Endocrinología I
(1) 420. EL EFECTO APOPTOTICO DEL FACTOR DE NECROSIS TUMORAL-ALFA (TNF) Y
EL LIPOPOLISACARIDO BACTERIANO (LPS) EN ADENOHIPOFISIS ES DEPENDIENTE DE
ESTROGENOS CANDOLFI MARIANELA, NAVARRA Santiago, JAITA Gabriela, ZALDIVAR
Verónica, PISERA Daniel, SEILICOVICH Adriana
Centro de Investigaciones en Reproducción, Facultad de Medicina, Universidad de Buenos Aires
Nuestros resultados previos indican que el TNF induce apoptosis de lactotropos de manera dependiente de los estrógenos. En el
presente trabajo hemos investigado la influencia de 17-ß estradiol (E) y progesterona (P) en la apoptosis (por morfología nuclear
con tinción por DAPI) de lactotropos y somatotropos (identificados por inmunofluorescencia) inducida por el TNF. En cultivos de
células adenohipofisarias de ratas ovariectomizadas (OVX), el TNF aumentó el porcentaje de lactotropos apoptóticos en
presencia de E pero no de E+P [C 1.5, TNF 2.4; E2 3, E+TNF 8 (p110,0) (B). En IRC identificamos:1 P con reserva adrenal conservada
(SAF >50,0 y SAL >100,0)(C);1P con hiporespuesta de SAF(110,0) (D);3P con respuesta de SAF
conservada ( >42,0) e hiporespuesta de SAL(40,0,SAL >120,0 y ARP
significativamente elevada (rango) 4,4-37,0 (F).
La determinación simultánea de SAF y SAL en respuesta a ACTH permitió identificar pacientes con:insuficiencia adrenal primaria
(A),insuficiencia adrenal secundaria (B y D),hipoaldosteronismo
selectivo (E) y pseudohipoaldosteronismo (F).
(39) 483. EFECTO DE LA GLICACIóN DE UNA MATRIZ EXTRACELULAR SOBRE LA
ADHESIóN DE OSTEOBLASTOS: PARTICIPACIóN DE INTEGRINAS. MCCARTHY ANTONIO,
UEMURA Toshimasa, ETCHEVERRY Susana, CORTIZO Ana
Cátedra de Bioquímica Patológica, Facultad de Ciencias Exactas, Universidad Nacional de La
Plata
La capacidad de unión de osteoblastos a una matriz ósea modula el crecimiento, diferenciación y mineralización celular. Se
examinó la adhesión de preosteoblastos MC3T3E1 de ratón y de células UMR106 de osteosarcoma de rata, a una matriz de
colágeno tipo I control (Col) o modificado por productos de glicación avanzada (AGE-Col). Se investigó el rol de diferentes
integrinas en la adhesión, coincubando las células con un péptido-b (secuencia 113-125 de la subunidad b de integrinas) o con
otros dos péptidos, RGD y DGEA, secuencias de reconocimiento para las integrinas a1,5b1 y a2b1. AGE-Col inhibió la adhesión
de los osteoblastos UMR106 a la matriz (40%, p 80%, exclusión de Azul Tripán) que se cargaron con diferentes
concentraciones de RB mediante incubación (15 min.) a 37ºC. Los paquetes celulares se lavaron para eliminar la RB extracelular
y se determinó el eflujo en medio sin RB a 37 y 4ºC, entre 6 seg. y 30 min.. Se separó célula/medio por centrifugación a través de
capa oleosa. Se determinó por fluorimetría (por duplicado) la RB remanente en los hepatocitos (5x10 6 cel/ml). El rango de
concentraciones iniciales de carga (CIC) (a 6 seg. de eflujo) fue de 20 a 200 pmoles x 10-6 cel. Los valores de eflujo se ajustaron
por una monoexponencial decreciente que determinó para cada CIC, los parámetros t½ (tiempo de vida media; min), S y B
(componentes específico e inespecífico respectivamente; pmoles x 10-6 cel.). A 37ºC, S y B aumentaron linealmente con CIC (r:
0,9). t½ (x ± ES; min.) se mantuvo constante 0,65 ± 0,07. A 4ºC disminuyó el eflujo 4% para la CIC más baja y 20% para la
mayor.
