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PROTOCOLO DE ESTUDIO CL�NICO

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PROTOCOLO DE ESTUDIO CL�NICO
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PROTOCOLO CLÍNICO









FLIDVAX 2006





Vacuna idiotípica para el tratamiento

de linfoma folicular

en primera recaída o progresión









Fecha del protocolo: Versión Agosto de 2006









Declaración de confidencialidad



Este documento contiene información confidencial que no debe revelarse a ninguna persona distinta del

personal del estudio y los miembros del Comité Ético de Investigación Clínica. Esta información no

puede ser utilizada para ninguna finalidad distinta de la evaluación o realización de la investigación

clínica sin el consentimiento previo por escrito del investigador principal.

Código de protocolo: FLIDVAX 2006









1. RESUMEN



1. Investigador Principal Dr. Maurizio Bendandi

Servicio de Hematología

Clínica Universitaria

Avda. PIO XII nº 36

31008 Pamplona. España

Teléfono: +34 948 255400 ext 2656

Fax: +34 948 296500

e-mail: mbendandi@unav.es



2. Coordinador del Dra. Mercedes Rodríguez Calvillo

estudio Centro de Investigación Médica Aplicada

Avda PIO XII nº 55

31008 Pamplona. España

Teléfono: +34 948 194700 ext 1017

Fax: +34 948 194714

e-mail: mrodriguec@unav.es



3. Título del protocolo Vacuna idiotípica para el tratamiento de linfoma folicular en

primera recaída o progresión

4. Código del protocolo FLIDVAX 2006

5. Enfermedad en estudio Linfoma folicular en primera recaída o progresión



6. Variable principal de Supervivencia libre de recaída, definida como el tiempo desde la

valoración remisión completa alcanzada tras el tratamiento previo a la

vacunación hasta la recaida de la enfermedad.



7. Variable secundaria de Tasa de curación de los pacientes, definiendo como curados a

valoración aquellos pacientes cuya 2ª RC dure más de quince años.



8. Población en estudio Pacientes de ambos sexos, mayores de 18 y menores de 65 años,

con linfoma folicular en primera recaída o progresión, confirmado

histológicamente, de grado 1, 2 ó 3a.



9. Tamaño de la muestra 100 pacientes



10. Calendario y fecha Se espera reclutar a todos los pacientes en un periodo de 5 años.

prevista de inicio Inicio: A partir de la aprobación del Comité de Ética del Centro









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Código de protocolo: FLIDVAX 2006









2. ÍNDICE

PÁGINA



1. .... RESUMEN 2

2. ÍNDICE 3

3. INFORMACIÓN GENERAL 5

IDENTIFICACIÓN DEL PROTOCOLO 5

DESCRIPCIÓN DE LOS PRODUCTOS EN ESTUDIO 5

DATOS RELATIVOS AL PROMOTOR 5

DIRECTOR TÉCNICO RESPONSABLE DE LAS MUESTRAS 5

IDENTIFICACIÓN DEL MONITOR 5

DURACIÓN PREVISTA DEL ESTUDIO 5

4. JUSTIFICACIÓN Y OBJETIVOS 6

JUSTIFICACIÓN 6

OBJETIVOS 15

5. TIPO DE ESTUDIO Y DISEÑO DEL MISMO 15

6. SELECCIÓN DE LOS PACIENTES 16

CRITERIOS DE SELECCIÓN 16

NÚMERO PREVISTO DE PACIENTES 18

CRITERIOS DE RETIRADA 18

7. DESCRIPCIÓN DEL TRATAMIENTO 18

8. TOXICIDAD 19

ACONTECIMIENTOS ADVERSOS 19

TOXICIDAD 20

9. EVALUACIÓN DE LA RESPUESTA DEL ESTUDIO 21

CRITERIOS DE VALORACIÓN DEL ESTUDIO 21

EVALUACIÓN DE LA ENFERMEDAD 21

10. CONSIDERACIONES ESTADÍSTICAS 25

11. ASPECTOS ÉTICOS 25

DECLARACIÓN DE HELSINKI 25

BUENA PRÁCTICA CLÍNICA 25

COMITÉ ÉTICO DE INVESTIGACIÓN CLÍNICA 25

CONSENTIMIENTO INFORMADO 26

RETIRADA DE UN SUJETO 26

ANONIMATO DEL SUJETO 26

MODIFICACIONES DEL PROTOCOLO 26

CUADERNO DE RECOGIDA DE DATOS 26

12. CONSIDERACIONES PRÁCTICAS 27

13. BIBLIOGRAFÍA 28









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Código de protocolo: FLIDVAX 2006









APÉNDICES



APÉNDICE A: SISTEMA DE CLASIFICACIÓN DEL LINFOMA FOLICULAR

APÉNDICE B: CLASIFICACIÓN DE FLIPI

APÉNDICE C: ESTADIOS DE ANN ARBOR

APÉNDICE D: CRITERIOS PARA LA EVALUACIÓN DE LAS RESPUESTAS EN LINFOMAS NO HODGKIN

APÉNDICE E: ESTADO DE EVOLUCIÓN SEGÚN ECOG

APÉNDICE F: VALORACIÓN DE LA TOXICIDAD SEGÚN LA OMS

APÉNDICE G:TRATAMIENTO PROPUESTO PARA LA INDUCCIÓN DE LA SEGUNDA REMISIÓN COMPLETA

APÉNDICE H: EVALUACIÓN RESPUESTA INMMUNOLÓGICA

APÉNDICE I: EVALUACIÓN ENFERMEDAD MÍNIMA RESIDUAL

APÉNDICE J: HOJA DE INFORMACIÓN AL PACIENTE Y CONSENTIMIENTO INFORMADO

APÉNDICE K: MEMORIA ECONÓMICA ESTUDIOS IN VITRO









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Código de protocolo: FLIDVAX 2006









3. INFORMACIÓN GENERAL





A. IDENTIFICACIÓN DEL PROTOCOLO:



Código del protocolo: FLIDVAX 2006





B. DESCRIPCIÓN DE LOS PRODUCTOS EN ESTUDIO:



Vacuna idiotípica, compuesta de 0.5 mg del idiotipo paciente-específico conjugado a 0.5 mg de KLH

grado clínico (Vacmune), administrada según el calendario que se detalla más adelante, hasta

completar un mínimo de 10 vacunaciones.







C. DATOS RELATIVOS AL INVESTIGADOR:



Investigador principal



Dr. Maurizio Bendandi

Servicio de Hematología. Clínica Universitaria

Avda. Pio XII nº 36, 31008 Pamplona. España

Teléfono: +34 948 255400 ext 2656

Fax: +34 948 296500

e-mail: mbendandi@unav.es



Coordinador del estudio



Dra. Mercedes Rodríguez Calvillo

Centro de Investigación Médica Aplicada

Avda PIO XII nº 55

31008 Pamplona. España

Teléfono: +34 948 194700 ext 1017

Fax: +34 948 194714

e-mail: mrodriguec@unav.es







D. DIRECTOR TÉCNICO RESPONSABLE DE LA ELABORACIÓN/CONTROL DE LAS

MUESTRAS:

Dra. Susana Inogés

Servicio de Inmunología. Clínica Universitaria

Avda. Pio XII nº 36, 31008 Pamplona. España

Teléfono: +34 948 255400

Fax: +34 948 296500

e-mail: sinoges@unav.es







E. DURACIÓN PREVISTA DEL ESTUDIO:



Se espera reclutar a la totalidad de los pacientes en un periodo de 5 años.

