengo que
leer (es 28.7+0.2) o sea 28.9.
Cuando leo en el instrumento 31º C en realidad tengo que
leer (es 30.7-0.2) o sea 30.5.
Rango de aceptación es 28.9 a 30.5 º C
RANGO DE LECTURA aceptada de las temperaturas leídas
con ese termómetro con esa calibración.
Síntesis parcial
Requisitos equipos:
•Los equipos y su soporte lógico usados en la
realización del ensayo y muestreo deben permitir
lograr la exactitud requerida y cumplir con las
especificaciones establecidas para los ensayos.
•El laboratorio debe documentar e implementar
programas para la limpieza, mantenimiento,
calibración y/o verificación y esterilidad de los
equipos cuando sea necesario.
MANIPULACIÓN DE LAS MUESTRAS
El laboratorio debe tener procedimientos para :
El transporte
La recepción
La protección, el almacenamiento.
La manipulación
La conservación o la disposición final
de las muestras a ensayar.
Requisitos:
MANIPULACIÓN DE LAS MUESTRAS
MUY IMPORTANTE: El laboratorio debe tener un
sistema para la identificación unívoca de las muestras
a ensayar.
La identificación debe ser conservada a lo largo de la
vida de la muestra en el laboratorio.
El sistema debe ser diseñado y operado de modo tal que
asegure que las muestras no puedan ser confundidas
físicamente o cuando se haga referencia a ellas en
registros u otros documentos.
Requisitos:
MANIPULACIÓN DE LAS MUESTRAS
El laboratorio debe tener:
procedimientos
e instalaciones apropiadas
para evitar el deterioro, la pérdida o daño
de las muestras
durante su:
manipulación, preparación y
almacenamiento.
Diagrama de
flujo de
manipulación
de las
muestras
REQUISITOS:
Transporte de las muestras.
Se debe evitar durante el transporte al laboratorio cualquier
alteración de las muestras.
•Las muestras deben ser enviadas con la mayor brevedad
posible al laboratorio.
•Se documenta quién es el responsable del transporte .
El transporte debe realizarse:
Acondicionados adecuadamente dependerá del estado
físico del producto (líquido, sólido o semisólido).
En recipientes adecuados
A temperaturas adecuadas de conservación del alimento.
Transporte de las muestras:
Dependiendo del tipo
de alimento que se
trate, Temperaturas de
se prestará particular Tipos de Productos almacenamiento durante
atención en el transporte(º C)
mantener las Estables Temperatura ambiente
temperaturas de Fresco o refrigerados Entre 0 a + 4
almacenamiento
durante el transporte Congelados Debajo de -18
en los rangos Pasteurizados y productos
Entre 0 a + 4
aceptables según similares
figura en el cuadro. Unidades estables dañadas Entre 0 a + 4
Referencia: Norma
ISO 7218:1996 (E)
REQUISITOS:
RECEPCIÓN DE LAS MUESTRAS.
Las condiciones de llegada al laboratorio de las muestras
deben ser verificadas por el personal perteneciente al mismo.
Si la muestra es:
Insuficiente o
se encuentra en mal estado por deterioro físico,
temperatura inapropiada, envase roto o etiquetado
defectuoso:
El laboratorio debe consultar con el cliente antes de decidir si
analiza o rechaza la muestra.
Debe indicar su estado en el informe del ensayo.
Una vez recibidas las muestras se analizarán lo antes posible.
Recepción de las muestras.
El personal técnico debe etiquetar y almacenar cada
muestra:
N ° PE:
N ° muestra:
Fecha de ingreso al laboratorio:
Descripción de la muestra:
Fecha vencimiento de la muestra
Manipulación de las muestras:
•La preparación de las muestras y porciones de ensayo
realizado por el laboratorio inmediatamente antes del
ensayo debe efectuarse conforme a procedimientos
documentados basados en normas nacionales o
internacionales, si es que existen, o a métodos internos
validados.
•Los procedimientos de preparación de las muestras y
porciones de ensayo deben diseñarse teniendo en cuenta
las directrices generales contenidas en los documentos en
ISO 6887 e ISO 7218.
•Se debe llevar los registros del desarrollo del trabajo.
REQUISITOS
Almacenamiento de las muestras:
Las muestras que se encuentren a la espera de ser
analizadas deben almacenarse en condiciones
adecuadas para reducir al mínimo cualquier
modificación en la población microbiana presente.
El laboratorio debe definir y registrar dichas
condiciones de conservación.
Los tiempos límites de almacenamiento
dependerán del tipo de producto
Referencia: Norma ISO 7218:1996 (E)
(1) Si no se puede procesar Tipos de Productos
Tiempos límites de
en ese tiempo, las muestras almacenamiento (horas)
Tan rápido como sea
se pueden congelar por posible y
Estables
debajo -18 º C. antes de su fecha de
vencimiento
Esto debe ser mencionado dentro de 24 horas de la
en el informe de ensayo. Fresco o refrigerados
recepción la muestra (1)
Precaución: En algunos Tan rápido como sea
Pasteurizados y posible y
productos el congelamiento productos similares antes de su fecha de
produce un cambio de la vencimiento
composición de la flora. Unidades estables
Tan rápido como sea
posible y dentro de 48
dañadas
horas
REQUISITOS
Disposición final de las muestras:
Debe existir un procedimiento documentado para la
conservación y eliminación de muestras.
Las muestras deben conservarse hasta que se hayan
obtenido los resultados del ensayo, o más tiempo según
sea necesario.
Cuando se sepa que algunas porciones de muestras de
ensayo del laboratorio están altamente contaminadas,
deben descontaminarse antes de su eliminación.
REQUISITOS
Disposición final de las muestras:
La correcta eliminación de materiales contaminados puede
no afectar directamente a la calidad de los análisis de las
muestras, aunque los procedimientos deben diseñarse
para reducir al mínimo la posibilidad de contaminación del
lugar donde se realiza el ensayo o los materiales utilizados
en el mismo.
No obstante, es un aspecto de la correcta gestión de un
laboratorio y debe respetarse la legislación nacional e
internacionales sobre medio ambiente, salud y seguridad
(véase también ISO 7218).
Síntesis final
El laboratorio debe tener procedimientos para :
el transporte, recepción, la protección, el almacenamiento,
la manipulación y disposición final de las muestras.
•El laboratorio debe tener un sistema para la identificación
unívoca de las muestras a ensayar, conservada a lo largo
de la vida de la muestra en el laboratorio.
•Se deben registrar los apartamientos de las condiciones
especificadas para las muestras en el momento de su
recepción en el laboratorio.
•El laboratorio debe tener instalaciones apropiadas para
evitar el deterioro, la pérdida o daño de las muestras
durante manipulación, preparación y almacenamiento