En el rango de bajas CIC analizadas el eflujo no mostró la saturación propia de los fenómenos mediados. Sin embargo, el efecto
de la temperatura y la presencia del parámetro S sugieren un posible componente activo a ser evaluado.
(58) 855. N-ACETILCISTEINA (NAC) Y CITOPROTECCION GASTRICA. CESOLARI JOSÉ,
LAUDANNO Oscar, CALVI Bruno
Cátedra de Histología y Embriología Gastroenterología Experimental, Facultad de Ciencias
Médicas.UNR
El objetivo de este trabajo fue estudiar el agente mucolítico NAC en citoprotección gástrica y su probable mecanismo de acción.
A grupos de ratas Wistar (n=7 c/grupo), 200g, en ayuno de 24hs. excepto agua ad-libitum y evitando la coprofagia se realizaron:
1) Sol. Fisiológica (SF) 1 ml. por sondaje orogástrico (OG) en bolo y se esperó 60 min. (testigo). 2) NAC.20mg/Kg, OG, 60 min. 3)
Etanol (ETOH) 20% 1 ml. OG, 20 min. 4) ETOH 96%, 1ml, OG, 20 min., (testigo). 5) NAC y luego ETOH 20%. 6) NAC y luego
ETOH 96%. 7) Ketorolac (inhibidor de ciclooxigenasas) 30 mg/Kg. SC, 60min., NAC y posterior ETOH 96%. 8) Bicloruro de
mercurio (depletor de SH) al 1%o, 1 ml, SC, 30 min, NAC y posterior ETOH 96%. Las ratas fueron sacrificadas con sobredosis de
éter. Se gastrectomizó y se abrió estómago por curvatura mayor, tabulándose el porcentaje (%) del área lesional macroscópica,
por planimetría computarizada y se obtuvieron cortes para estudios histológicos e histoquímicos. Se calculó la t de Student y
ANOVA.El % de área lesional macroscópica gástrica:1)1.0±0.1. 2)1.0±0.1. 3)1.0±0.1.4)35.5± 5.5(90kD) y B (MrIL5), pero en 18m se encontraron
menores valores de INFg (18m: 5226pg/ml, 3m: 30563pg/ml) y de GM-CSF (18m: 587pg/ml, 3m: 1092pg/ml). Dado que CpG
estimula la hemopoyesis, analizamos cambios poblacionales en estos animales. Por citometría de flujo solo se encontró variación
en los Li CD19+. La inmunización indujo un aumento en Li CD19+ en PP, GM y cavidad peritoneal, este aumento fue menor en
ratones de 18m que en 3m.
Podemos concluir que CpG por vía oral induce en animales envejecidos una respuesta inmune Th1, sin embargo los niveles de
INFg y la respuesta de Acs son menores que en los animales jóvenes. Considerando que GM-CSF no aumenta en ratones
inmunes de 18m como lo hace en 3m, es posible que este factor influya en el desarrollo de una menor respuesta Th1 en
animales envejecidos.
(89) 650. ACTIVIDAD HELMINTOCITOTOXICA DE CELULAS DE RATAS PREñADAS
CONTRA TRICHINELLA SPIRALIS. ROL DE LA PROGESTERONA. NUñEZ GUILLERMO ,
GENTILE Teresa, COSTANTINO Susana, SARCHI Ines, VENTURIELLO Stella
Cátedra de Inmunología, Facultad de Farmacia y Bioquímica-Universidad de Buenos Aires.
Cátedra de Matemática, Facultad de Farmacia y Bioquímica
Las ratas preñadas (RP) presentan menor susceptibilidad a la infección por Trichinella spiralis, siendo la larva recién nacida
(LRN) el blanco del mecanismo efector. El suero de RP no infectadas induce la muerte de la LRN en presencia de leucocitos de
exudado peritoneal (LEP) de ratas normales. El objetivo de este trabajo fue analizar la contribución de las LEP de RP y el rol de
la progesterona (P4) en el mecanismo de destrucción parasitaria.