Los pacientes, una vez alcanzada la remisión completa de la enfermedad, se tratarán mediante

vacunación idiotípica, realizándose un seguimiento hasta que se produzca la recaída de la enfermedad

o durante un periodo máximo de 15 años, tiempo tras el cual podrán considerarse curados en caso de

no haberse producido la recaída.

Por tanto, la duración total del estudio se estima que sea de 20 años.





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Código de protocolo: FLIDVAX 2006









4. JUSTIFICACIÓN Y OBJETIVOS





A. JUSTIFICACIÓN





Antecedentes de la enfermedad



El linfoma folicular (LF) supone aproximadamente una cuarta parte de todos los linfomas no

Hodgkin (LNH), y se caracteriza por ser una neoplasia derivada de los linfocitos B maduros

presentes en la zona centrofolicular del ganglio linfático, normalmente constituido por

centrocitos y centroblastos. Histológicamente, se caracteriza por un patrón infiltrativo nodular

que remeda el folículo del ganglio linfático normal. La morfología celular corresponde a celulas

pequeñas y medianas (centrocitos), aunque también existen algunas células grandes

(centroblastos), la proporción de las cuales permitíria dividir el LF en tres grados según la

clasificación propuesta por la OMS (Véase APENDICE A). Biológicamente, el LF se

caracteriza en la mayoría de los casos por la presencia de la t(14; 18) que afecta al gen bcl-2,

cuya sobre-expresión causa un aumento en la síntesis de la proteína bcl-2, potente inhibidor

de la apoptosis de las células cancerígenas linfoides. El transcurso clínico del linfoma es en

general relativamente poco agresivo, y se caracteriza por periodos de recaída y remisión que

llevan a la mayoría de los pacientes a fallecer tras múltiples remisiones y posteriores recaídas,

con una supervivencia media de entre 8 y 10 años (sin embargo, tan sólo de 5 años para

aquellos pacientes con un índice pronóstico FLIPI de 3, 4 o 5) (APÉNDICE B). Debido a sus

características evolutivas, es una enfermedad en la que se han ensayado multiples citóstaticos

como prednisona, antraciclinas, agentes alquilantes, etopósido, Ara-C o cisplatino. Sin

embargo, en los últimos años las opciones terapeúticas para esta enfermedad se han

incrementado enormemente con la utilización de análogos de las purinas o del anticuerpo

monoclonal anti-CD20 conjugado o no a moléculas radiactivas. El empleo de estos nuevos

tratamientos parece traducirse en resultados muy alentadores. Además, como consolidación

de la respuesta obtenida con la quimioterapia de rescate, se ha extendido el uso del trasplante

autólogo de progenitores hematopoyéticos, terapia que se ha relacionado con un considerable

incremento en la supervivencia libre de recaida de estos pacientes. A pesar de los últimos

avances, el linfoma folicular debe seguir considerándose una enfermedad incurable, si bien ya

hay estudios que demuestran cómo un abordaje quimio-inmunoterápico podría proporcionar

mayor beneficio que la poliquimioterapia aislada.









Anti-CD20 (Rituximab) en linfoma folicular

Más del 90% de los linfomas de extirpe B expresan el antígeno CD-20 en su membrana, y el

anticuerpo quimérico anti-CD20 ya ha demostrado ser muy eficaz, además de poco tóxico, en

el tratamiento de los linfomas de células B. Así es capaz de inducir tasas de respuesta de

entre 50-80% al administrarse como monoterapia (1-5), mientras que al combinarse con otros

fármacos estas respuestas pueden llegan a ser del 90% sin añadir toxicidad significativa (6-8).

Estos resultados han llevado a incluir el rituximab en el tratamiento de inducción habitual para

los pacientes con linfoma folicular al diagnóstico (R-CHOP, R-CVP; R-FCM, R-FMD, R-MCP,

etc). En este sentido, todos los estudios aleatorizados que han comparado la poliquimioterapia

con/sin rituximab han demostrado la clara superioridad en términos de tasa de respuesta de la

combinaciones que incluían el anticuerpo monoclonal (9-11).

Además, gracias a la evidencia de que los pacientes que respondían previamente a rituximab

pueden responder a un segundo ciclo de tratamiento (12), también numerosos investigadores





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Código de protocolo: FLIDVAX 2006









han analizado el papel de rituximab como tratamiento de mantenimiento para pacientes con

LNH. Así en el ensayo SAKK 35/98, realizado en pacientes con linfoma folicular no tratado o

con recaída (5), el tratamiento prolongado con rituximab tras el tratamiento de inducción con

monoterapia dio como resultado una supervivencia libre de recaída (SLR) significativamente

más larga en comparación con la ausencia de tratamiento adicional tras el tratamiento de

inducción, lo que confirma el papel del tratamiento de mantenimiento en una práctica clínica

aleatorizada. Recientemente estos datos se corroboraron en el estudio ECOG 1496. Este

ensayo evaluaba el tratamiento de mantenimiento con rituximab (2 años) frente a la ausencia

de tratamiento en pacientes al diagnóstico tratados con CVP, y tuvo que interrumpirse

bruscamente tras un análisis intermedio, ya que la rama de mantenimiento con rituximab tenía

una supervivencia libre de progresión media de 4,2 años en comparación con 1,5 años en el

grupo de observación (Intergroup: Van Oers, ASH 2005).

En cuanto a los tratamientos para pacientes en recaída, éstos generalmente incluyen

fármacos no utilizados en primera línea, con el fin de evitar resistencias y minimizar la

toxicidad acumulativa. Entre ellos, el regimen ICE (ifosfamida, carboplatino y etopósido) se

puede utilizar para pacientes en recaída que van a ser sometidos a un autotrasplante, ya que

posee las ventajas de ser eficaz en cuanto a la citoreducción tumoral, no ser particularmente

tóxico para la médula ósea, y además ser muy buen movilizador de células progenitoras

hematopoyéticas (13). Con la intención de llegar a mejorar la respuesta clínica de los

pacientes en recaída, varios centros han incluido el anticuerpo anti-CD20 en el regimen ICE

(R-ICE) con resultados muy prometedores. Entre éstos destaca un estudio llevado a cabo por

la Dra. Vose en la Universidad de Nebraska, administrando R-ICE de forma ambulatoria a

pacientes con linfoma no Hodking resistente. Así, tras la administración de únicamente 2 ciclos

de R-ICE, se obtuvo una tasa de respuesta global del 70%(14), muy superior a la que se

obtendría con ICE sólo, lo que apoya el empleo de R-ICE en pacientes con linfoma en recaída

y que vayan a ser trasplantados.