El efecto in vitro de los LEP de RP y de ratas vírgenes (RV) se evaluó en presencia o ausencia de un suero citotóxico.
El rol de la P4 en el ensayo de citotoxicidad se analizó utilizando LEP de ratas normales preincubadas con el antagonista
mefipristona (RU486).
Los estudios in vivo se realizaron con ratas ovariectomizadas tratadas con P4 a las que se infectó con larvas musculares (LM)
determinándose la carga parasitaria al día 30 post-infección.
Los resultados mostraron que:
-Las LEP de RP mediaron la muerte de la LRN a las 4 h de incubación y en ausencia de anticuerpo (RP: 28,5±8,1% vs RV:
6,0±8,5%)
-La citotoxicidad mediada por los sueros de RP fue inhibida en presencia de RU486 (LEP-RU: 0,9±0,8% vs LEP: 15,9±2,4%)
-La carga parasitaria de las ratas ovariectomizadas tratadas con P4 fue menor a la de las ratas control (986±490 LM/g vs
1679±367 LM/g)
Los resultados sugieren que el incremento de la citotoxicidad contra la LRN en la preñez se debería a un fenómeno de activación
celular siendo P4 uno de los factores responsables.
(90) 669. MODIFICACIONES EN LOS NIVELES SÉRICOS DE CITOCINAS PRO Y ANTI-
INFLAMATORIAS EN PACIENTES CON ARTRITIS REUMATOIDEA (AR) DE DISTINTO
TIEMPO DE EVOLUCIÓN (TE) DE LA ENFERMEDAD RONDELLI FLAVIA, GOÑI Mario, PONS
ESTEL Bernardo, GENTILETTI Alberto, BOTTASSO Oscar, BAY María
Instituto de Inmunología, Facultad de Ciencias Médicas, Universidad Nacional de Rosario
Previamente demostramos que los niveles de interferón-gamma (IFN), interleucina-10 (IL-10) y factor de necrosis tumoral alfa
(TNF) estaban disminuidos en cultivos de células periféricas mononucleares de pacientes AR estimuladas con antígenos
micobacterianos respecto de los controles sanos (Co), no así los de factor de crecimiento transformante beta (TGF-ß) que
estaban aumentados. Se propuso investigar en pacientes con AR (no inmunosuprimidos, n=29) y Co (n=29) los niveles séricos
de dichas citocinas (ELISA, R&D) y nitritos (NO, µM), y su eventual asociación con el TE (24 meses) e índice articular
(IA) de la AR. IFN (pg/ml, media±es) AR: 45.5±16.7, Co: 8.56±0.56, p24 no arrojó diferencias, y no se observaron correlaciones entre mediadores e IA. Al correlacionar por TE,
NO 24: r =0.84, n: 9, p24 r=0.35, n: 8, ns.
El perfil de citocinas séricas no aparece polarizado y presenta una relación distinta a la obtenida in vitro. La asociación entre IFN-
gamma e IL-10 en la etapa temprana de la AR indicaría la presencia de mecanismos reguladores que luego se pierden como lo
evidenciaría la relación entre NO y antigüedad mayor a 24 meses.
(91) 688. EFECTO DE LA EXPOSICION A ESTRES CRONICO SOBRE LAS SEÑALES
INTRACELULARES TEMPRANAS QUE PARTICIPAN EN LA PROLIFERACION DE
LINFOCITOS T INDUCIDA POR MITOGENOS. SILBERMAN DAFNE MAGALí, GENARO Ana
maría
Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos.
La proliferación de linfocitos T (LT) es mediada por una compleja serie de eventos intracelulares. Las señales tempranas
gatilladas tras estimulación involucran la concentración de calcio intracelular y la actividad de dos proteínas quinasas (PK) con
funciones opuestas: PKC y PKA. En un trabajo previo encontramos que la respuesta proliferativa de LT inducida por mitógenos
está disminuída tras exposición a estrés crónico. A fin de analizar la participación de las señales tempranas en esta alteración
inmunológica, evaluamos el incremento de calcio intracelular, la actividad de PKC y los niveles de AMPcíclico tras estimulación
con concanavalina A en LT de ratones normales (N) y expuestos a estrés crónico (E). Encontramos que la liberación de calcio
intracelular fue significativamente menor en LTE respecto de LTN ([Ca((2+))](nM), X±ES, basal N: 68±5, E: 72±6; Con A N:
224±19, E: 154±19, n=6). Asimismo observamos una menor translocación de PKC tras estimulación (membrana/citosol, basal N:
12/88, E: 17/83; ConA N: 63/37, E: 30/70, n=6). Con respecto a los niveles de AMPc la disminución observada tras estimulación
mitogénica fue menor en los linfocitos de E (%disminución, N: 59±8% , E:38±6, n=6).
Concluímos que las señales tempranas que participan en la proliferación celular de LT están severamente influenciadas por el
estrés crónico llevando a una menor reactividad inmunológica, que podría estar implicada en el déficit inmunitario reportado en
individuos bajo estrés.
(92) 706. IDENTIFICACIÓN DE LIPOFILINA C EN TEJIDO PROSTÁTICO HUMANO NORMAL
(PHN) Y PATOLÓGICO PIATTI VERÓNICA , RIVERO Virginia, MACCIONI Mariana
Inmunología. Dpto. Bqca. Clínica. Fac. Cs. Qcas. Universidad Nacional de Córdoba.
El estudio de las proteínas de la familia de la uteroglobinas genera gran interés debido a su conocido carácter
antiinflamatorio.Dentro de ellas, las más recientemente identificadas son las lipofilinas humanas (LA, LB y LC), péptidos
homólogos a prostateína de rata, cuya función inmunosupresora ha sido descripta en nuestro grupo.LA,LB y LC han sido aisladas
sólo de lágrimas (LA y LC) y de mama (LB). A pesar de su alta concentración en lágrimas y su sobreexpresión en neoplasias
mamarias, su rol fisiológico no ha sido totalmente dilucidado. Nuestro objetivo fue conocer si las lipofilinas se expresan en
próstata normal y/o tejido patológico.Utilizando antisueros específicos anti-LA, LB y LC, la presencia de las mismas se evaluó por
ELISA e inmunotransferencia.Por ELISA, se demostró la presencia de LC en PHN (índice de unión: 3.02 ± 0.46), sin poder
detectar LA y LB. Por inmunotransferencia de PHN revelada con anti LC, se detectó una banda de aprox. 11 kDa, cuyo tamaño
coincide con el descripto en literatura.La expresión de LC, se confirmó también por ensayos de RT-PCR usando primers
específicos. LC también se detectó por ELISA (i: 3.82 ± 0.71) e inmunotransferencias en tres muestras diferentes de adenoma
prostático (AP). Por FPLC se logró obtener una fracción enriquecida de LC para posterior estudios de su rol in vitro.
Hemos demostrado la presencia de LC en PHN y AP. Debido al rol inmunosupresor de su hómologa prostateína, futuros ensayos
evaluarán esta posibilidad in vitro.
(93) 741. MECANISMOS MOLECULARES INVOLUCRADOS EN LA MODULACION IN VITRO
DE LA RESPUESTA INMUNE HUMORAL POR ESTROGENOS Y PROGESTERONA.
ALVAREZ IRENE, BEROD Luciana, CANELLADA Andrea, MARGNI Ricardo
IDEHU-Cátedra de Inmunología, Facultad de Farmacia y Bioquímica, UBA.
Recientemente reportamos que estrógenos (E2) y progesterona (Pg) modulan de forma dosis dependiente la síntesis de
anticuerpos asimétricos por un hibridoma murino. También se ha demostrado que IL-6 y PIBF-progesterone induced blocking
factor- estimulan la síntesis de estos anticuerpos in vitro. Aquí analizamos si E2 y Pg pueden modular la vía de transducción de
señales del receptor de IL-6 (IL-6R) en células de hibridoma y si las mismas son capaces de sintetizar PIBF en respuesta a Pg.