Radioinmunoterapia en el linfoma folicular

A pesar de que el rituximab ha supuesto una verdadera revolución en cuanto a la respuesta

alcanzada en los pacientes con linfoma folicular, sigue siendo necesario desarrollar nuevas

terapias que de forma aislada o en combinación supongan un verdadero beneficio en cuanto a

lograr la posible curación definitiva de estos pacientes. Así en los ultimos cinco años se han

desarrollado dos nuevos fármacos que conjugan el anti-CD20 a moléculas radiactivas,

combinando las ventajas del rituximab a las de una radioterapia principalmente focalizada en

el tumor. Estos dos anticuerpos son el 90Y ibritumomab tiuxetan (Zevalin) y el 131I

tositumomab (Bexxar), éste último comercializado únicamente en Estados Unidos.

Los ensayos clínicos de Fase I llevados a cabo con Zevalin han establecido dos tipos de

efectos secundarios asociados al tratamiento: (1) una toxicidad agúda leve relacionada con la

infusión, la unión del fármaco a células CD20+ circulantes y la posterior destrucción de las

mismas y (2) una toxicidad subagúda traducida en una pancitopenia reversible, debido a la

unión del fármaco a células precursoras hematopoyéticas. Esta toxicidad suele producirse

alrededor del segundo mes tras el tratamiento y se recupera alrededor del tercer mes.

En estudios llevados a cabo en pacientes con linfoma folicular tratados previamente con

quimioterapia sola o combinada a rituximab se obtienen tasas de respuesta de hasta el 80%,

con un 30% de respuestas completas empleando una sola dosis de Zevalín (15,16). Además,

cuando se compara la respuesta al radiofármaco con la respuesta al rituximab en pacientes

que no han sido previamente tratados con el anti-CD20, se observan una tasa de respuesta de

hasta el 80% con Zevalín frente al 56% tras rituximab (16,17). Estos estudios, aunque





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Código de protocolo: FLIDVAX 2006









esperanzadores, y debido a que son todos muy recientes, no permiten de momento establecer

ventajas en cuanto a la supervivencia de los pacientes tratados, por lo que ya estan en marcha

otros estudios que avalen los resultados preliminares ya obtenidos.









Trasplante autólogo en el linfoma folicular

Hoy por hoy, a falta de estudios conclusivos sobre tasas de remisiones duraderas con las

nuevas terapias introducidas recientemente, el trasplante autólogo de progenitores

hematopoyéticos (TAPH) ha sido el único abordaje capaz de cambiar la historia natural del

linfoma folicular en un importante número de pacientes. En concreto ya hay numerosos

estudios que comparan favorablemente al trasplante autólogo frente a los más diversos

regímenes de quimioterapia, y en los que de forma muy interesante, el grado histológico del

linfoma no parece influir demasiado en el resultado del trasplante (18). El estudio CUP,

auspiciado por el Grupo Europeo de Trasplante (EBMTR) y llevado a cabo entre 1993 y 1997,

es el único estudio randomizado que ha podido estudiar el papel del trasplante en prolongar

tanto la SLR como la supervivencia global (SG) en pacientes con linfoma folicular en recaida.

Los pacientes tras quimioterapia convencional fueron randomizados en tres grupos: más

qumioterapia, TAPH con producto purgado y TAPH sin purgar. Finalmente, y debido a lo

problemático del reclutamiento los resultados de los pacientes con producto purgado/sin

purgar se analizaron de manera conjunta. Los resultados de SLR y SG a los dos años del

trasplante eran del 55% y 71% respectivamente para los pacientes trasplantados, y de 26% y

46% respectivamente para aquellos que habían recibido tratamiento con quimioterapia

estándar (19).

El TAPH también se ha empleado en linfoma folicular en primera remisión con el fin de

afianzar la respuesta obtenida (20-22), pero a pesar de estos resultados tan consistentes, su

indicación en linfoma folicular no se ha generalizado, probablemente debido a la facilidad de

administración de los nuevos fármacos que adquieren ventaja logística frente a terapias

necesitadas de ingreso hospitalario como el trasplante.

Con el fin de minimizar la posibilidad de recaída tras el trasplante, numerosos investigadores

están incorporando el uso del anticuerpo monoclonal anti-CD20 marcado o no con 131I

(tositumomab) o 90Y (ibritumomab tiuxetan), en los regímenes de acondicionamiento pre-

trasplante (23-26). Si nos centramos en aquellos estudios llevados a cabo con 90Y-ibritumomab

tiuxetan (ya que, como hemos mencionado, el 131I no se encuentra comercializado en Europa)

sus resultados son muy esperanzadores, y a pesar de que son estudios muy recientes, a los

dos años del trasplante la supervivencia libre de progresión oscila entre el 47% (26) y el 78%

(25). A falta de las conclusiones de estos estudios, si se analizan los resultados del grupo de

Seattle comparando su esquema clásico de acondicionameinto versus el acondicionamiento

incluyendo tositumomab, encontramos mejores respuestas y menos toxicidad en el grupo que

ha recibido la radioinmunoterapia (27).

Por otro lado, un último mecanismo que podría resultar eficaz de cara a evitar las recurrencias

post-trasplante es el empleo más extenso de la inmunoterapia, ya que es conocido que su

eficacia se ve incrementada en situaciones de enfermedad mínima residual. Sin embargo, en

la actualidad en este campo los tratamientos son practicamente anecdóticos y se basan

fundamentalmente en el empleo nuevamente del monoclonal anti-CD20 o de IL-2 (28).









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Código de protocolo: FLIDVAX 2006









Antecedentes de la vacunación idiotipica

La inmunoglobulina (Ig) es una molécula cuya unidad monomérica está compuesta de dos

cadenas pesadas y dos cadenas ligeras idénticas entre sí, cada una provista de regiones

variables altamente específicas. Las regiones variables de la cadena pesada y ligera se

combinan de tal manera que forman un único sitio para el reconocimiento antigénico, propio de

cada Ig. Estas regiones variables contienen determinantes antigénicos o idiotopos. Se

denomina idiotipo (Id) al conjunto de los idiotopos de cada Ig en cuestión.

Todas las aproximaciones en el campo de la vacunación idiotípica se originan en una idea

relativamente simple, como es que el idiotipo que contiene la Ig sintetizada y expuesta en las

células B neoplásicas del LF es además un antígeno tumor-específico. Esta proteína

básicamente se comporta como un anticuerpo monoclonal que, en cuanto a proteína,

representa a la vez un antígeno que ha fallado en la estimulación del sistema inmune del

paciente para activarlo contra el clon tumoral que lo lleva. Por tanto, los dos principales pasos

a realizar en una estrategia de inmunoterapia activa que conduce a la producción de vacunas

idiotípicas son en primer lugar, purificar el idiotipo y después transformarlo en un inmunógeno

lo suficientemente potente como para ser empleado con intención terapéutica.