Se realizaron tres experimentos en los cuales un hibridoma B se cultivó con distintas concentraciones de E2 y Pg durante 48 h y
luego se midió PIBF en los extractos celulares por western blot (WB). Para investigar la transducción de señales de IL-6R, el
hibridoma se incubó por 48 h con y sin 10 ng/mL de IL-6, se descartó el sobrenadante de cultivo y luego se incubó por 30 minutos
con medio fresco adicionado de 20 ng/mL de IL-6. La expresión de las moléculas gp130 y JAK-1 fue medida por WB en los
extractos celulares.
La máxima expresión de PIBF por el hibridoma se observó con Pg 10((-10)) M (p<0.05). El análisis de transducción de señales
de IL-6R mostró que IL-6 incrementó la expresión de JAK-1 y gp130, sin embargo 10((-6)) M de E2 y Pg disminuyeron la
expresión de gp130 (p<0.05) mientras que JAK-1 no fue significativamente afectada.
Estos datos muestran dos mecanismos moleculares que estarían involucrados en la modulación de la síntesis de anticuerpos
asimétricos ejercida por E2 y Pg.
(94) 774. LOS GLUCOCORTICOIDES ENDÓGENOS (GC) DISMINUYEN LA RESPUESTA
INFLAMATORIA DEL NEUTRÓFILO (PMN) EN UN MODELO MURINO DE SINDROME
URÉMICO HEMOLÍTICO (SUH). GóMEZ SONIA , FERNáNDEZ Gabriela c, RUBEL Carolina j,
ALVES ROSA Fernanda , DRAN Graciela i, ISTURIZ Martín a, PALERMO Marina s
Academia Nacional de Medicina
El síndrome urémico hemolítico (SUH) es causado por Escherichia coli productora de toxinas Shiga (Stx). Evidencias clínicas y
experimentales sugieren la participación de los PMN en su patogénesis. Por el contrario nosotros demostramos en el modelo
murino de SUH por inoculación e.v. de Stx2 que los GC endógenos disminuyen la toxicidad de la Stx2. Considerando que la Stx2
induce la expresión de su receptor de GC (GR) en PMN, nos propusimos evaluar la función de los PMN en dicho modelo, en
ausencia de los efectos de los GC, por el pretratamiento con el antagonista del GR: Ru486. Los resultados se expresan como %
de aumento con respecto a ratones inoculados con Sc salina. El tratamiento con Stx2 disminuyó la fagocitosis de zymosán-FITC
por PMN solo a las 24 hs post Stx2, y el Ru486 potenció esta inhibición: Stx= -18±3; Stx+Ru486= -29±3.5, p<0.03, n=8.
Contrariamente, la Stx2 aumentó la generación de intermediarios reactivos del oxígeno, y el Ru486 potenció este aumento a
todos los tiempos post-Stx2: Stx vs Stx+Ru486: 24h: 48.4±8 vs 109.7± 28, p<0.003; 72h: 64.8±12 vs. 85±14 p<0.02, n=10.
Además la Stx2 induce la apoptosis de PMN en forma significativa a las 72 hs, el Ru486 también potencia este efecto: Stx: 26±9;
Stx+Ru486: 62±13, p<0.05, n=8.
Estos resultados indican que los GC endógenos disminuyen la capacidad inflamatoria de los PMN inducida in vivo por la Stx2, en
el modelo murino de SUH.