Desde que comenzó la investigación sobre vacunas idiotípicas, el linfoma folicular (LF) se ha

mostrado como la diana más clara para estas estrategias de inmunoterapia activa. En el LF la

Ig que contiene el Id debe de ser aislada desde el clon tumoral que constituye su limitada y

única fuente original. Sin embargo y a pesar de la relativa dificultad de obtener el Id de las

células del LF, la buena situación clínica que típicamente caracteriza a estos pacientes, hacen

de esta enfermedad el terreno idóneo para el desarrollo clínico de vacunas anti-Id. Otro punto

fuerte en favor del LF es que aunque sea esencialmente incurable, esta enfermedad se

caracteriza habitualmente por su larga supervivencia independientemente del tratamiento

elegido. Este hecho puede ser considerado como un arma de doble filo: por una parte nos

permite tener mucho tiempo para la costosa labor de producir una vacuna específica del tumor

y del paciente, pero por otra parte se necesita mucho tiempo para que se puedan obtener

conclusiones definitivas sobre la eficacia de cualquier tratamiento en términos de

supervivencia.

La producción de la proteína soluble para la vacuna idiotípica se ha basado durante mucho

tiempo en técnicas de fusión celular y generación de hibridomas, que permite la generación in

vitro exactamente del mismo idiotipo tumor específico que contiene la Ig que se expone en el

clon de células de LF. La suspensión de células individuales que se obtiene de una muestra

de nódulo linfático, por definición, contiene una población residual de linfocitos B normales que

“contamina” la “pureza” del clon de células tumorales. Para estar seguros de que el idiotipo del

hibridoma seleccionado sea completamente idéntico al que se asocia al tumor, todos los

hibridomas tienen que ser testados por medio de identificación mediante PCR del CDR3 de la

cadena pesada de la Ig. Una vez que el sobrenadante obtenido del cultivo del hibridoma ha

producido la cantidad deseada del Id purificado, éste tiene que ser transformado en algo más

inmunogénico que lo que típicamente está en su forma natural. Para ello se conjuga con

“Keyhole limpet hemocyanin” (KLH), un transportador altamente inmunogénico.

Más recientemente, se ha desarrollado un método recombinante para producir el mismo AET

posiblemente a mayor escala. Este método se basa en técnicas de biología molecular y en

particular, en un proceso que consiste en tres pasos fundamentales: amplificación mediante

PCR de la secuencia nucleotídica del Id; clonaje de dicha secuencia en vectores plasmídicos;

y finalmente transfección del vector que contiene la secuencia nucleotídica del gen del Id en

células de mamíferos. Estas células de mamíferos podrían representar una fuente adecuada y

estable de la Ig que contiene el Id tumor y paciente-específico.

La asociación de un adyuvante inmunológico con la vacuna idiotípica (Id-KLH) en forma de

proteína soluble también ha mostrado ser potencialmente decisivo. Hasta la fecha, el factor

estimulante de colonias granulomonocíticas (GM-CSF) parece ser posiblemente el mejor de





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Código de protocolo: FLIDVAX 2006









los adyuvantes testados tanto en ensayos en animales como en humanos, probablemente

debido a su capacidad in vivo para reclutar células dendríticas al lugar de la inyección de la

vacuna.







Antecedentes de la vacunación idiotípica en humanos



Los primeros esfuerzos para explotar en una situación preclínica el Id tumor-específico como

antígeno diana fueron llevados a cabo en 1975 en mieloma múltiple (29) y en 1982 en linfoma

folicular (30). En cuanto al tratamiento de pacientes afectos de este tipo de tumores, ha sido

necesario que pasaran más de 20 años para que primero la Universidad de Stanford y poco

después el National Cancer Institute desarrollaran estudios destinados a valorar el impacto

terapéutico real de este tipo de vacunas en pacientes con linfoma, habiendo demostrado que

las vacunas idiotípicas pueden inducir respuestas inmunes humorales y celulares capaces de

combatir la enfermedad con mínimos efectos secundarios.

En la siguiente figura (figura 1) se detalla el esquema de tratamiento de todos los estudios

clínicos publicados hasta la fecha y que emplean vacuna idiotípica en pacientes afectos de

linfoma folicular. En todos ellos, a pesar de que el esquema de tratamiento varia

significativamente, la formulación de la vacuna se ha mantenido idéntica. Así todos ellos

emplearon la vacuna idiotípica en dosis de 0.5 mg de idiotipo conjugado a 0.5 mg de KLH a

una concentración final de 1 mg/ml, de tal manera que los pacientes recibían finalmente 1 ml

de conjugado inyectado de manera subcutánea.







1 sem

Kwak LW et al.

N Engl J Med 1992



Id-KLH









1 sem

Hsu FJ et al.

Blood 1997



Id-KLH









1 mes 2 meses

Bendandi M et al.

Nat Med 1999





Id-KLH









1 mes

Barrios Y et al.

Haematologica 2002





Id-KLH









Figura 1: Esquema terapéutico de los ensayos clínicos empleando vacunación anti-Id en LNH 10

Código de protocolo: FLIDVAX 2006









En 1992, Kwak et al fueron los primeros en demostrar en siete de nueve pacientes con LF en

situación de respuesta completa (RC) o con evidencia de enfermedad persistente después de

quimioterapia, que la vacuna idiotípica era capaz de inducir una respuesta inmune específica

frente al Id (31). En este trabajo, la eficacia de la vacuna idiotípica fue demostrada sólo en

términos de respuesta humoral (una evaluación completa de la respuesta celular estaba fuera

de los objetivos del estudio). En cualquier caso, proporcionó la primera prueba formal de que

los humanos podían ser inmunizados contra un antígeno derivado de su propio tumor. Unos

años más tarde, el mismo grupo tras ampliar el número de pacientes incluidos en el estudio

piloto mencionado, informó del seguimiento a largo plazo de 41 pacientes tratados con la

misma formulación de vacuna idiotípica (32). Los resultados proporcionaron la primera

sensación de que la vacuna idiotípica podría tener un impacto real en la evolución de la

mayoría de los pacientes que experimentan algún tipo de respuesta inmune específica frente

al Id tumoral inducida por la vacuna. Con el fin de determinar cual era la mejor formulación del

adyuvante a emplear, este grupo estableció tres grupos de pacientes: los 9 primeros,

procedentes del estudio piloto previo, recibieron adyuvante incompleto (SAF-1 compuesto por

plurónico L-121, squalano y tween 80 en PBS), otros 9 recibieron un adyuvante completo

(SAF-1 y treonil-muramil-dipéptido), y por último, los 23 pacientes restantes recibieron

adyuvante completo a la máxima dosis tolerada. Finalmente, dado que no se demostraron

diferencias en cuanto a respuesta inmune entre el grupo de adyuvante incompleto y el de

adyuvante completo, los resultados fueron analizados de manera conjunta. Como se

esperaba, en los 41 pacientes vacunados con la vacuna formulada con su propio Id tumor-

específico conjugado con KLH + SAF-1 se indujo una respuesta inmune específica frente a

KLH. Mucho más destacable, 20 de ellos también mostraron una respuesta inmune humoral o

celular en términos de proliferación específica frente al Id. El mayor problema no resuelto en

este campo es que no se ha encontrado ningún procedimiento para predecir que candidatos

desarrollarán con mayor probabilidad una respuesta inmune específica frente al Id. Desde un

punto de vista clínico, en la mayoría de los pacientes que habían sido inmunizados en RC y

que desarrollaron una respuesta inmune tumor-específica se obtuvieron largas supervivencias

libres de enfermedad, mientras que en la mayoría de los que fallaron en el desarrollo de una

respuesta específica contra el idiotipo, aunque también hubieran sido vacunados en RC, no.

Además, los pocos casos de regresiones tumorales registradas en pacientes que tenían

evidencia de enfermedad en el momento de la inmunización parecían depender de la

inducción por la vacuna de una respuesta inmune específica frente al Id. La comparación de

los resultados de los pacientes que responden inmunológicamente con los que no responden

demuestra diferencias estadísticamente significativas entre ambos en términos de

supervivencia global y tiempo libre de progresión entre los pacientes vacunados en primera

RC. Lo mismo pudo ser mostrado en cuanto al tiempo libre de progresión entre pacientes

vacunados sin evidencia de enfermedad y aquellos que habían sido inmunizados con

enfermedad evidente.

Globalmente estos resultados sugieren que las estrategias de inmunoterapia basadas en la

vacunación idiotípica para el LF humano pueden resultar beneficiosas para los pacientes que

la reciben en RC. Sin embargo, al no haberse podido excluir que los pacientes que no

respondían a la vacuna fueran también los que presentaban mayor carga de enfermedad

activa o residual, estos datos no sirvieron como prueba de eficacia clínica.

Aún más llamativos fueron los resultados de un estudio publicado por Bendandi et al en 25

pacientes afectos de linfoma folicular y vacunados con Id-KLH y GM-CSF en primera RC (33).

Es notable que con un seguimiento de aproximadamente 3-6 años, 19 de 22 pacientes

inmunizados mantenían su primera RC. La respuesta inmune celular y humoral inducida por la

vacuna fueron documentadas in vitro en 19/22 y en 16/22 pacientes respectivamente.

Además, todas estas respuestas fueron específicas frente al tumor y al Id. Sin embargo, el

hallazgo más notable de este estudio es la demostración formal, en 9 de 12 pacientes

evaluables, de remisiones moleculares duraderas inducidas por la vacuna, determinadas por





11

Código de protocolo: FLIDVAX 2006









la monitorización de la t(14;18) y el reordenamiento bcl-2 mediante PCR. Lo que se traduce en

que células tumorales que habían resistido a la quimioterapia fueron finalmente destruidas por

el sistema inmune activado tras la vacunación idiotípica.

Ya en nuestro país, el grupo de la Clínica Puerta de Hierro publicó hace unos años los

resultados de 9 pacientes afectos de LF tratados con la vacuna anti-Id. Los seis primeros

incluidos fueron tratados con SAF-1 como adyuvante, mientras que los tres posteriores

recibieron GM-CSF. Todos los pacientes completaron el calendario vacunal y la toxicidad

consistió fundamentalmente en reacciones localizadas en el sitio de inyección. Ninguno de los

pacientes experimentó progresión de la enfermedad durante un periodo de seguimiento de 40

meses y en dos de ellos se llegaron a observar incluso regresiones tumorales. En 8/9

pacientes fue posible hallar una respuesta humoral Id-específica y nuevamente en 3/5 llegaron

a desaparecer las células portadoras del gen bcl-2 reordenado, determinado por PCR (34).

Por último, nuevamente el grupo del Dr. Levy en Stanford acaba de publicar un análisis

retrospectivo de 136 pacientes vacunados, en los que se demuestra que aquellos pacientes en

los que se inducen respuestas humorales Id-específicas presentan supervivencias libres de

recaída más largas que aquellos que no responden inmunológicamente, sin embrago también

han observado largos supervivientes entre los que no responden inmunológicamente

definitivas (35), por lo que parecen necesarios más estudios para poder extraer conclusiones

definitivas.







Experiencia de nuestro centro empleando la vacunación idiotípica



Fuera de los Estados Unidos, nuestro grupo lidera en Europa la aplicación de la vacunación

idiotípica a pacientes con neoplasias hematológicas de extirpe B. En este sentido, iniciamos

hace aproximadamente cinco años un protocolo asistencial de vacunación idiotípica en

pacientes con LF en primera recaída (FLIDVAX), es decir, en pacientes con peor pronóstico

que los tratados al diagnóstico y para los que es probable que sea necesario mucho menos

seguimiento para establecer si la vacuna puede realmente conseguir algun beneficio clínico.

En la siguiente figura (figura 2) se detalla el esquema de vacunación aplicado en nuestro

centro:









Figura 2: Diseño protocolo FLIDVAX









El diseño de nuestro estudio, encaminado a intentar demostrar si la vacunación idiotípica

cambiaba de alguna manera la historia natural del linfoma folicular, estába basado en un

hecho ya conocido, como es que la segunda respuesta completa tras quimioterapia tipo CHOP

tiene una duración mediana de 13 meses (36). Así, con un calendario vacunal lo





12

Código de protocolo: FLIDVAX 2006









suficientemente prolongado y si la vacuna no funciona, al menos un 50% de los pacientes

deberían recaer a pesar de responder inmunológicamente. Con este esquema de

vacunaciones se comprobaría si la vacuna es capaz o no de proporcionar beneficio clínico.

Así, de manera previa a la vacunación, los pacientes recibían tratamiento quimioterápico

estándar (CHOP o CHOP-like) debiendo esperar un mínimo de tres meses desde que

completaban el tratamiento hasta el momento de la vacunación con el fin de que el sistema

inmune se recuperara. Una vez iniciada la misma, se administrarían un total de 10 vacunas a

lo largo de aproximadamente 24-30 meses.

Hasta la actualidad se han incluido en el estudio 33 pacientes procedentes de centros

hospitalarios de toda España, y al observar los resultados clínicos y de respuesta inmune de

los pacientes vacunados, podemos afirmar que dicha metodología consigue beneficio clínico

en una enfermedad de evolución lenta pero que, con los tratamientos habituales de

quimioterapia, sigue incurable. Es decir, la vacunación idiotípica de estos pacientes ha

conseguido cambiar la historia natural del linfoma folicular en aquellos pacientes que han

respondido a la vacuna. En concreto, 25 de los 33 pacientes incluidos ya han finalizado el

calendario vacunal establecido, habiendo podido demostrar que todos aquellos pacientes que

responden inmunológicamente a la vacuna (20/25) tienen una segunda remisión completa de

duración superior a la esperable con quimioterapia sola. Además, en aquellos pacientes con

suficiente seguimiento, la duración de esta segunda remisión completa supera ya a la de la

primera remisión. En nuestra serie, únicamente cinco pacientes no montaron respuesta

inmune alguna frente a la vacuna, comportándose en su evolución clínica como un linfoma

folicular “clásico” al que no se hubiera vacunado, ya que recayeron durante la vacunación, y la

duración de esta segunda remisión fue, como se espera en un LF, inferior a la de su primera

remisión (37).