(95) 804. EXPRESIÓN DE LA PROTEÍNA INFLAMATORIA DE MACRÓFAGOS-1ß (MIP-1ß)
EN UN MODELO DE ORQUITIS AUTOINMUNE EXPERIMENTAL GUAZZONE VANESA ,
RIVAL Claudia, DENDUCHIS Berta, LUSTIG Livia
Ctro. de Investig. en Reprod. Fac. Med. Universidad de Buenos Aires
Las quemoquinas son proteínas que regulan la migración y reclutamiento de leucocitos. MIP-1ß, miembro de la familia C-C de
quemoquinas, es un quimioatractante para monocitos y linfocitos T. La orquitis autoinmune experimental (OAE), inducida en la
rata por inmunización activa con homogenado testicular mas adyuvantes, se caracteriza por un infiltrado de linfomonocitos en el
intersticio testicular. El objetivo del trabajo es el estudio de MIP-1ß en dicho modelo. Mediante la técnica de ELISA se cuantificó
la expresión de MIP-1ß en suero, medio condicionado de macrófagos testiculares (MCM) y fluído testicular (F) de ratas controles
(C) y experimentales (E). Los datos demuestran que existe una mayor expresión de dicha quemoquina en el MCM y F de los
animales E. MCM (E vs C): 117,3±32.1 vs 1225,8±155,4 (p<0,05) y F: 951,3±126,2 vs 3070,3±1604 (pg/ml) (p<0,05). Por
técnicas de inmunoperoxidasa se detectó MIP-1ß y su receptor (CCR-5) en cortes de testículo obtenidos en crióstato. MIP-1ß se
observó en la zona perivascular y CCR-5 en los macrófagos testiculares.
Estos resultados sugieren que MIP-1ß junto con la proteína quimioatractante de monocitos-1 (MCP-1), previamente estudiada,
estarían involucradas en la patogenia de la OAE facilitando la migración y extravasación celular en el testículo.
(96) 903. ESTUDIO DE LOS MACRÓFAGOS TESTICULARES Y EXPRESIÓN DE
INTERLEUQUINA-6 (IL-6) EN UN MODELO DE ORQUITIS AUTOINMUNE EXPERIMENTAL
(OAE) RIVAL CLAUDIA, THEAS Susana , LUSTIG Livia
Centro de Investigaciones en Reproducción, Facultad de Medicina, Universidad de Buenos Aires
Previamente hemos descripto, en la OAE, un aumento de IL-6 en el medio condicionado de macrófagos y del número de células
germinales que expresan el receptor de la IL-6. El objetivo de este trabajo fue caracterizar la población de macrófagos
testiculares que sintetiza IL-6 y determinar si dicha citoquina está involucrada en la apoptosis de las células germinales. La OAE
se indujo en ratas por inmunización activa con antígenos espermáticos y adyuvantes (grupo E). Por inmunohistoquímica
utilizando anticuerpos ED1 y ED2, se identificaron en el testículo, dos poblaciones de macrófagos, aquellos que llegan por
circulación y los residentes, respectivamente. Se observó un incremento en el número de macrófagos ED1((+)) y ED2((+)) en las
ratas con OAE respecto de ratas normales (N) y controles (C, sólo inyectadas con adyuvante). Nro de macrófagos x10((6)); ED1:
N: 4.40±0.59; C: 10.28±0.65*; E: 14.23±1.29*; ED2: N: 7.32±0.47; C: 11.21±0.57*; E: 17.36±1.42*, *p<0.05 vs N y C). El 100% de
los macrófagos que expresan IL-6 son ED1((+)). Por experimentos in vitro se observó una disminución significativa de la
viabilidad celular y apoptosis de células germinales de ratas N incubadas con IL-6.
Los resultados sugieren que en el testículo de ratas con OAE hay un aumento de ambas poblaciones de macrófagos siendo los
ED1((+)) los principales responsables de la secreción de IL-6. Por otra parte, esta citoquina podría estar involucrada en el daño
del epitelio germinal.