En el siguiente gráfico (Figura 3) se detalla la curva de supervivencia libre de recaída de todos

los pacientes vacunados, comparándola con la curva que siguieron en su primera remisión

completa. Se observa claramente que los resultados que se obtienen tras la vacunación

idiotípica, cuando se consigue la efectiva inmunización del paciente, son mejores que los

obtenidos con quimioterapia sola y nos alientan a continuar por este camino, ahora intentando

llegar a la posible curación de al menos una proporción de pacientes con linfoma folicular.



1,0









,8









,6

Probabilidad









Log Rank 1 año.

 Funciones hepática, renal y cardiaca normales.

 Edad  18 años y  65 años.

 Estado general ambulatorio ( 2 en la escala de ECOG - véase el APÉNDICE E-).





16

Código de protocolo: FLIDVAX 2006









 Consentimiento informado por escrito previo a la inclusión en el estudio.





Criterios de exclusión del estudio

Los pacientes con cualquiera de los siguientes casos, se excluirán de la entrada en el

estudio:

 Transformación a linfoma agresivo (secundario a un LF de bajo grado).

 Linfoma folicular de grado 3b.

 Presencia de historia de enfermedad del SNC (o bien linfoma del SNC o meningitis

linfomatosa).

 Pacientes que toman regularmente corticosteroides durante al menos las últimas 4

semanas, a menos que se administren a una dosis equivalente a  20 mg/día de

prednisona.

 Pacientes con cánceres anteriores o concomitantes, excepto cáncer de piel distinto al

melanoma o cáncer de cuello uterino adecuadamente tratado in situ.

 Función renal deficiente: Creatinina sérica > 2,0 mg/dl (197 mol/L),

 Función hepática deficiente: bilirrubina total > 2,0 mg/dl (34 mol/L), AST (SGOT) > 3 x el

límite superior normal, a menos que estas anomalías estén relacionadas con el linfoma.

 Infección conocida por VIH o infección activa por VHB o VHC  4 semanas en el registro.

 Enfermedades subyacentes graves, que podrían afectar a la capacidad del paciente para

participar en el estudio (por ejemplo, infección en curso, diabetes mellitus no controlada,

úlceras gástricas, enfermedad autoinmune activa). Queda al criterio del investigador.

 Esperanza de vida 60 frente a  60)

2. Estadio de Ann Arbor (III – IV frente a I – II)

3. Nivel de hemoglobina ( 4 frente a  4)

5. Nivel de LDH sérica (> normal frente a  normal)





Se definieron tres grupos de riesgo:

1. RIESGO BAJO (0 – 1 factor adverso)

2. RIESGO INTERMEDIO (2 factores adversos)

3. RIESGO POBRE ( 3 factores adversos)







Solal-Celigny P, Roy P, Colombat P, White J, Armitage JO, Arranz-Saez R, Au WY, Bellei M,

Brice P, Caballero D, Coiffier B, Conde García E, Doyen C, Federico M, Fisher RI, Garcia-

Conde JF, Guglielmi C, Hagenbeek A, Haioun C, LeBlanc M, Lister AT, López-Guillermo A, Mc

Laughlin P; Milpied N, Morel P, Mounier N, Proctor SJ, Rohatiner A, Smith P, Soubeyran P, Tilly

H, Vitolo U, Zinzani PL, Zucca E, Montserrat E. Follicullar lymphoma internacional prognostic

index. Blood 2004;104:1258-65.









32

Código de protocolo: FLIDVAX 2006









APÉNDICE C :





ESTADIOS DE ANN ARBOR





 Estadio I: Participación de una única región del ganglio linfático.

IE: Participación localizada de un único órgano o sitio extralinfático.





 Estadio II: Participación de dos regiones de ganglio linfático en el mismo lado del

diafragma.

IIE: Participación localizada de un único órgano o sitio extralinfático asociado y sus

ganglios linfáticos regionales con o sin otras regiones de ganglio linfático en el

mismo lado del diafragma.





 Estadio III: Participación de regiones de ganglio linfático en ambos lados del

diafragma.

IIIE: Participación de regiones de ganglio linfático en ambos lados del diafragma

acompañada por participación localizada de un órgano o sitio extralinfático.

IIIS: Participación de regiones de ganglio linfático en ambos lados del diafragma

acompañada por participación del bazo*.

IIIS + E: Ambos IIIS + IIIE *.

(*De mención, en FLIPI, la participación del bazo se clasifica como estadio IV)





 Estadio IV: Participación diseminada (multifocal) de 1 o más sitios extralinfáticos

con o sin la participación asociada del ganglio linfático o participación de un órgano

extralinfático aislado con participación ganglionar distante (no regional).

IVE: Aparición de tumores linfáticos extraganglionares en tejidos separados de, pero

próximos a, los principales agregados linfáticos.









33

Código de protocolo: FLIDVAX 2006









APÉNDICE D:





CRITERIOS PARA LA EVALUACIÓN DE LA RESPUESTA EN LINFOMA NO

HODGKIN





Respuesta completa (RC)



Una respuesta completa requiere lo siguiente:

 La desaparición completa de cualquier evidencia radiográfica, PET y clínica

detectable de enfermedad y desaparición de cualquier síntoma relacionado con la

enfermedad si estaban presentes antes del tratamiento, y la normalización de esas

anomalías bioquímicas [por ejemplo, lactato deshidrogenasa (LDH)] que pueden

asignarse indudablemente a LNH.

 Todos los ganglios linfáticos y masas ganglionares deben experimentar una

regresión hasta su tamaño normal ( 1,5 cm en su diámetro transversal mayor para los

ganglios  1,5 cm antes del tratamiento). Los ganglios implicados anteriormente que

tuviesen de 1,1 a 1,5 cm en su diámetro transversal mayor antes del tratamiento,

deben haber disminuido hasta 1.000

neutrófilos/mm3 durante 3 días.









38

Código de protocolo: FLIDVAX 2006









APENDICE H:





EVALUACIÓN RESPUESTA INMUNOLÓGICA A LAS VACUNACIONES





RESPUESTA INMUNE CELULAR

Tipo de muestra Células diana

Ensayo

Células efectoras Estímulo (si procede)

Id-autólogo

Proliferación Id-control

CMN del paciente Pre-vacunación

(Incorporación de 3 H-Timidina) KLH

Sin estímulo

Id-autólogo

Producción de citoquinas Id-control

CMN del paciente Pre-vacunación

(ELISA IFN, TNF) KLH

Sin estímulo Células tumorales del

Id-autólogo paciente

Producción de citoquinas Id-control

CMN del paciente Post-vacunación

(ELISPOT IFN) KLH

Sin estímulo

Id-autólogo

Citotoxicidad Id-control

CMN del paciente Pre-vacunación

(Liberación de 51Cr) KLH

Sin estímulo









RESPUESTA INMUNE HUMORAL

Ensayo Tipo de muestra Anticuerpo primario

Placas con Id-autólogo

Anti-Idiotipo Suero pre-vacuna

Detección de Placas con Id-control

anticuerpos

(ELISA)

Anti-KLH Suero pre-vacuna Placas con KLH









39

Código de protocolo: FLIDVAX 2006









APENDICE I:





EVALUACIÓN ENFERMEDAD MÍNIMA RESIDUAL







Monitorización Monitorización

Identificación de la secuencia

Muestra (punto de corte de la traslocación) cualitativa cuantitativa

(presencia/ausencia) (Cuantifiación absoluta)

PCR con distintos juegos de

Tumor primers

PCR con primers

Sangre concretos PCR en tiempo real









40

Código de protocolo: FLIDVAX 2006









APENDICE J:





HOJA DE INFORMACION AL PACIENTE Y CONSENTIMIENTO INFORMADO



TITULO DEL ESTUDIO







FLIDVAX 2006

Vacuna idiotípica para el tratamiento de linfomas foliculares

en recaída o progresión









Invitación a participar en el estudio



Hoy, se le va a invitar a participar en este proyecto de investigación después de darle

una información completa sobre el estudio. Depende de usted si decide participar o no

en este estudio. Le rogamos lea este formulario de consentimiento informado por

completo y tómese su tiempo para llegar a su decisión. Le animamos a hablar con su

médico, su familia y/o sus amigos antes de decidir.





Introducción



Existen varias razones por las cuales se está realizando esta investigación:

 Como sabe, usted padece una linfoma folicular que ha recaído o progresado tras

una primera línea de tratamiento. Basándonos en la experiencia previa de otros

centros y en la nuestra propia, la vacuna idiotípica administrada en situación de

remisión completa de la enfermedad podría retrasar o incluso eliminar la

posibilidad de que apareciera una nueva recaída del linfoma.

 Los linfocitos tumorales del linfoma folicular poseen en su membrana una proteína

con unas características concretas que se denomina idiotipo. Cada linfoma

expresa un idiotipo diferente que es como la huella específica de las células

malignas. El fundamento de la vacuna idiotípica es precisamente que el idiotipo es

específico de la enfermedad y de cada paciente. Por lo tanto, si educamos al

sistema inmune a reconocer ese idiotipo y actuar contra las células que expresan y

producen ese idiotipo, podríamos eliminar las células malignas.

 Con el fin de producir las vacunas, es necesario extraer el ganglio linfático enfermo

mediante cirugía. Una vez extraído, usted recibirá el tratamiento necesario para

llegar a una remisión completa de su enfermedad y durante este tiempo, nosotros

intentaremos producir las vacunas idiotípicas específicas para su linfoma.





Descripción de la investigación



 Una vez extraído el ganglio enfermo, nosotros iniciaremos los procesos necesarios

para producir las vacunas idiotípicas a partir de las células de su linfoma. Debe

saber que aproximadamente en un 85% de los casos llegamos a la producción de

las vacunas, pero hay un 15% de ocasiones en las que no es posible llegar a

producirlas por causas posiblemente debidas a la propia biología de las células

41

Código de protocolo: FLIDVAX 2006









tumorales. Por tanto, existe la posibilidad de que finalmente no pueda recibir las

vacunas, sin que esto modifique el tratamiento previsto para llegar a una remisión

completa de su enfermedad.

 Una vez obtenido el idiotipo de sus células tumorales, lo uniremos a un agente

inmunógeno conocido como KLH cuya misión es estimular la respuesta inmune. La

vacuna se administra de forma subcutánea en el brazo. De forma concurrente con

la vacuna le administraremos el GM-CSF (factor estimulador de las células

granulomonociticas) con la intención de favorecer la respuesta inmune. Además el

GM-CSF se administrará también los tres días posteriores a la vacunación en el

mismo sitio donde se inyectó la vacuna propiamente dicha.

 Si Usted es candidato a recibir la vacuna y participar en el estudio, tras haber

recibido todo el tratamiento necesario para llegar a una remisión completa de su

enfermedad y con su sistema inmune totalmente recuperado recibirá un mínimo de

10 vacunas. En el caso de que sea posible producir más de 10 vacunas,

continuaremos administrando vacunas trimestrales hasta agotarlas o hasta la

recaída de la enfermedad, si es que se produjera ántes. Durante todo el tiempo

que dure la vacunación, coincidiendo con el día de administración de la vacuna,

obtendremos muestras de sangre con la intención de determinar si efectivamente

su sistema inmunológico ha desarrollado una respuesta contra las células

tumorales. Estas muestras se almacenarán congeladas y se analizarán

puntualmente de manera conjunta. Los gastos derivados de su análisis correrán

integramente a cargo del equipo investigador y los resultados obtenidos no

influirán de manera alguna en la vacunación que usted reciba.

 Antes de iniciar las vacunaciones se le realizarán pruebas analíticas, de imagen, y

una biopsia ósea con el fin de comprobar el estado de remisión completa de la

enfermedad. Estas pruebas se repetirán a intervalos tanto durante el tiempo que

reciba el tratamiento con la vacuna como de forma posterior.

 Por último, debe conocer que su médico puede decidir retirarle del estudio si su

enfermedad recidiva a pesar de las vacunaciones o si surge nueva información

sobre otros tratamientos más eficaces para usted.





Descripción de los riesgos previsibles y las molestias



 En nuestro centro más de 40 pacientes han sido tratados ya mediante la utilización

de vacunas idiotípicas anti-idiotipo. Estos pacientes estaban también

diagnosticados de linfoma folicular. La gran mayoría de los pacientes en los que su

sistema inmune respondía a las vacunaciones y se mantenía esta respuesta

(aproximadamente un 80% del total) no ha vuelto a recaer de la enfermedad

 El tratamiento con vacunas idiotípicas no produce efectos secundarios

significativos. El tratamiento con GM-CSF puede producirle, aunque muy

raramente, fiebre o malestar general de intensidad leve.





Beneficios esperados

 No podemos garantizar que usted sacará beneficio de su participación en este

estudio, aunque tenemos la razonable certeza científica de que su participación en

este estudio le proporcionará una posibilidad al menos igual a la que podría

esperar únicamente con el tratamiento quimioterápico que tiene previsto recibir. En

cualquier caso, la información que se obtenga en este estudio beneficiará

indudablemente en el futuro a otros pacientes con linfoma folicular.







42

Código de protocolo: FLIDVAX 2006









Condiciones para la retirada

 Su participación en este estudio es completamente voluntaria y se le dará el tiempo

adecuado para decidir si quiere o no participar. Tiene plena libertad en todo

momento para decidir que no quiere seguir participando en el estudio, sin tener

que dar explicación alguna. Su retirada del estudio no afectará de ninguna manera

a su posterior tratamiento ni a su relación con su médico o con el personal del

hospital.