(97) 904. LA ENCEFALOMIELITIS AUTOINMUNE EXPERIMENTAL (EAE) AGUDA ES
DIFERENCIALMENTE REGULADA POR SUPRESIÓN DE ESTEROIDES SEXUALES MACCIO
DANIELA RITA, DITAMO Yanina, DEGANO Alicia, ROTH German
CIQUIBIC-CONICET-Universidad Nacional de Cordoba Departamento de Química Biológica
Se estudió el desarrollo de la EAE luego de la supresión por castración quirúrgica de los esteroides sexuales, previo a la
inducción de la EAE con mielina en AFC. Los grupos analizados fueron: machos intactos (I/EAE), castrados (C/EAE), sham con
solo una incisión escrotal (S/EAE) y hembras (H/EAE). S/EAE mostró los síntomas clínicos de la EAE aguda a los 11 días post-
inducción (dpi) y luego se recuperaron, alcanzando en 5-6 días un estado similar a los controles. C/EAE presentó un comienzo de
la enfermedad 3-4 días más tarde que S/EAE con un lento período de recuperación sin alcanzar aún a los 35 dpi el estado
normal. Los grupos I/EAE y H/EAE se comportaron similar a S/EAE. Además se comparó la respuesta inmune contra la proteína
básica de mielina (PBM). C/EAE presentó menor respuesta de hipersensibilidad retardada que S/EAE. Asimismo S/EAE mostró
una respuesta de células T anti-PBM a los 14 dpi mientras que en C/EAE esta respuesta fue observada a 14 y 35 dpi. Los
anticuerpos anti-PBM a 14 dpi en C/EAE mostraron mayor diversidad de reacción contra diferentes péptidos de PBM distinto a
S/EAE cuyos anticuerpos fueron contra un solo péptido. A 35 dpi ambos grupos amplificaron el reconocimiento hacia los cuatro
péptidos analizados. Los títulos de IgG, IgG2a e IgG2b anti-PBM en C/EAE fueron semejantes a 14 dpi y más altos a 35 dpi que
en S/EAE.
La supresión de esteroides sexuales por castración altera la respuesta inmune contra PBM y regularía diferencialmente el curso
de la EAE.
(98) 909. ENCEFALOMIELITIS AUTOINMUNE EXPERIMENTAL (EAE): ESTUDIO
COMPARATIVO DE LA RESPUESTA AUTOINMUNE EN ANIMALES JÓVENES Y
ENVEJECIDOS DITAMO YANINA, MACCIO Daniela, DEGANO Alicia, ROTH German
CIQUIBIC-Fac. de Ciencias Qcas. UNC Departamento de Química Biológica - Universidad
Nacional de Cordoba
La esclerosis múltiple es una enfermedad autoinmune con mayor incidencia en adultos jóvenes y rara en niños o ancianos.
Estudiamos el desarrollo de la EAE en animales jóvenes y envejecidos y la respuesta inmune en distintas etapas de la
enfermedad. La EAE inducida en ratas Wistar de 7 semanas (J/EAE) se caracterizó por un periodo agudo con síntomas
neurológicos en el 59% de los animales inmunizados. En los animales de 15-18 meses (E/EAE) el estadío agudo comenzó mas
tardíamente, con una incidencia de sólo 14,6%. La respuesta de células T contra la proteína básica de mielina (PBM) en el grupo
E/EAE no se limitó al periodo agudo como en J/EAE sino que se mantuvo durante la recuperación. La relación entre los isotipos
IgG2b e IgG1 anti-PBM indicó una respuesta preferencial tipo Th1 durante el período agudo de ambos grupos y una desviación
hacia Th2 durante la recuperación, pero con una respuesta de mayor magnitud en J/EAE. Cuando se estudió la especificidad de
respuesta humoral contra diversos epitopes de PBM, durante el período agudo el grupo J/EAE mostró una respuesta dominante
contra la secuencia 95-128, principalmente las ratas con parálisis. El grupo E/EAE no mostró esta dominancia. Por otra parte, en
ambos grupos la etapa de recuperación se caracterizó por una mayor heterogeneidad y magnitud de la respuesta anti-PBM.
La diferente naturaleza de la respuesta anti-PBM en animales envejecidos podría explicar la mayor resistencia a la aparición de
los síntomas neurológicos.
(99) 959. EFECTOS PERIFERICOS SOBRE LA ACTIVIDAD LINFOCITARIA PRODUCIDOS
POR LA REGULACION "IN VIVO" DEL EJE TIROIDEO. KLECHA ALICIA, GORELIK Gabriela ,
PIROLA Carlos, GENARO Ana maria, BARREIRO ARCOS Maria laura, GARCIA Silvia,
SCHUMAN Mariano , ALVAREZ Azucena, CREMASCHI Graciela
Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos CEFYBO-CONICET. Instituto de Investigaciones
Medicas A.Lanari, UBA
Los sistemas inmune y endócrino funcionan en forma coordinada, habiéndose evidenciado su carácter bidireccional. En este
trabajo se analiza la modulación de la actividad linfocitaria por el eje tiroideo en ratones BALB/c eutiroideos (E), hipertiroideos
(RT4, inoculados con 40 µg/ día de tiroxina, T4, por 1 mes) e hipotiroideos (PTU, tratados con propiltiouracilo al 0.05% en el agua
de bebida por 15 días). Los valores séricos de T4 (µg/dl), T3 (ng/dl) y TRH hipotalámica (pg/mg de proteína) respectivamente,
confirmaron cada status tiroideo: E 4.5±0.4; 106±9; 625±50, RT4 28.7±1.7; 479±80; 309±38; PTU 64±7; <1.7; 1348±132. Se
cultivaron linfocitos de ganglio con Con A, 2 µg/ml y de bazo con LPS, 15 µg/ml, calculándose los índices de estimulación (IE)
(dpm con mitógeno / dpm basal, por incorporación de [3H]Timidina) y se relacionaron con la actividad de proteína quinasa C
asociada a membrana (PKCm, por fosforilación de histona). Resultados: IE Con A y LPS respectivamente: E=340±17 y 133±18;
RT4= 580±31* y 189±13.5*; PTU=73±5* y 57±4*. PKCm (pmol/min/10((7))cel): E=2.5±0.2; RT4= 6.8±0.5*; PTU=1.9±0.2, p<0.01.
Además se observó que el status tiroideo no modifica la relación CD4+/CD8+ ni la proporción de células CD4-CD8 negativas.
Los resultados muestran que la modulación "in vivo" del eje tiroideo ejerce una acción sobre la proliferación linfocitaria, sin alterar
la proporción de los subtipos celulares, a través de la regulación de la actividad de PKC.
(100) 1014. FOSFATASA ACIDA PROSTÁTICA (PAP) ES RECONOCIDA POR LA
RESPUESTA INMUNE EN MODELOS EXPERIMENTALES DE PROSTATITIS AUTOINMUNE
MOTRICH RUBEN DARIO, MACCIONI Mariana, RIERA Clelia, RIVERO Virginia
Inmunología. Dpto. Bioquímica Clínica. Fac. Cs. Qcas. Universidad Nacional de Córdoba.
La prostatitis crónica no bacteriana (NBP) es una patología cuya etiología y patogénesis estan poco esclarecidas, en parte debido
a la falta de modelos experimentales apropiados. Hemos demostrado respuesta autoinmune contra antígenos prostáticos en un
grupo de pacientes con NBP, siendo PAP uno de los principales antígenos reconocidos. En este trabajo analizamos si PAP es
capaz de inducir prostatitis autoinmune en ratones C57BL/6 con el objetivo de describir un modelo experimental más ajustado a
la realidad. Para ello, se inmunizaron ratones con extracto prostático humano total (EP) (grupo 1; n=7) o PAP (grupo 2; n=7) y se
estudió la respuesta inmune humoral, celular y la lesión histológica en próstata.Tanto los animales del grupo 1, como los del
grupo 2 desarrollaron respuesta celular (Indices de proliferación:10.52 ± 1.44 y 10.25±2.9 respectivamente) y humoral
(absorbancia a 490nm: 1,8 ± 0.9 y 1.25 ± 0.2 respectivamente) contra PAP. Observamos infiltrados focalizados de neutrófilos y
linfocitos en próstata de animales del grupo 2 y en menor grado en los del grupo 1. En ningún caso se observaron alteraciones
histológicas en vesicula seminal. Aunque ambos grupos desarrollaron respuesta inmune humoral y celular contra PAP, las
lesiones histológicas más severas se encontraron en el grupo 2.
Podemos concluir que PAP es un buen antígeno inductor de prostatitis autoinmune. Nuevas formas de inmunización serán
exploradas para lograr inducir mayores lesiones en el órgano blanco.