Información adicional

 El estudio supone la recogida de datos contenidos en su historial médico y que

están relacionados con su enfermedad. Es muy importante que la información

recogida sea correcta y, de vez en cuando, puede verificarse con su historial

médico. Personas debidamente autorizadas (personal del Grupo, representantes

de una autoridad sanitaria nacional y/o extranjera) pueden tener acceso a su

historial médico. Toda la información será estrictamente confidencial y su identidad

nunca será revelada. Usted tiene el derecho de acceder a esta información en todo

momento.

 Este protocolo de investigación ha sido presentado a un comité ético cuya misión

es verificar todas las condiciones para su seguridad y que se respeten sus

derechos. La aprobación de esta investigación ha sido dada por el Comité Ético de

con fecha de .





Personas de contacto

 En caso de cualquier problema o si tiene cualquier pregunta, su médico tendrá el

gusto de contestarle y usted puede ponerse en contacto con él como sigue:



Hospital:



Teléfono:



 Si usted da su consentimiento de participación en este estudio, se le proporcionará

un número de teléfono en el hospital mediante el cual puede ponerse en contacto a

cualquier hora si se siente enfermo o si tiene más preguntas. Se le informará

también a su médico de cabecera de su participación en este estudio y lo que esto

implica, si usted está de acuerdo.



Por favor, tómese su tiempo para deliberar esta información y no dude en hacer más

preguntas a su médico si cualquier cosa no está clara. Tiene el derecho de guardar

una copia de este documento después de firmarlo usted y su médico.









43

Código de protocolo: FLIDVAX 2006









Clínica Universitaria Teléfonos:

Central 948/ 25 54 00

Fax 948/ 29 65 00

Facultad de Medicina Apartado, 4209

Universidad de Navarra 31080 PAMPLONA (España)

_________

Servicio de Hematología









CONSENTIMIENTO INFORMADO PARA LA

PRODUCCIÓN DE VACUNA IDIOTÍPICA

PARA LINFOMA FOLICULAR EN PRIMERA RECAÍDA O PROGRESIÓN









D/Dña._____________________________________________ , DNI _____________

DECLARO QUE:

Por parte de el/la médico especialista en Hematología:

Dr(a) _____________________________________________________________, en

presencia del testigo D/Dña_______________________________________________

(DNI____________), se me comunica la posibilidad de iniciar la producción de una

vacuna idiotípica autóloga para el tratamiento del linfoma que padezco y se me explica

que para ello es necesario extraer el ganglio linfático enfermo mediante una

intervención quirúrgica.

Además, se me explica que el hecho de iniciar la producción no garantiza que llegue a

concluirse con éxito, ya que en aproximadamente un 15% de los casos no es posible

llegar a producir las vacunas por causas posiblemente debidas a la propia biología de

las células tumorales. En cualquier caso, la no producción de la vacuna no modificará

el tratamiento quimioterápico previsto para mi enfermedad.









Firma del paciente Firma del testigo









Fecha





44

Código de protocolo: FLIDVAX 2006









Clínica Universitaria Teléfonos:

Central 948/ 25 54 00

Fax 948/ 29 65 00

Facultad de Medicina Apartado, 4209

Universidad de Navarra 31080 PAMPLONA (España)

_________

Servicio de Hematología









CONSENTIMIENTO INFORMADO PARA EL TRATAMIENTO DE

LINFOMA FOLICULAR EN PRIMERA RECAÍDA O PROGRESIÓN

CON VACUNA IDIOTIPICA







D/Dña._____________________________________________ , DNI _____________

DECLARO QUE:

Por parte de el/la médico especialista en Hematología:

Dr(a) _____________________________________________________________ , en

presencia del testigo D/Dña_______________________________________________

(DNI____________), se me comunica la posibilidad de recibir tratamiento con vacuna

idiotípica autóloga para el tratamiento del linfoma que padezco.





Se me informa del tipo de tratamiento que es, de su mecanismo de acción, de los

riesgos y beneficios que puedo obtener y de la alternativa de otros tipos de

tratamiento.

Soy consciente de que este tratamiento no es de uso general, que su utilidad no está

aún establecida y que puede tener algún efecto adverso no descrito anteriormente.

Asumo su utilización buscando un beneficio para el tratamiento de mi enfermedad.

Recibir las vacunas es algo voluntario y puedo renunciar a su administración en el

momento que estime adecuado.









Firma del paciente Firma del testigo









Fecha

45

Código de protocolo: FLIDVAX 2006









Clínica Universitaria Teléfonos:

Central 948/ 25 54 00

Fax 948/ 29 65 00

Facultad de Medicina Apartado, 4209

Universidad de Navarra 31080 PAMPLONA (España)

_________

Servicio de Hematología









CONSENTIMIENTO INFORMADO PARA EL EMPLEO DE MUESTRAS

DESTINADAS A LA INVESTIGACIÓN









D/Dña._____________________________________________ , DNI __________

DECLARO QUE:

Por parte de el/la médico especialista en Hematología:

Dr(a) ___________________________________________________________ , en

presencia del testigo D/Dña______________________________________________

(DNI____________), se me comunica la posibilidad de las muestras de sangre que se

me extraerán habitualmente ántes de cada vacunación, puedan utilizarse para la

investigación (en concreto, para los estudios de respuesta inmune y molecular

mencionados en el protocolo). Sin que esto interfiera de ninguna manera en la

vacunación en sí.









Firma del paciente Firma del testigo









Fecha









46

Código de protocolo: FLIDVAX 2006









APENDICE K:



MEMORIA ECONÓMICA DE LA MONITORIZACIÓN DE RESPUESTA

INMUNE Y DE ENFERMEDAD MÍNIMA RESIDUAL DE LOS PACIENTES EN

ESTUDIO



El presupuesto se ha calculado para cada determinación de cada paciente. Así el presupuesto

final será el que resulte de multiplicar los 100 pacientes que se prevé incluir teniendo en cuenta

que en cada uno de ellos está previsto realizar 13 determinaciones.

Tal y como se ha mencionado en el protocolo, todos los estudios de monitorización de la

respuesta inmune y de la respuesta molecular del paciente correrán a cargo del equipo

investigador.





Presupuesto Monitorización Respuesta Inmune Celular Euros

- Plástico de cultivo (Frascos y placas, pipetas, puntas)......................................................7

- Medio de cultivo.................................................................................................................5

- Kit de ELISPOT anti IFN..................................................................................................20

- Kit de ELISA anti IFN.......................................................................................................13

- Kit de ELISA anti TNF.....................................................................................................13

- Isótopos radiactivos (cromo, timidina tritiada)...................................................................45

Subtotal...................................................................................................................103







Presupuesto Monitorización Respuesta Inmune Humoral Euros

- Plástico de cultivo (Frascos y placas, pipetas, puntas)......................................................3

- Anticuerpos ELISA anti Id..................................................................................................4

- Anticuerpos ELISA anti KLH..............................................................................................4

Subtotal....................................................................................................................11







Presupuesto Monitorización Enfermedad Mínima Residual Euros

- Extracción ADN mediante kit..............................................................................................6

- PCR cualitativa...................................................................................................................6

- PCR en tiempo real (primers y sonda TaqMan, tubos y tapas ópticos, Master mix)........60

Subtotal....................................................................................................................72









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